Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Felica |
для выполнения экспериментов по диссертации требуются клетки HeLa, желательно без микоплазмы, ибо такие уже есть Знаю, что можно вытравить микоплазму, но сколько они уже так живут не имею понятия. Поделитесь, пожалуйста, Коллеги! возможен обмен на какие-нибудь реактивы или пластик. В Москве. Спасибо за внимание! |
Vadim Sharov Постоянный участник Россия |
Кстати, насколько критичны для Вас микоплазмы. Многие старые культуры (а клетки черной американки очень древние) даже в ATCC хранятся с микоплазмами. "Hela Contaminant" У меня даже сомнения, что все что "Cervix, Adenocarcinoma" без микоплазмы. Если у Вас есть культуры с микоплазмами и Вы хотите вести культуры без сих эндопаразитов, то необходимо уничтожение всего пула зараженных культур, со стерилизацией бокса и даже дьюара для криоконсервации. Как пишут теоретики molbiol'а возможно культивирование одновременно и зараженных, и незараженных культур чуть ли не в одном инкубаторе. На практике это не получачается. Другими словами, конечно микоплазмы не ах, но очень часто их наличие не влияет на эксперимент. Вы же сравниваете ответ больной клетки с контролем на больной клетки, а не здоровой. |
Felica |
(Vadim Sharov @ 21.09.2018 14:48) А какие HeLa вам нужны? Кстати, насколько критичны для Вас микоплазмы. Многие старые культуры (а клетки черной американки очень древние) даже в ATCC хранятся с микоплазмами. "Hela Contaminant" У меня даже сомнения, что все что "Cervix, Adenocarcinoma" без микоплазмы. Если у Вас есть культуры с микоплазмами и Вы хотите вести культуры без сих эндопаразитов, то необходимо уничтожение всего пула зараженных культур, со стерилизацией бокса и даже дьюара для криоконсервации. Как пишут теоретики molbiol'а возможно культивирование одновременно и зараженных, и незараженных культур чуть ли не в одном инкубаторе. На практике это не получачается. Другими словами, конечно микоплазмы не ах, но очень часто их наличие не влияет на эксперимент. Вы же сравниваете ответ больной клетки с контролем на больной клетки, а не здоровой. Вадим, я даже не знала, что такое разнообразие HeLa существует. Мне необходимо изучать экспрессию SOD1 в раковых клетках под действием различных веществ. А про микоплазмы читала, что они сильно могут менять свойства зараженных клеток. |
Vadim Sharov Постоянный участник Россия |
Учитывая, что очень много в мире исследований на "Hela Contaminant" не заморачивайтесь. Обычного культурального набора антибиотиков хватает, чтобы микоплазма была латентной, не влияла на эксперимент. Не переходите на культивирование без антибиотиков. Еще раз, посмотрите на таблицу, понаблюдайте сколько в коллекции "самой ATCC" "Hela Contaminant" и не парьтесь. |
ship Постоянный участник Moscow |
(Felica @ 21.09.2018 12:46) Вадим, я даже не знала, что такое разнообразие HeLa существует. Мне необходимо изучать экспрессию SOD1 в раковых клетках под действием различных веществ. А про микоплазмы читала, что они сильно могут менять свойства зараженных клеток. Если Вам нужны просто раковые клетки, а не именно HeLa, то лучше взять чтото другое. Потому что HeLa конечно не лучшая модель, и исчточник клеток будет неизвестен, и контаминация, и всякие геномные аномалии , анеуплоидия и тп. |
Vadim Sharov Постоянный участник Россия |
По поводу анеуплоидий Вы меня заинтриговали. Если судить по каталогу ATCC, то клеточных культур, стабильных по хромосомам почти не бывает. Найдёте, покажите, пожалуйста. Тем более раковых. Раковые и в организме нестабильностью хромосомного набора отличаются. Интересно, какие есть раковые клетки без геномных нарушений? Клетки с вирусом типа MTV или MMTV? Тут конечно, методологический вопрос, является ли адено или ретро вирус, встроенный в геном "геномным нарушением". Вообще. одним из главных отличий перманентных клеточных культур от первичных это как раз непостоянство хромосомного набора. Впрочем, даже в культуре первичных фибробластов кожи человека клетки с нарушением правила 46 хромосомами не редкость. Впрочем, да и в организме человека не все, далеко не все соматические клетки содержат именно 46 хромосом. Живем же.
|
Felica |
(Vadim Sharov @ 23.09.2018 16:26) HeLa как модель имеют достоинства: они очень хорошо охаратеризованы. По поводу анеуплоидий Вы меня заинтриговали. Если судить по каталогу ATCC, то клеточных культур, стабильных по хромосомам почти не бывает. Найдёте, покажите, пожалуйста. Тем более раковых. Раковые и в организме нестабильностью хромосомного набора отличаются. Интересно, какие есть раковые клетки без геномных нарушений? Клетки с вирусом типа MTV или MMTV? Тут конечно, методологический вопрос, является ли адено или ретро вирус, встроенный в геном "геномным нарушением". Вообще. одним из главных отличий перманентных клеточных культур от первичных это как раз непостоянство хромосомного набора. Впрочем, даже в культуре первичных фибробластов кожи человека клетки с нарушением правила 46 хромосомами не редкость. Впрочем, да и в организме человека не все, далеко не все соматические клетки содержат именно 46 хромосом. Живем же. Спасибо огромное за помощь! Буду пользоваться имеющимися клетками hela. |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |