Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Сложные буфера -- comments to a permanent page of the site --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Тема связана с: Многокомпонентные растворы
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Forum robot
Постоянный участник
на сервере в Москве



 прочитанное сообщение 26.05.2005 20:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Рецепты приготовления и свойства буферов и растворов, применяемых в молекулярной биологии (крупнейшая коллекция в интернете). Все рецепты автоматически пересчитываются для произвольного объёма. Обычно указывается вес компонентов, так что раствор можно приготовить на весах без использования мерной посуды.

Всего благодарностей: 10Поблагодарили (10): KUZYA, inca, PRRSS, k204781, ijohnny, mora733, alisa83, sergiyko2009, larica, Providec
Участник оффлайн! hista




 прочитанное сообщение 26.05.2005 20:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Здравствуйте. Помогите пожалуйста. Срочно нужна пропись приготовления 0,1 М фосфатного буфера(натриевого)рН-9,4. Я смотрела способ приготовления в древних книгах - там только до рН-8,5. Если кто знает пришлите, пожалуйста, на электронный адрес:
nataly-123@list.ru
Это очень важно и нужно для меня.
hista. Спасибо.
Участник оффлайн! bukach
Постоянный участник
Geneva, Switzerland



 прочитанное сообщение 26.05.2005 21:51     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

вы не написали какой объем буфера вам нужен. обозначу его V (в литрах)
берете навеску Na2HPO4 м=142*0,1*V масса в граммах. растворяете ее в объеме немного меньшем V, затем берете NaOH и на рН-метре доводите рН затем доводите объем до нужного. фсе.
иногда Na2HPO4 бывает в виде кристаллогидратов (на банке посмотрите)если это так, то вместо 142 в формулу нужно будет подставить мол. массу кристаллогидрата - 142+(колво молекул H20)*18
а вы уверены что вам нужет именно фосфатный буфер, а не боратный например? фосфат при 9.4 буферить не будет.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Nastasia
Участник оффлайн! bukach
Постоянный участник
Geneva, Switzerland



 прочитанное сообщение 26.05.2005 21:53     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

блин, не помню какой будет рН раствора Na2HPO4 достаточно щелочной, не помню, больше нужного вам или нет. если нет, то все ок. если да, то возьмите NaH2PO4 (его мол.масса 120) тоже бывает в виде кристаллогидратов.

все это скинула на мейл

Сообщение было отредактировано bukach - 26.05.2005 21:54
Участник оффлайн! Oleg Klychnikov
Постоянный участник
Moscow/Amsterdam->Leiden



 прочитанное сообщение 26.05.2005 22:13     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

оффтоп

фосфатный буфер - это паранойя!
я думаю, что Редактору надо на стартовой странице
привесить ссылку на "Метды приготовления Фосфатных БуферОв"

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): bukach
Участник оффлайн! Oleg Klychnikov
Постоянный участник
Moscow/Amsterdam->Leiden



 прочитанное сообщение 26.05.2005 22:57     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

и не буферА они.... эти - совсем в дргом месте...
а бУферы
ну... не могу уже...

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): bukach, Alta
Участник оффлайн! bukach
Постоянный участник
Geneva, Switzerland



 прочитанное сообщение 27.05.2005 04:07     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

ох, Oleg Klychnikov, как жаль что дают цветочек добавить только один раз. за пост о "буферАх" я бы вам сакуру в цвету вырастила!
а еще ежели к названиям придираться, то и фосфатный буфер ну страсть какой сложный wink.gif замутить чтоль тему в беседе с названием типа "умеете ли вы готовить фосфатный буфер"? lol.gif

а вообще то с такого хочется weep.gif ... хрень какая то с образованием... надо с этим бороцца...

за оффтопик - shuffle.gif

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Oleg Klychnikov
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 27.05.2005 14:16     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Букач- "Почетный борез с народным образованием" tongue.gif
Участник оффлайн! tryptophobe

Shreveport, LA



 прочитанное сообщение 06.10.2005 21:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование
Информация
Ниже приводится, если кому-то интересно, состав буфера для переноса (иммуноблот), которым мы пользуемся. Приведено количество для двадцатикратного стока и готового однократного буфера.

Transfer buffer

FW x20, mM 500 ml 1000 ml

Bicin 163.17 500 40.79 81.59
Bis-Tris 209.24 500 52.31 104.62
EDTA*4H20 452.24 10.2 2.31 4.61
Chlorobutanol* 177.46 5.4 0.48 0.96

1x готовый transfer buffer (1 L)

20x transfer buffer - 50 ml
Methanol abs. - 100 ml
Вода - до 1 л

*1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol hydrate
Гость
IP-штамп: frftLGqhpFF.A
гость



 прочитанное сообщение 11.01.2006 03:28     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

Если у Вас на сайте есть эти растворы и я их проглядел - простите великодушно. А то пусть будут.

Среда для заморозки клеток:(100 ml)
50 ml DMEM (containing 4.5 g/L glucose,
110 mg/L sodium pyruvate and 2 mM
L-glutamine)
40 ml heat-inactivated fetal bovine serum
10 ml dimethylsulfoxide (DMSO)
Filter sterilize

буфер HBS:
280 mM NaCl
1.5 mM Na2HPO4
50 mM HEPES
Adjust the pH to 7.10 with NaOH

раствор Trypsin-EDTA:
0.53 mM EDTA
0.05% trypsin
Гость
IP-штамп: fr2TrCt5Dwfag
гость



 прочитанное сообщение 10.03.2006 11:38     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

Где можно купить "Kit for Molecular weight for gel electrophoresis"?
Гость
IP-штамп: frPlS0ztFA68w
гость



 прочитанное сообщение 28.04.2006 15:29     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

Для создателей этих таблиц!!!
Я даже не знаю стоит ли верить тому что здесь написано...
Например в таблице расчета "Смесь для окрашивания олигонуклеотидных гелей" расписаны количества реагентов на 100 ml но если все слить так как указано получится 110 ml где ошибка? Для кого это сделано...
Участник оффлайн! hemul
Участник
Москва



 прочитанное сообщение 13.06.2006 17:01     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

Такой вот вопрос про буферы, новичковый. Часто встречаю прописи одного и того же буфера с некоторыми отличиями и добавками. Например, PBS.
1. Он бывает с калиевыми фосфатными солями, а бывает с натриевыми, или с теми и другими.
2. В него добавляют NaCl, а иногда KCl.
3. Добавляют ПЭГ, Tween.
На что все это влияет? На что влияет концентрация буфера (кроме ионной силы)?
Чем принципиально отличается PBS от Tris буфера?
Зачем в буфер добавляют азид натрия NaN3?
Спасибо заранее!
ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 13.06.2006 20:23     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

-- Часто встречаю прописи одного и того же буфера с некоторыми отличиями и добавками. Например, PBS.

А кто вам сказал что это один и тот же буфер. Это слэнг в некотором смысле, обозначающий рраствор примерно изотонический физиологическому и забуференный фосфатными солями с небольшой буферной емкостью.
---Добавляют ПЭГ, Tween.
Просто PBS с ПЭГ ом и Тв не бывает. Обычно пишут, что PBS с добавками того, сего, пятого.

---На что все это влияет?

На такой вопрос - ответ: на все, и не на что.

---На что влияет концентрация буфера (кроме ионной силы)?
От концентрации буфера зависит его емкость.

---Чем принципиально отличается PBS от Tris буфера?
--"А почему вы спрашиваете?" <c>
Чем принципиально отличается билистиллят от милипоровской воды? smile.gif

Вот например такой ответ: трис дороже раз в десять. Или трис более сладкий на вкус.

1) почитайте учебник по буферам или хотя бы вводную статью в справочнике Доусона.
2) Почитайте учебник по питательным средам для клеточных культур.
После этого перезадайте свои вопросы.
3) И еще какой-нибудь мануал по имунохимии.

Правильно поставленный вопрос содержит половину ответа.(по этому вопросу обратитесь к рассказу Шекли "Ответчик", кажется называется)

---Зачем в буфер добавляют азид натрия NaN3?
Что бы убить того кто этим PBS будет питаться. Консервант это весьма своеобразный для лабораторного употребления тс.
Участник оффлайн! ol-ka

Москва



 прочитанное сообщение 14.06.2006 13:02     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

День добрый! Такой вот вопросик: для лизирующего буфера важно значение рН? А то имеется пропись раствора и не указано рН.
ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 14.06.2006 20:13     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

Вы что лизируете? и какой материал смотреть будете после лизиса? а так в принципе рН важно, но может быть разным в зависимости от задач.
Участник оффлайн! hemul
Участник
Москва



 прочитанное сообщение 17.06.2006 19:35     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

А кто вам сказал что это один и тот же буфер. Это слэнг в некотором смысле, обозначающий рраствор примерно изотонический физиологическому и забуференный фосфатными солями с небольшой буферной емкостью.

О'K, это не принципиально. Я искала методику по иммуноцитохимии, нашла энное кол-во. Во всех, понятное дело, принцип сходный, а буферы везде разные. Пытаюсь выбрать подходящий мне.

--Добавляют ПЭГ, Tween.
Просто PBS с ПЭГ ом и Тв не бывает. Обычно пишут, что PBS с добавками того, сего, пятого.

Да. пишут. Так вот, зачем добавляют? Чтобы улучшить проникновение чего-либо куда-нибудь? Улучшают свзязывание чего-то с чем-то?


---На что влияет концентрация буфера (кроме ионной силы)?
От концентрации буфера зависит его емкость.

Спасибо.

---Чем принципиально отличается PBS от Tris буфера?
--"А почему вы спрашиваете?" <c>
Чем принципиально отличается билистиллят от милипоровской воды? smile.gif

Вот например такой ответ: трис дороже раз в десять. Или трис более сладкий на вкус.
За ответ спасибо. Спрашиваю потому, что есть в одних вариантах метода тот, а в других другой. Надо же выбрать, на каком делать smile.gif
Про дистиллят, я кстати, тоже не знаю. То есть чем получение отличается знаю, а чем результат - нет.

1) почитайте учебник по буферам или хотя бы вводную статью в справочнике Доусона.
2) Почитайте учебник по питательным средам для клеточных культур.
После этого перезадайте свои вопросы.
3) И еще какой-нибудь мануал по имунохимии.

Правильно поставленный вопрос содержит половину ответа.(по этому вопросу обратитесь к рассказу Шекли "Ответчик", кажется называется)

За советы спасибо. От ссылки на "учебник по буферам" совсем бы не отказалась smile.gif
---Зачем в буфер добавляют азид натрия NaN3?
Что бы убить того кто этим PBS будет питаться. Консервант это весьма своеобразный для лабораторного употребления тс.

Здесь это вряд ли, т.к. буфером надо пользваться "здесь и сейчас", процедура на несколько часов. Может он (азид натрия) влиять на сохранение клеточных структур?
ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2006 13:08     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

Ух! Мария, вы просто провокатор.

---Чтобы улучшить проникновение чего-либо куда-нибудь?
Используют вазэлын.
---Так вот, зачем добавляют?
Что бы ухудшить неспецифические белок белковые взаимодействия. ПЭГ просто это интересно(я не встречал) возможно немного увеличивает действующую концентрацию АТ.
И все это можно почитать в книжке по иммунохимии.

---Надо же выбрать, на каком делать.
Вы работаете в эксперементальной области, использование умозрительных заключений здесь очень ограничено, что бы их делать надо иметь большой опыт с разными препаратами и разными антигенами. А вам надо либо попробовать один вариант и если он вас не устроит искать другой, либо попробовать несколько и выбрать лучший.

---Здесь это вряд ли, т.к. буфером надо пользваться "здесь и сейчас", процедура на несколько часов.

"А мужаки то не знали..."<c> Ну и че? На один препарат буфера уходит меньше 0.5мл, а делают его от 50 до 500мл за раз, шож его в помойку выливать.

---- Может он (азид натрия) влиять на сохранение клеточных структур?
Ну! почитайте, как он действует на ферменты и какие и сами решите может или не может. Его действие аналогично действию цианида.

---От ссылки на "учебник по буферам" совсем бы не отказалась
Любой учебник по качественному анализу для химических специальностей спасет вас. Например Алексеев(хотя формально он не для химиков) Гольбрайх практикум по неорганике и тд

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): hemul, moresque
Участник оффлайн! hemul
Участник
Москва



 прочитанное сообщение 20.06.2006 15:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование
Шутка, забавная история
ммм, спасибо вам за ответы на мои провокационные вопросы cool.gif
Участник оффлайн! dm1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 22.08.2006 21:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

В рецепте приготовления ТВЕ приведено довольно странное количество EDTA в граммах (43.84g), которое якобы следует взять, чтобы получить 1 литр 10хТВЕ. Хотелось бы узнать, откуда аффтар взял такой молярный вес EDTA (2192 г/моль)??? :)
Гость
IP-штамп: frHvKmYS/aKWA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  28.11.2006 18:41     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

Podskazhite, pozhluysta, chem dovodit pH v bufere MES? (2-N-morpholino-ethanesulfonic acid. Dolzhen byt 5.0, a poka tolko 3 :(
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 28.11.2006 19:10     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

--Podskazhite, pozhluysta, chem dovodit pH v bufere MES? (2-N-morpholino-ethanesulfonic acid. Dolzhen byt 5.0, a poka tolko 3 frown.gif

---щелочью, его щелочью содиевой.
Участник оффлайн! alex233




 прочитанное сообщение 09.12.2006 01:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

ДОбрый день.Мне надо для промывки ткани после окрашивания написанно промывать RBS чем можно заменить попроще может можно NaCL 0,9%?
Guest
IP-штамп: frQ8iiE/shsPs
гость



 прочитанное сообщение 22.12.2006 16:45     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

помимо раствора Леммли ,есть у кого рецепты растворов для экстракции белков из мышечной ткани после теплового воздействия (варки, прогрева до 60 градусов или даже стерилизации) для дальнейшего SDS-электрофореза на фастгеле с градиентом 10-15
Дилетантка
IP-штамп: frQ8iiE/shsPs
гость



 прочитанное сообщение 22.12.2006 16:55     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

Подскажите как приготовить раствор: в 10 mM трис-HCl буфере рН 8,0; 1,0 mM ЕДТА с 2,5%SDS и 5% меркаптоэтанола. Буду очень благодарна
Участник оффлайн! Aniona




 прочитанное сообщение 12.01.2007 12:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

Здравствуйте! Очень нужен состав промывочного буфера для выделения polyA мРНК при помощи магнитных стрептавидиновых бус. Заранее большое спасибо.
Участник оффлайн! Dimych
Постоянный участник
Kr-sk - Puschino - NYS - Calgary... Круг замкнулся



 прочитанное сообщение 14.01.2007 09:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

(Дилетантка @ 22.12.2006 13:55)
Ссылка на исходное сообщение  Подскажите как приготовить раствор:  в 10 mM трис-HCl буфере рН 8,0; 1,0 mM ЕДТА с 2,5%SDS и 5% меркаптоэтанола. Буду очень благодарна

Смешиванием запасных растворов (исключение - меркаптоэтанол, он -чистое вещество). Берёте калькулятор в ручки (или бумагу и карандашик) и вперёд. Если не знаете, как посчитать - идите в уборщицы или в журналисты, всем будет от того благо великое, и Вам тоже.

А, простите за любопытство, для чего такое офигительное количество меркаптоэтанола в растворе применяется?
Guest
IP-штамп: frACP.i4dXA/A
гость



 прочитанное сообщение 14.01.2007 11:53     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

(Dimych @ 14.01.2007 08:49)
Ссылка на исходное сообщение  А, простите за любопытство, для чего такое офигительное количество меркаптоэтанола в растворе применяется?


наверное волосы завивать shuffle.gif

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Atropos
Дилетантка
IP-штамп: frNYJZecF5GO2
гость



 прочитанное сообщение 15.01.2007 12:41     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

Спасибо господа за джентельменский ответ, господь воздаст вам за доброту вашу.
Guest
IP-штамп: frxcIGlR1Rnxc
гость



 прочитанное сообщение 16.01.2007 00:09     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

(Дилетантка @ 15.01.2007 11:41)
Ссылка на исходное сообщение  Спасибо господа за джентельменский ответ, господь воздаст вам за доброту вашу.

А какой ответ Вы хотели?

Ладно, так значить:
Молярный Трис, рН 8 разбавить в 100 раз
Полумолярный ЕДТА в пятьсот раз
10% СДС в 4 раза
Меркаптоетанол.... Ну зависит от того, какие проценты Вам потребны. Впрочем, я не думаю, что при таком количестве есть существенная разница. Скажем, в 20 раз.

И того на литр раствора (!):

10 мл Триса
2 мл ЕДТА
250 мл СДС
50 мл (ну если хочется масс-объёмные проценты найдите в справочнике плотность) меркаптоэтанола (Ужоссс!)

Полегчало? Кушайте на здоровьице.

Дело в том, барышня, что такие расчёты должны уметь делать школьники старших классов если они не из интерната для альтернативно одарённых. Если для Вас простое разбавление это великое таинство, то продолжать попросту не стоит, молекулярная биология и биохимия явно не Ваша стезя. Сами измучаетесь и окружающих изведёте.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Дядя ФАКСер
Dimychch
IP-штамп: frxcIGlR1Rnxc
гость



 прочитанное сообщение 16.01.2007 00:11     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

Да, воды, если БМЕ брать по объёму, 688 мл :D
guest: Dimych
IP-штамп: frxcIGlR1Rnxc
гость



 прочитанное сообщение 16.01.2007 00:12     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

Да, воду обычно берут как минимум дистиллированую...
Dimychchchch
IP-штамп: frxcIGlR1Rnxc
гость



 прочитанное сообщение 16.01.2007 00:14     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

На волосах лучше не передерживать. А Вы правда натуральная блондинка?
Участник оффлайн! bukach
Постоянный участник
Geneva, Switzerland



 прочитанное сообщение 16.01.2007 02:20     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

(Guest @ 16.01.2007 00:09)
Ссылка на исходное сообщение  А какой ответ Вы хотели?

Ладно, так значить:
Молярный Трис, рН 8 разбавить в 100 раз

Полегчало? Кушайте на здоровьице.



и шыш после этого рН 8.0 получится. если грубите, то хотя бы ошибок не делайте при этом.


Дилетантка, вопрос ваш и вправду детсадовский. но если он не отпал, пишите мне в личку.
Участник оффлайн! Дядя ФАКСер
Постоянный участник
Nothern Maccaronia, Ticinum



 прочитанное сообщение 16.01.2007 02:41     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

Ну а потом - аккуратненько доводить до нужного рН
Участник оффлайн! bukach
Постоянный участник
Geneva, Switzerland



 прочитанное сообщение 16.01.2007 03:03     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

исходно этого сказано небыло. с чего запросто можно сделать вывод, что грозный гость скурил коэффициенты активности.

и доводить с мэ и сдс. хи-хи. чтоб один вонял на всю лабу (а на 5%, да на мешалоччке еще и соседи придут в гости с недобрыми намерениями), а от другого электроды отмывать до посинения. так что не запутывайте деушку )

сначала трис, эдта и вода (чуть меньше, чем нужно), потом рН, потом мэ и сдс. ну и опять вода до нужного объёму.
Dch
IP-штамп: frxcIGlR1Rnxc
гость



 прочитанное сообщение 16.01.2007 03:06     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #37 множественное цитирование

Букач
Что хочу, то и делаю. Это не ошибка, это практика. Довольно общая. Про сдвиг рН при разведении я в курсе, равно как и про температурный сдвиг. Необходимость доведения сильно зависит от целей, с какими буфер применяется, и от того, доводили ли его те, кто методику придумал. Очень может быть, что не доводили. Я для хроматографии не довожу. Белки от этого грязнее не становятся и душа ни фига не болит.

Кроме того, если девочка задаёт такие вопросы, то разницы для конечного результата вообще нет. Из неё даже лаборант не получится.

А уж если докапываться до "ошИбок", то "шИш" пишется таки через И.
Участник оффлайн! bukach
Постоянный участник
Geneva, Switzerland



 прочитанное сообщение 16.01.2007 03:51     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #38 множественное цитирование

(Dch @ 16.01.2007 03:06)
Ссылка на исходное сообщение  Букач
Что хочу, то и делаю.

если вы взялись объяснять человеку КАК сделать, то делайте это по-человечески. а с таким подходом лучше б вы просто оставили последний абзац своего поста.
(Dch @ 16.01.2007 03:06)
Ссылка на исходное сообщение Это не ошибка, это практика. Довольно общая. Про сдвиг рН при разведении я в курсе, равно как и про температурный сдвиг. Необходимость доведения сильно зависит от целей, с какими буфер применяется, и от того, доводили ли его те, кто методику придумал. Очень может быть, что не доводили. Я для хроматографии не довожу. Белки от этого грязнее не становятся и душа ни фига не болит.

если методику пишут нормальные люди, то они видят разницу между "буфер с рН 8.0, разведённый во столько то раз" или "буфер с рН 8,0". так и пишут.
в вопросе было второе. потому ошибка.
(Dch @ 16.01.2007 03:06)
Ссылка на исходное сообщение Кроме того, если девочка задаёт такие вопросы, то разницы для конечного результата вообще нет. Из неё даже лаборант не получится.
А уж если докапываться до "ошИбок", то "шИш" пишется таки через И.

ну нельзя так. не осуждайте. вполне возможно, что не повезло ей с учителями. может, если б ктонить ей толком один раз объяснил, как это делается, то и проблем бы не возникало.

и закончим на этом.
всем сорри за оффтоп.

Сообщение было отредактировано bukach - 16.01.2007 04:00
Дилетантка
IP-штамп: frNYJZecF5GO2
гость



 прочитанное сообщение 16.01.2007 11:12     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #39 множественное цитирование

Большое всем спасибо за ваше участие. Наверное вы правы, господа, биохимия не моя стезя. Попробую себя в ядерной физике, может там мое призвание? А блондинкой я была когда то, но работа с эфирами изменила мою внешность.
Гость
IP-штамп: fr5VxSluWi21Q
гость



 прочитанное сообщение 26.03.2007 15:24     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #40 множественное цитирование

p = 1.103 у SSC - уж не ошибка(опечатка) ли? Может всё же p = 1.163?
Гость
IP-штамп: frQhCWJIiGAxE
гость



 прочитанное сообщение 03.04.2007 08:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #41 множественное цитирование

где не могу понять у Вас натрий фосфатный буфер?
Участник оффлайн! Yarl




 прочитанное сообщение 27.07.2007 18:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #42 множественное цитирование

4 M guanidine thiocyanate, 0.2 M sodium acetate pH 5.0, 25 mM EDTA, 2.5% (w/v) PVP-40 potassiym acetate 1M помогите пожалуйста приготовить
Участник оффлайн! Yarl




 прочитанное сообщение 27.07.2007 18:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #43 множественное цитирование

в смысле сколько добавлять ацетата Na ph 5,0
Guest
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 27.07.2007 19:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #44 множественное цитирование

--в смысле сколько добавлять ацетата Na ph 5,0
200mM на 1л готового раствора.
Участник оффлайн! Бору
Постоянный участник
Киев. обл., Украина



 прочитанное сообщение 09.08.2007 08:58     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #45 множественное цитирование

В американской методике упоминается буфер Trizma base (Sigma) кто нибуть знает с чего он состоит, можно ли приготовить самомому, или хотябы чем заменить можно?
Участник оффлайн! le lapin
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2007 10:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #46 множественное цитирование

Trizma base = Tris base (основной Трис, трис-гидроксиметиламинометан). Только это не буфер, а соль, на основе которой делают буферы.
Участник оффлайн! Бору
Постоянный участник
Киев. обл., Украина



 прочитанное сообщение 09.08.2007 18:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #47 множественное цитирование

Тогда это вообще бред какойто:

"The bacterial pellet was suspended in
100 mkl of TAE buffer (40 mM Tris acetate [pH 8.5]-2 mM
EDTA) and mixed with 200 mkl of alkaline solution containing
3 g of SDS, 0.6 g of Trizma base (Sigma Chemical Co., St.
Louis, Mo.), and 6.4 ml of 2 N NaOH in 100 ml of H20."

Сначала забуферивают систему рН 8.5, а потом сразу же поднимают его вверх, при чем опять с испольхованием триса (только с другим названием, видимо чтобы избежать тавтологииsmile.gif ).... Нет чтоб написать сразу - приливаем 300 мкл трис-буфера такогото рН, с ДДС и ЕДТА концентраций соответсвующих.

Еще один перл, оттудаже

"The supernatant of the mixture after centrifugation at 16,000 x g for 10 min was
mixed with 200 mkl of H20 and 50 mkl of 3 M sodium acetate
(pH 5.2)."

Спрашивается, а вода зачем? Почему не взять изначально ацетат натрия концентрации в 5 раз ниже? А 3 М раствор ацетата натрия что действительно имеет кислую реакцию, соль то вроде щелочная....
Гость
IP-штамп: frTX1Bt2UC3vE
гость



 прочитанное сообщение 24.03.2008 18:20     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #48 множественное цитирование

Деионизация формамида (мочевины, акриламида, глиоксаля).

п.5.хранить при -20C в банке тёмного стекла или завернув в фольгу

божемой, божемой... мочевину при -20? или акриламид???
Гость
IP-штамп: frDQwa9k7riYg
гость



 прочитанное сообщение 22.05.2008 12:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #49 множественное цитирование

По-моему в прописи ТВЕ закралась ошибка, если добавлять ЭДТА 43 г, то он будет не 20 мМ, а более чем 100 мМ, если исходить из концетраций и масс в прописи, то молекулярная масса ЭДТА получается равной 1241 :). Или я чего-то не понял, или это лажа.
Гость
IP-штамп: fr5tghyqMW41o
гость



 прочитанное сообщение 15.06.2008 12:45     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #50 множественное цитирование

пребываю в тихом шоке... понятно, что в науке чаще всего живут интроверты,
но невозможно же до такой степени упиваться собственной специфичностью!!!!
к нам же начинающие совсем ходить перестанут

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 21.10.17 18:53
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft