molbiol.ru -> Праймеры

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* Праймеры -- NF-kB1 --

Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

Лю
IP-штамп: fr8FLi6cKVXQk
гость

25.02.2010 22:50

URL #1

Не могу по статьям найти праймеры на человеческий NF-kB1(р50 либо р65). Если кто в теме, киньте ссылочку, ну пожаалууйстааа...

Daemonarchestratygos
Постоянный участник

25.02.2010 23:14

URL #2

У меня похожая проблема! Не могу по статьям найти праймеры на gapdh...

Statin
Постоянный участник

25.02.2010 23:46

URL #3

(Daemonarchestratygos @ 26.02.2010 00:14)

У меня похожая проблема! Не могу по статьям найти праймеры на gapdh...

Прикололся

petr
Постоянный участник

26.02.2010 00:15

URL #4

(Лю @ 25.02.2010 20:50)

Вам для чего праймеры-то?
А как насчет самим задизайнить? уверяю, выйдет быстрее и проще, чем по статьям искать, потом условия подбирать, потом все равно все выбросить, потому что в статье "забыли" последнюю буковку приписать

Сообщение было отредактировано petr - 26.02.2010 00:16

Поблагодарили (3): Mykhaylo, Daemonarchestratygos, Nadya Y.

Daemonarchestratygos
Постоянный участник

26.02.2010 20:22

URL #5

Petr чертовски прав. Если праймеры предназначаются для ПЦР (а так оно, скорее всего, и есть), то гораздо проще подобрать их самостоятельно (используя Entrez Nucleotide, BLAST и Gene Runner, например), нежели рыскать по Интернету, рискуя нарваться на ошибочный сиквенс.

У самостоятельного подбора праймеров есть два важных "плюса":
1) Можно подобрать праймеры с близкими температурами отжига, что позволит проводить ПЦР с различными праймерами одновременно, в одном термоциклере => экономия времени.
2) Если Вы анализируете экспрессию гена в клетках различной видовой принадлежности (например, в мышиных и человеческих), то можно подобрать одну пару праймеров к обоим ортологам (лично я так делал) => экономия денег.

Искать последовательность в статьях имеет смысл в случае siRNA, например.

Лю
IP-штамп: frPqLNtfUIYa.
гость

26.02.2010 23:43

URL #6

Праймеры нужны для определения экспрессии обычной ПЦР (не реал-тайм).
Программы для подбора у меня нет. И все же, я считаю, что по статьям легче. До сих пор искала по статьям и успешно. Хохмачей прошу на другую ветку, а мне нужно дружеское участие, сочуствие и конкретная помощь.

petr
Постоянный участник

27.02.2010 00:17

URL #7

Могу Вам предложить старую добрую oligo 6.0. напишите мне в личку. Правда она за Вас праймеры плохо подберет, лучше ручками, а прога в помощь димеры смотреть и т.д.
А для чего, если не секрет ПЦРите NFkB? Уровень экспрессии мало скажет о его активности

Сообщение было отредактировано petr - 27.02.2010 00:21

Поблагодарили (1): Guest1

Yuri K
IP-штамп: frbSxBL61s/9I
гость

27.02.2010 00:18

URL #8

Искать праймеры по статьям-дело долгое и неблагодарное. Как правило, на любой ген уже имеется цепочка ссылок, которая кочует из одной статьи в другую. Перелопатив десяток взаимно отсылаемых статей, находишь обычно или нечто написанное задом наперед, или ссылку на чей-то диссер, сделанный в Сельскохозяйственном Колледже Западной Небраски. Поэтому, лучше самому. И никогда не делайте меньше двух вариантов сразу. Праймеры стОят копейки, так что не разоритесь, но сэкономите время.

Guest1
Постоянный участник

27.02.2010 01:32

URL #9

(Лю @ 27.02.2010 00:43)

Прайм Ехпрес 3 по дефолту

Guest1
Постоянный участник

27.02.2010 01:47

URL #10

(Лю @ 25.02.2010 23:50)

Не могу по статьям найти праймеры на человеческий НФ-кБ1(р50 либо р65). Если кто в теме, киньте ссылочку, ну пожаалууйстааа...

посмотрите по Такманам Пабмед или Гугл и возмите оттеда праймеры

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

27.02.2010 02:20

URL #11

(Лю @ 27.02.2010 00:43)

Я вам сочувствую,

но искать готовые праймеры лень, однако, "задизайнить" могу, специально для вас.

Поблагодарили (2): petr, Daemonarchestratygos

petr
Постоянный участник

27.02.2010 03:46

URL #12

(Лю @ 26.02.2010 21:43)

Праймеры нужны для определения экспрессии обычной ПЦР (не реал-тайм).
Программы для подбора у меня нет.

Попробовал поискать статьи в гугле, в течении 5и минут ничего не нашел. Нашел статью, где p50 (кажется) ПЦРили чтоб отклонировать.
Посему это заставляет задуматься, почему народ не ПЦРит NFkB. Может потому, что наличие полоски в геле ни о чем по большому счету не скажет?

Daemonarchestratygos
Постоянный участник

27.02.2010 21:34

URL #13

Да уж, иммуноблоттинг антителами против фосфо-IkappaB и то информативнее.

(Лю @ 26.02.2010 21:43)

Хохмачей прошу на другую ветку, а мне нужно дружеское участие, сочуствие и конкретная помощь.

Ухожу, ухожу...

Поблагодарили (1): petr

protein
Постоянный участник
Magyarország

27.02.2010 21:43

URL #14

(petr @ 27.02.2010 05:46)

Попробовал поискать статьи в гугле, в течении 5и минут ничего не нашел. Нашел статью, где п50 (кажется) ПЦРили чтоб отклонировать.
Посему это заставляет задуматься, почему народ не ПЦРит НФкБ. Может потому, что наличие полоски в геле ни о чем по большому счету не скажет?

разве что в ядерных лизатах делать.

petr
Постоянный участник

28.02.2010 01:06

URL #15

(Daemonarchestratygos @ 27.02.2010 19:34)

Да уж, иммуноблоттинг антителами против фосфо-IkappaB и то информативнее.

Вы наверное хотели сказать антителами просто на IkBa? Фосфорилированная форма прямиком отправляется в протеосому, и думаю ее сложновато будет отловить антителами.
Методов определения активации NFkB - масса.

Сообщение было отредактировано petr - 28.02.2010 01:30

Daemonarchestratygos
Постоянный участник

28.02.2010 22:26

URL #16

(petr @ 27.02.2010 23:06)

Вы наверное хотели сказать антителами просто на IkBa?

Лю
IP-штамп: frPqLNtfUIYa.
гость

02.03.2010 10:19

URL #17

Я таки нашла праймеры. Всем спасибо.

Поблагодарили (1): Daemonarchestratygos

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

02.03.2010 11:20

URL #18

(Лю @ 02.03.2010 11:19)

Я таки нашла праймеры. Всем спасибо.

Баба с возу - кобыле легче.

RJ Dio
Постоянный участник

02.03.2010 11:36

URL #19

нет, не так- баба с возу- и волки сыты

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

02.03.2010 12:01

URL #20

Вот еще такой: Баба с возу - потехе час.

Лю
IP-штамп: frPqLNtfUIYa.
гость

03.03.2010 04:28

URL #21

Правильнее сказать: "Мужик с возу - бабе легче." Это как-то более жизненно.

petr
Постоянный участник

03.03.2010 21:36

URL #22

(Лю @ 02.03.2010 08:19)

Я таки нашла праймеры. Всем спасибо.

Не, мне все таки интересно, для чего Вам они нужны?

Guest1
Постоянный участник

03.03.2010 22:21

URL #23

(petr @ 03.03.2010 22:36)

Не, мне все таки интересно, для чего Вам они нужны?

Сикрет

Guest1
Постоянный участник

03.03.2010 22:28

URL #24

(petr @ 03.03.2010 22:36)

Не, мне все таки интересно, для чего Вам они нужны?

http://www.plosone.org/article/info:doi%2F...al.pone.0000930

petr
Постоянный участник

03.03.2010 23:16

URL #25

(Guest1 @ 03.03.2010 20:28)

http://www.plosone.org/article/info:doi%2F...al.pone.0000930

М-да...

Но там они qRT делали, а девушке нужны для простого ПЦР, без всяких там этих ваших реалити-шоу-таймов. Вот и заинтриговала она прямо меня.

Зачем девушке праймеры? Зачем вообще девушке праймеры?....

Guest1
Постоянный участник

04.03.2010 01:24

URL #26

(petr @ 04.03.2010 00:16)

М-да...

Но там они яРТ делали, а девушке нужны для простого ПЦР, без всяких там этих ваших реалити-шоу-таймов. Вот и заинтриговала она прямо меня.

Зачем девушке праймеры? Зачем вообще девушке праймеры?....

наверно муж - алкоголик

Guest1
Постоянный участник

04.03.2010 02:18

URL #27

(petr @ 04.03.2010 00:16)

М-да...

это не "тот МДА"

- если Рош переходит на "1536" формат в "реал-тайме" - это уже не "ванкувер2010", а "Апокалипсис сегодня"

watchesbiz
Постоянный участник

22.12.2021 07:20

URL #28

https://archives.profsurv.com/forum/Profess...ert/-67881.aspx
https://atlanta.bubblelife.com/community/an...ex_Watch_Online
https://gumroad.com/rolexrelicawatches/p/di...replica-watches
https://onmogul.com/stories/guide-on-how-to...ex-watch-online
https://list.ly/i/5704105
https://www.behance.net/gallery/114237003/Replica-Rolex
https://www.mlbdailydish.com/users/Replicarolexwatches
http://replicawatches24.simplesite.com/
https://watcheshutuk.cabanova.com/
https://www.pinterest.com/watcheshutuk/_saved/
https://www.linkedin.com/pulse/guide-how-pu...online-hei-bai/
https://justpaste.it/8t11q
https://padlet.com/watcheshutuk/in2opwnfmnmclce8
https://www.allforxi.com/users/Replicarolexwatches
https://profile.hatena.ne.jp/Rolexrelicawatches/profile

vadimchik152a
Постоянный участник

04.10.2022 23:39

URL #29

Теперь становится очевидно, что движение в данном направлении в значительной степени обусловливает создание новых предложений. https://www.alaise.no/profile/misha80w/profile?lang=en

vadimchik152a
Постоянный участник

26.02.2023 13:33

URL #30

Повседневная практика показывает, что новая модель организационной деятельности требует от нас анализа новейших вариантов поиска решений. https://oglaszam.pl/author/slava75j/

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.