Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* выделение антител из желтка куриного яйца
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! marker
Участник



 прочитанное сообщение 08.06.2004 08:31     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Может кто-нибудь выделял антитела из куриного яйца? Каким методом? как это коррелирует с титром антител в крови курицы? Я разводил желток в физ растворе, потом отправлял все это в ИФА. Что-то конечно получалось но насколько оно достоверно неизвестно. И проблема с яйцом и сывороткой от одной и тойже курицы, в день снесения яйца. В виварий меня не пускают...
Участник оффлайн! ivanna12




 прочитанное сообщение 09.06.2004 11:36     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Я выделяла, если правильно помню, так: разводила желток тремя объемами забуференного физ. раствора pH 7,2-7,4. Потом добавляла ПЭГ 6000 до 4%, перемешивала на мешалке. Лучше дать отстояться ночь. После центрифугирование, чтобы избавиться от липидов. Надосадок лучше профильтровать через обыкновенный бумажный фильтр. Потом ПЭГ 6000 до 12 или 13% (не помню точно) - осаждаются иммуноглобулины. Осадок можно растворить в том же буфере (обычно это был 20 мМ Трис со 150 мМ NaCl, рН 7,2-7,4). Можно при желании переосадить антитела сульфатом аммония, т.к. ПЭГ очень липкий. Какая корреляция между антителами в желтке и в крови, не знаю. А антитела из желтка получаются достаточно хорошие.
Участник оффлайн! marker
Участник



 прочитанное сообщение 09.06.2004 15:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Спасибо, попробую. Но у меня задача не получить антитела в чистом виде, а опредилить титр в желтке... Побочные продукты метода экстракции по идее на ИФА же влияют.
Ваге
IP-штамп: frQN44LwKXabE
гость



 прочитанное сообщение 11.04.2006 13:47     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Я выделил специфические иммуноглобулини из желтка яиц методом высаливания аммонием сульфатом, дальнейшим диализом против ФБР рХ 7.4 и аффинной хроматограффией ДЕАЕ-целюлозой . Титр антител определял методом торможения реакции гемаглютинации. И представте получил давольно таки высокие цифри наличие антител при разведении 1:262144
ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 11.04.2006 14:02     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

---аффинной хроматограффией ДЕАЕ-целюлозой
Не! это ионообменная хромтогрфя.
---- Побочные продукты метода экстракции по идее на ИФА же влияют.
Да! Гланый "мешатель" липиды их как я понял удалят ПЭГ.
--- Потом добавляла ПЭГ 6000 до 4%, перемешивала на мешалке. Лучше дать отстояться ночь. После центрифугирование, чтобы избавиться от липидов.
Участник оффлайн! CowDoc
Постоянный участник
Middle East



 прочитанное сообщение 11.04.2006 14:03     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

1. Для простой титрации IgY из желтка, рекомендую метод предлагаемый стандартными китами - экстракция хлороформом. 0.5 мл ФБР + 0.5 мл желтка --> смешиваем вортекс + 2 мл хлороформа (не перемешивая, иначе загустеет). Перемешиваем на вортексе, загустевает. Оставляем на ночь при +4оС. На след день 3000 об/мин 10 мин. Надосадок отобрали и исследуем в ИФА.
2. А по поводу очистки и конц. больших объемов, посмотрю, делал давно.
Участник оффлайн! CowDoc
Постоянный участник
Middle East



 прочитанное сообщение 11.04.2006 14:05     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

Уважаемые, может тогда и схемами ГИммунизации поделитесь?
Интересно сравнить!
Guest
IP-штамп: frW6PQ8r6IMNg
гость



 прочитанное сообщение 11.04.2006 15:19     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

2 CowDoc - одна из методик была аналогична (но конкретно я её так сразу не вопроизведу - искать надо). ФБР - фосфатный буфер разведения? хлороформ чистый, или уравновешанный чем-то (у меня с чистым проблемы)? сталкивались с тем, что определяли одновременно и в желтке и у кур, но не индивидуально (курица-яйцо), а 20 проб от корпуса бройлеров родителей (20 родителей (из 4000) - 20 яйц (из всего дня) - че от кого неизвестно :о) - сугубо прикладная цель: http://www.laboratorium.narod.ru/23/valia.htm. но там растворение просто буфер + желток. что такое ГИммунизация?
Участник оффлайн! marker
Участник



 прочитанное сообщение 11.04.2006 15:20     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

предыдущий - мой

Сообщение было отредактировано marker - 11.04.2006 15:20
guest: бутанол
IP-штамп: frW6PQ8r6IMNg
гость



 прочитанное сообщение 15.04.2006 08:39     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

вот мы с markerom пользуемся ИФА где разведение сыворотки идет 1:500
поэтому и желток разводим также из того расчета, что при таком разведении ингибирования реакции быть не должно.
маркер - кто тебя в виварий не пускает, ты скажи и мы вместе его побьем!! smile.gif
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 06.12.2018 20:26     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

(специалист @ 06.12.2018 08:57)
Ссылка на исходное сообщение  Недавно наткнулся на тезисы Т.С. Туровой и Е.А. Колосовой (научный руководитель - к.б.н. Д.Н. Щербаков) из Алтайского государственного университета "Антитела яичного желтка как перспективные иммунохимические реагенты", которые они разместили на сайте научной конференции в Томске в 2015 г.

Эта тезисы удивительным образом совпали со статьёй, опубликованной в 2013 г. Hodek P., Trefil P., et al. в журнале Int.J.Eiectrochem., 8, 113-123.

Вывод: эти ребята занимаются плагиатом.

какой однако специалист злой....
просто пассажиры следуют древнему принципы третьи в мире первые в Сибири....
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 06.12.2018 21:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

(специалист @ 06.12.2018 16:57)
Ссылка на исходное сообщение  Недавно наткнулся на тезисы Т.С. Туровой и Е.А. Колосовой (научный руководитель - к.б.н. Д.Н. Щербаков) из Алтайского государственного университета "Антитела яичного желтка как перспективные иммунохимические реагенты", которые они разместили на сайте научной конференции в Томске в 2015 г.

Эта тезисы удивительным образом совпали со статьёй, опубликованной в 2013 г. Hodek P., Trefil P., et al. в журнале Int.J.Eiectrochem., 8, 113-123.

Вывод: эти ребята занимаются плагиатом.

Понять и простить smile.gif
Участник оффлайн! KCN
Постоянный участник
Київ. Україна понад усе! / DELETED



 прочитанное сообщение 13.12.2018 10:27     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

Антитела из утиного яйца

Good Biotech Corp.
38, 34th Road, Taichung Industrial Park
Taichung 40768
Taiwan
Tel: 886 4 2359 6873 (Mon.-Fri. 8:30am-5:30pm GMT+08:00)
Fax: 886 4 2359 0410
E-mail: info@good-biotech.com
http://www.good-biotech.com/products/

Сообщение было отредактировано KCN - 13.12.2018 10:29
Участник оффлайн! специалист




 прочитанное сообщение 05.02.2019 14:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

Для тех кто ещё интересуется выделением IgY из куриных желтков рекомендую лучшую методику на сегодняшний день.

Hodek P., Trefil P., Simunek J., Hudecek J., Stiborova M.

Optimized Protocol of Chicken Antibody (IgY) Purification Providing Electrophoretically Homogenous Preparations.

Int. J. Electrochem. Sci., 8 (2013) 113 - 124

1. Отделение желтка от белка.
2. Разбавление желтка водопроводной или дистиллированной водой в 6–10 раз.
3. Доведение рН до 5,0 с помощью HCl.
4. Замораживание раствора и выдерживание при –20°С в течение ночи.
5. Медленное оттаивание.
6. Фильтрвание через бумажный фильтр.
7. Добавление NaCl (1,5 М) до 8,8%.
8. Доведение рН до 4,0 с по мощью HCl.
9. Преципитация IgY в течение 2 ч при комнатной температуре.
10. Центрифугирование при 3000 g и 4°С в течение 10 мин.
11. Растворение осадка IgY в фосфатно-солевом буфере (PBS).
12. Диализ против PBS.

Если найду другие достойные методики, помещу на этом сайте.
Участник оффлайн! специалист




 прочитанное сообщение 06.02.2019 18:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

Я удалил страницу о студенческой конференции в Томске в 2015 г. на которой студенты алтайского университета представили материалы по IgY технологиям, но не указали истинных авторов этой методики (2013 г. Hodek P., Trefil P., et al.). А сделал это потому, что студенты удалили только сейчас отдельную страницу о XVI Международной научно-практической конференции студентов и молодых учёных в Томске в 2015 г. (с. 205-207) на которой и была размещёна эта страница.
Призываю студентов, аспирантов и руководство алтайского университета чтить авторское право и не пытаться присвоить чужие методики и результаты.
Участник оффлайн! Anfisa8




 прочитанное сообщение 08.02.2019 06:41     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

Ух ты сколько интереного
Участник оффлайн! genseq
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 08.02.2019 09:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

(Anfisa8 @ 08.02.2019 04:41)
Ссылка на исходное сообщение  Ух ты сколько интереного


https://www.jove.com/video/3084/igy-technol...s-from-egg-yolk
https://www.jove.com/pdf/3084/jove-protocol...s-from-egg-yolk
Участник оффлайн! специалист




 прочитанное сообщение Сообщение на английском  08.02.2019 11:36     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

http://www.electrochemsci.org/papers/vol8/80100113.pdf
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  18.11.2021 16:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

https://wanelo.co/replicarolexwatches
https://musescore.com/fakerolexwatches
https://www.racked.com/users/Replicarolexwatches
https://sketchfab.com/Rolexrelicawatches
http://www.video-bookmark.com/bookmark/433...eplica-watches/
https://www.slideserve.com/ReplicawatchesUK...pt-presentation
https://www.theverge.com/users/Replicarolexwatches
https://www.yumpu.com/en/document/read/6532...lica-watches-uk
https://online.flippingbook.com/view/152275247/
https://www.instapaper.com/p/8767342
https://www.bigblueview.com/users/Replicarolexwatches
https://weheartit.com/watcheshutuk
https://sites.google.com/view/replicarolexwatches24/home
https://www.indiehackers.com/post/hints-on-...atch-113aef73a9
http://replicawatchesuk.esportsify.com/for...ica-rolex-watch
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.12.2022 10:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

https://blog.udn.com/omegawatches89/176264446
https://teletype.in/@omegawatches89/CDyEM0Nch4X
https://wakelet.com/wake/7vB7d1grH5yswj4a12XAi
https://www.tripadvisor.it/Profile/352omegaw
https://homeinspectionforum.net/user/profile/72707.page
https://slidebatch.com/content/item/1353
https://omegawatches89.seesaa.net/article/490300679.html
https://slidebatch.com/profile/reactions
https://www.friday-ad.co.uk/profile/watches-s-co6llqqCqg==/
https://www.craftsforum.co.uk/forum/your-cr.../1130892-moulds
https://ameblo.jp/omegawatches89/entry-12756687889.html
https://telegra.ph/Reasons-Why-Replica-Watc...o-Popular-08-03
https://teletype.in/@omegawatches89/gUADjwow_lO
https://omega-watches-2.jimdosite.com/
https://plaza.rakuten.co.jp/omegawatches89/...y/202208040001/
https://list.ly/i/8020064
https://www.pearltrees.com/omegawatches89/item456651158

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 16:14
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft