Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Колегова Жанна |
Стоит задача выделить лейкоциты из 100 мл цельной крови. Как максимально эффективно отделить эритроциты без центрифугирования? Я слышала, что оптимальным вариантом будет добавить гепарин, полиглюкин, дождаться осаждения эритроцитов, а потом аккуратно собрать иглой плазму со взвешенными в ней лейкоцитами. Если я права, подскажите оптимальное соотношение крови и полиглюкина, сколько времени и при какой температуре лучше осаждать. Если нет, подскажите альтернативный метод. Лейкоциты должны остаться живыми, т.к. затем планируется инкубация их с лекарственным пераратом и введение пациенту. Ссылки на подобные методики горячо приветствуются. Заранее спасибо |
Guest IP-штамп: fr1SnqfFFL55o гость |
|
Колегова Жанна |
А то беглый поиск по форуму ничего не дал |
draculka |
|
Фенол IP-штамп: frXBaTONIry9A гость |
2Колегова Жанна (если ещё актуально): возьмите кровь, стабилизированную цитратом (или растворами типа ACD, CPDA), добавьте полиглюкин 1:1 с кровью, оставьте на 1 ч при комнатной температуре и отберите образовавшийся надосадок, т.е. лейкоциты и тромбоциты. Надосадок, конечно, будет загрязнён эритроцитами, но необходимость дальнейшей очистки вы должны определить сами.
|
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
|
Guest IP-штамп: fr4I3qoC2Qq4. гость |
(Фенол @ 24.11.2008 13:00) 2Колегова Жанна (если ещё актуально): возьмите кровь, стабилизированную цитратом (или растворами типа ACD, CPDA), добавьте полиглюкин 1:1 с кровью, оставьте на 1 ч при комнатной температуре и отберите образовавшийся надосадок, т.е. лейкоциты и тромбоциты. Надосадок, конечно, будет загрязнён эритроцитами, но необходимость дальнейшей очистки вы должны определить сами. Спасибо за совет с полиглюкином. Я правильно понимаю, что его смесь с плазмой 1:1 имеет плотность меньше, чем у эритроцитов, но больше, чем у остальных клеток крови? Это однозначное название, или их куча разных? Где он берется? У меня та же задача, что у инициатора темы. И я нашел только набор для выделения лимфоцитов (а не всех лейкоцитов) "проба-фикол" Он не смешивается с кровью, а кровь на него наслаивается. Эритроциты осаждаются, лимфоциты плавают в фиколе (видимо, имеют ту же плотность), а остальные, видимо, собираются на границе раздела плазмы и фикола (они легче фикола, но тяжелее плазмы). |
« Предыдущая тема · Клеточные технологии · Следующая тема » |