Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Секвенирование геномов SHH медуллобластомы позволяет предсказать эффект химиотерапии

Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! slavak4609
Участник



 прочитанное сообщение 23.06.2014 16:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail

user posted imageРазработка и применение новых средств терапии SHH медуллобластомы (SHH-МБ) должны основываться на данных по генетике опухолей. Опухоли у пациентов различного возраста весьма различаются по набору генетических аномалий. Многие SHH-МБ могут быть устойчивыми к ингибиторам SMO, предлагаемым для лечения. В таких случаях для терапии могут быть использованы другие мишени.

Медуллобластомы (МБ) представляют собой группу злокачественных опухолей мозга различных по молекулярным аномалиям, гистологии и клиническим характеристикам. Они сравнительно часто встречаются у малолетних детей и редко у взрослых. По молекулярным признакам различают четыре главных подгруппы МБ:
1 – WNT с моносомией по хромосоме 6 и мутациями гена CTNNB1,
2 - SHH с мутациями генов PTCH/SMO/SUFU и амплификацией GLI2,
3 - с амплификацией MYC и аномалиями в 5q и 10q,
4 - часто с изохромосомой 17q и делециями хромосом 8 и Х.

Исследования МБ в основном сконцентрированы на опухолях детей, а о биологии и генетике МБ у взрослых известно очень мало. SHH-МБ наиболее часто встречается у детей возраста 3 лет и менее, а также у взрослых, но опухоли в этих возрастных группах весьма различаются по набору генетических аномалий. Для лучшего понимания биологии SHH-МБ и разработки методов терапии с применением антагонистов SMO и комбинированной терапии требуются детальные исследования опухолей пациентов различного возраста.

Спектры мутаций при SHH-МБ у 50 детей 3 лет и меньше, 33 детей 4-17 лет и 50 взрослых старше 18 лет были проанализированы с помощью методов секвенирования нового поколения. Обнаружены мутации в 1156 генах, из которых в 215 они неоднократно повторялись. В 87% случаев наблюдались мутации в генах сигнального пути SHH, что подтверждает их роль как драйверов онкогенеза. У взрослых пациентов доминировали мутации SMО, а мутации SUFU наблюдались практически исключительно у детей возраста 3 лет и менее. Мутации этих двух генов были очень редки у 4-17-летних детей. Вместо этого у них часто присутствовали мутации ТР53 практически никогда совместно с мутациями РТСН1, но часто совместно с амплификацией GLI2 и MYCN. В этой группе были также случаи мутаций ТР53 совместно с амплификацией SHH. Полученные результаты показали, что активирующие мутации пути SHH обнаруживаются практически во всех случаях SHH-МБ, но тип мутаций и пораженные гены очень сильно различаются в различных возрастных группах.

Практически все опухоли взрослых пациентов имели мутации в промоторе TERT, кодирующем обратную транскриптазу теломеразы. В других группах они встречались гораздо реже. Ген РНК-хеликазы DDX3X мутировал более чем у половины взрослых, но сравнительно редко у детей.

У взрослых чаще чем в других группах наблюдались мутации генов модификации хроматина.
Были также обнаружены повторные мутации генов сигнального пути PI3K/AKT/mTOR, встречавшиеся чаще всего у взрослых. Они достоверно ассоциировались с негативным прогнозом заболевания. В таких случаях наилучшие результаты должно давать комбинированное лечение ингибиторами SMO и пути PI3K/AKT/mTOR.

Авторы предположили, что опухоли с мутациями генов пути SHH следующих за геном SMO могут быть исходно устойчивыми к ингибиторам SMO. Культуры клеток, полученные их ксенографтных SHH-МБ, обрабатывали соединением NVP-LDE225 – ингибитором SMO, проходящим III фазу клинических испытаний как средство для лечения рецидивов SHH-МБ у детей и взрослых. NVP-LDE225 эффективно подавляло рост клеток, мутантных по РТСН1, но не клеток с амплифицированным MYCN или с делецией SUFU. Эти результаты были подтверждены экспериментами на мышах с соответствующими ксенографтными опухолями.

Полученные результаты показывают, что разработка и применение новых средств терапии SHH-МБ должны основываться на данных по генетике опухолей. Многие SHH-МБ могут быть устойчивыми к ингибиторам SMO. В качестве дополнительной терапии возможно использование, например, триоксида мышьяка, подавляющего факторы транскрипции GLI. Возможно также применение других комбинаций для предотвращения или задержки развития резистентности с препаратами, воздействующими на сигнальные пути PI3K/AKT/mTOR или РКА.


Источник: Kool M et al. ICGC PedBrain Tumor Project. Genome sequencing of SHH medulloblastoma predicts genotype-related response to smoothened inhibition. // Cancer Cell. 2014; V. 25: P. 393-405.

Подпись к рисунку: Сигнальные пути, связанные с SHH-М и ингибиторы, которые могут быть использованы для лечения.


Сообщение в колонке новостей: Наука: общая и молекулярная биологияСообщение в колонке новостей, раздел "Наука: общая и молекулярная биология"
23.06.2014 16:48
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  24.06.2014 12:49     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

For technical support and expertise, we thank the people from the DKFZ Genomics and Proteomics Core Facility, Malaika Knopf from the NCT Heidelberg, and GATC Biotech AG for sequencing services.

smile.gif)))
Guest
IP-штамп: frdaoauaUv4NM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 15:51     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 09:18)
Ссылка на исходное сообщение  кстати уникальная технолгия изобритенная в России если после УФ Лазаря подчистить ДНК брейки ин витро на магнитнах шариках работает как часы трансфак садится куда надо а не американсский фармалинофеый ЕНКОД Прожект Чичлафека  lol.gif

http://genome.ucsc.edu/ENCODE/


и где можно такой уф лазер найти? (или в страталинкере тоже работает?)
а димеры пиримидиновые вам (полимеразе) не мешают?
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 19:09     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 15:51)
Ссылка на исходное сообщение  и где можно такой уф лазер найти? (или в страталинкере тоже работает?)
а димеры пиримидиновые вам (полимеразе) не мешают?

266 нанометроф наносекундный лазарь мона купить в сосднем шопе лазарь не делает димеры а ДНК брейки учи матчасть
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 19:11     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 19:09)
Ссылка на исходное сообщение  266 нанометроф наносекундный лазарь мона купить в сосднем шопе лазарь не делает димеры а ДНК брейки учи матчасть

в контроль ставишь Инпут а не IgG
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 19:18     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 15:51)
Ссылка на исходное сообщение  и где можно такой уф лазер найти? (или в страталинкере тоже работает?)
а димеры пиримидиновые вам (полимеразе) не мешают?

на Страхалинкере при мощности 4 миливата на сантиметру квадратную будешь облучать клетки один час на 75 милиджоулей палсед детсском Уф лазаре одну две секунды
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 19:27     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 19:09)
Ссылка на исходное сообщение  266 нанометроф наносекундный лазарь мона купить в сосднем шопе лазарь не делает димеры а ДНК брейки учи матчасть

лазарй делает димеры но потом другие фотоны его толпой изничтожают в ДНК брейк что потом на ультразвук хроматина ПСР и Чип-Сек не влияет на протоколах Иллумины
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 19:35     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 15:51)
Ссылка на исходное сообщение  и где можно такой уф лазер найти? (или в страталинкере тоже работает?)
а димеры пиримидиновые вам (полимеразе) не мешают?

на лазаре чиловековые трансфаки картируются на геном примерно при 10-20 джоулей на сантиметру квадратную за пару секунд на Страхалинкере енту дозу мона наскрести за Час без гарантии smile.gif
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 21:41     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 15:51)
Ссылка на исходное сообщение  и где можно такой уф лазер найти? (или в страталинкере тоже работает?)
а димеры пиримидиновые вам (полимеразе) не мешают?

http://www.spectra-physics.com/products/q-switched-lasers/
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 21:47     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 21:41)

работает как часы тянет гены которые фармалином не выцтянешь
Guest
IP-штамп: fr3vQDp6M5Z3I
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 22:48     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 19:27)
Ссылка на исходное сообщение  лазарй делает димеры но потом другие фотоны его толпой изничтожают в ДНК брейк что потом на ультразвук хроматина ПСР и Чип-Сек не влияет на протоколах Иллумины


так надо ДНК потом чинить все-таки или и так работает? лигазой например можно же однонитевые ники сшить
Guest
IP-штамп: fr3vQDp6M5Z3I
гость



 прочитанное сообщение 25.06.2014 23:25     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 21:41)

а такой пойдет? http://www.crylas.de/productsheets/FQSS_266-Q.pdf
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 27.06.2014 07:40     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 23:25)


не пойдет хилый и мелкий диаметр луча - диаметр долген быть 8 мм чтоб 250 миклов клеточных суспензий целиком облучались в Еппендорфе
10 герц наносекундный с 50-75 милидёулей 266 нм в пульсе оптимал

ин витро репарировать не нужно 150 бп ПЦРятца без потери еффективности
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 27.06.2014 08:08     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 23:25)

http://www.spectra-physics.com/products/hi...quanta-ray-indi
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 27.06.2014 08:18     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 23:25)

http://www.spectra-physics.com/products/hi...bcat=pulsed-yag
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 28.06.2014 06:37     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

(Guest @ 25.06.2014 15:51)
Ссылка на исходное сообщение  и где можно такой уф лазер найти? (или в страталинкере тоже работает?)
а димеры пиримидиновые вам (полимеразе) не мешают?



Страталинкером можно полнотранскриптомно карктировать РНКбелок

Интенсивность УФ очень низкая 4 mw cm 2 и дозы 0.4 - 1.2 J cm 2 - HITS-CLIP, iCLIP

Для ДНКбелок полногеномно плюс на Геном Человека трюк не пройдет

Низкоинтенсивный УФ очень плохо пришивает белки к двунитивой ДНК
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 28.06.2014 06:52     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

хотя и для РНК иногда облучали до одного часу

http://www.rjbc.ru/arc/3/11/1570-1572.pdf
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  28.06.2014 07:02     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

http://ago.rockefeller.edu/Ago_HITS_CLIP_P...l_June_2009.pdf
Guest
IP-штамп: frdaoauaUv4NM
гость



 прочитанное сообщение 28.06.2014 14:19     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

(Guest @ 27.06.2014 07:40)
Ссылка на исходное сообщение  не пойдет хилый и мелкий диаметр луча - диаметр долген быть 8 мм чтоб 250 миклов клеточных суспензий целиком облучались в Еппендорфе
10 герц наносекундный с 50-75 милидёулей 266 нм в пульсе оптимал

ин витро репарировать не нужно 150 бп ПЦРятца без потери еффективности


а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 13:08     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?

да ручками Еппер держишь 5 секунд на скорость не влияет Еппер со льда в ПБС
не более 20 лимонов клеток на 250 миклов воды
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 13:11     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?

обычно в луч ставлю квартцевую призму 45 чтоб повернуть лучь вниз
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 13:16     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?

пробовал с магнитным ротором на скорость не влияет пошуршил пипеткой и на 5 секунд в УФ Лазарь
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 13:17     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

(Guest @ 29.06.2014 13:16)
Ссылка на исходное сообщение  пробовал с магнитным ротором на скорость не влияет пошуршил пипеткой и на 5 секунд в УФ Лазарь


ессессно контроли на Иллумину без лазаря чтоб был полный нуль
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 13:25     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?

облучаешь аликвотами 5 раз по 20 лимонофф клетков чичлафекоф со льда в ПБС потом всех вкучу в тритон ингибиторы протеаз сразу потом стандартно зоникатор АЙ ПИ магнитные шарики хай соль вашинг иллумина
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 13:30     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?

еще один нюанс За Пабликухи В Нейче с Американосов за НЕФОРМАЛИНОВЫЕ КОНТРОЛИ СТРОГО НЕ СПРАШИВАЮТ СВОЯ ШАЙКАЛЕЙКА ЗА УФ КРОСЛИНК СПРОСЯТ ПОПОЛНОЙ НА НЕОБЛУЧЕННЫХ
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 13:37     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?


учтите у американосов своя формалиновая ENCODE мафия и УФ кросслинк они просто так не отдадут
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 15:52     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

(Guest @ 29.06.2014 13:37)
Ссылка на исходное сообщение  учтите у американосов своя формалиновая    ENCODE  мафия и УФ кросслинк они просто так не отдадут

заставили переделовыть контроль с необлученнами клетками ну в итоге финальный Хай Салт Вашинг магнитных шаритов самопонятно никаких пиков не дал в контроле lol.gif lol.gif lol.gif lol.gif
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 16:00     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?

ессесно Еппер через открытую крышку прямс на клетки lol.gif lol.gif lol.gif
Guest
IP-штамп: frqIB3XGsOevM
гость



 прочитанное сообщение 29.06.2014 16:07     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

(Guest @ 28.06.2014 14:19)
Ссылка на исходное сообщение  а как их облучать, кстати? неужели просто Эппендорф ставить под луч и все?

биоконтроль УФ дозы 150 бп фрагменты должны отставать 3-5 циклов на реалтайм ПЦР по сравнению не с УФ
Guest
IP-штамп: frdaoauaUv4NM
гость



 прочитанное сообщение 30.06.2014 11:13     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

Прикольно. А как интересно у этих товарищей без лазера получилось? http://ac.els-cdn.com/S1046202396904089/1-...988a6ece46ba225
Наверное потому что они CsCl делали?
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 03.07.2014 07:31     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

(Guest @ 30.06.2014 11:13)
Ссылка на исходное сообщение  Прикольно. А как интересно у этих товарищей без лазера получилось? хттп://ац.елс-цдн.цом/С1046202396904089/1-...988а6еце46ба225
Наверное потому что они ЦсЦл делали?


облучат клетки страхалинкером 30 минут - стока трансфаки не сидят ДНК ин виво smile.gif

http://genesdev.cshlp.org/content/8/14/1678.long
Guest
IP-штамп: frT7jaVjpPwCY
гость



 прочитанное сообщение 05.07.2014 18:19     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

Native ChIP протокол от Steven Henikoff - это полный мрак. В сапплементари куча ошибок и несовпадений со схемой в мэйн тексте. То, что они написали для мухи, воспроизвести невозможно.
Guest
IP-штамп: frT7jaVjpPwCY
гость



 прочитанное сообщение 05.07.2014 18:22     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

Короче на лазер одна надежда осталась. Только прежде чем его покупать, хотелось бы найти кого-то у кого это уже работает. Желательно в Германии.
Участник оффлайн! volmin
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.04.2020 23:01     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

шляп131.4вариWhenАпинЛысоWillЛазуGigiGonzEmilGregDashТараАрти
СотнKennПрозBattRoseколоручкVintАкатЧернконкClanRobeСодеувол
ЧехоJoneпольвремОстрRecoЛезиJackLacoязыкSkinDisnCocoTescYogh
FeelДичеSinfPushJeweSisiEnigСтанTomoПАТеРыкоиллюперитканRich
MichAdioAdioПетеQuikмелоPriyСамаОлефPaulначиГДБоГусеАнтадокл
истоRondHarrУказNasoменяГейрмузеYasuNasoZoneпокоXVIIZoneModo
ZoneЖеляГариZoneпоэтэкспMarvLoveSideФирсZoneFlowСалгАлекМедв
расснебемышл3226ПастРллюСтра1450BrenJoseZoneхорофарфPCIeржав
ndasBoscSwisWindДугаBookКитаMorg4902АртиInteДревМихаSUBAкреп
КрысисслRomaDiscPersинстпредNickкартWarhКасьMacrСуржExitDeLo
ChouSweeохраЧереEverЛиваЛитРGehtРомаоконРсаеЛитРЦейтAcadРѕРїРёСЃ
FinaСемеПопоколотрупMarkPhilSeedMusiкиноЛинеmailупраСереJenn
ДуняЕремKathтеатXVIIТопоВасиРогаПисаLimpТрубавтоЗареиздаСотн
НефеавтокнигБержБаевБеляПлешМусишколмонсPCIePCIePCIeWalkкост
ВетрVictСодеMeatдопоКайлалфаSesaУшакавтоБарсBelo
Участник оффлайн! dorcasmelda
Участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  24.07.2020 15:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

Among other courses, tourism writing services has become popular since students seek Tourism & Leisure writing services Tourism & Leisure Writing Services and tourism assignment writing services.
dorcassmith
IP-штамп: frFIQoaSdZ2kU
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  17.08.2020 11:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

Among other courses, business ethics research writing services has become popular since students seek Ethics Essay Writing Services Ethics Essay Writing Services and ethics assignment writing help services.
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 16.09.2020 18:41     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #37 множественное цитирование

сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
tuchkasсайтсайт
Участник оффлайн! JackOliver




 прочитанное сообщение Сообщение на английском  31.03.2021 11:59     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #38 множественное цитирование

www.zwrotnikraka.pl
www.woodworkingnetwork.com
www.visorando.com
www.tarladalal.com
www.starnow.com
www.starnow.co.uk
www.stageit.com
www.speedrun.com
www.rockit.it
www.renderosity.com
www.rawpixel.com
www.projectnoah.org
www.openrec.tv
www.nytech.org
www.mountainproject.com
www.medialab-prado.es
www.manga-news.com
www.maliweb.net
www.lovelybooks.de
www.longisland.com
www.likealocalguide.com
www.largus.fr
www.htcmania.com
www.hogwartsishere.com
www.gta5-mods.com
www.fundable.com
www.fdb.cz
www.drummerworld.com
www.dday.it
www.cutoutandkeep.net
www.cureus.com
www.clarksvilleonline.com
www.bide-et-musique.com
www.airplane-pictures.net
www.1001pallets.com
westseattleblog.com
virtualcommunities.naccho.org
torgi.gov.ru
thedieline.com
sanangelolive.com
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.09.2021 22:36     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #39 множественное цитирование

сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
tuchkasсайтсайт
Участник оффлайн! kriz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.10.2021 13:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #40 множественное цитирование

maxfort.kiev.ua | avto.dispetcher.biz.ua | pogadaemonline.ru | womens-time.com | movingservices.kiev.ua | journalist24.ru | nrj.com.ua | perevozkin.com.ua | perevozimvse.kiev.ua | perevozkin.kiev.ua | autotemaua.kr.ua | autonewsua.kr.ua | allautonews.kharkiv.ua | autonewstoday.kharkiv.ua | autouanews.kyiv.ua | autoua.kyiv.ua | latestautonews.zt.ua | ukrautonews.zt.ua | autonewstoday.volyn.ua | allautonews.volyn.ua | enews.kyiv.ua | all-news.kyiv.ua | newstime.kyiv.ua | uanews.kyiv.ua | ukrnews.kyiv.ua | newstoday.kyiv.ua | news24.kharkiv.ua | newstime.kharkiv.ua | ukrnews.kharkiv.ua | ukrainenews.kharkiv.ua | dailynews.kharkiv.ua | newstime.kr.ua | ukrnews.kr.ua | newsexpert.kr.ua | allnewstoday.kr.ua | journalist.kr.ua | golosinfo.kr.ua | lentanews.kr.ua | dozanews.kr.ua | internews.kr.ua | glavnews.kr.ua | unews.kr.ua | vestiua.kr.ua | vestnik.kr.ua | mirnews.kyiv.ua | infonews.kyiv.ua | inews.kharkiv.ua | 24day.kharkiv.ua | golos.kharkiv.ua | gazeta.zt.ua | novostiua.kr.ua | dailynews.kr.ua | news24ua.kr.ua | 24ua.kr.ua | dialog.kr.ua | svnews.kr.ua | lentaua.kr.ua | informnews.kr.ua | journalnews.kr.ua | expressnews.kr.ua | vedomosti.kyiv.ua | vestnikua.kyiv.ua | daynews.kyiv.ua | vesti24.kyiv.ua | gazeta24.kyiv.ua
Участник оффлайн! kriz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 06.11.2021 00:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #41 множественное цитирование

Сайт https://womens-time.com
сайт womens-time.com
Женский сайт
Сайт https://avto.dispetcher.biz.ua
сайт avto.dispetcher.biz.ua
Грузовые перевозки
Сайт https://nrj.com.ua
сайт nrj.com.ua
Новости Украины
Сайт https://journalist24.ru
сайт journalist24.ru
Мировые новости
Сайт https://maxfort.kiev.ua
сайт maxfort.kiev.ua
Грузовые перевозки
Сайт https://movingservices.kiev.ua
сайт movingservices.kiev.ua
Грузовые перевозки
Сайт https://pogadaemonline.ru
сайт pogadaemonline.ru
Онлайн гадения
Сайт https://autotemaua.kr.ua
сайт autotemaua.kr.ua
Актуальные новости
Сайт https://autonewsua.kr.ua
сайт autonewsua.kr.ua
События в мире
https://perevozkin.com.ua
https://perevozimvse.kiev.ua
https://perevozkin.kiev.ua
сайт perevozkin.com.ua
сайт perevozimvse.kiev.ua
сайт perevozkin.kiev.ua
perevozkin.com.ua
perevozimvse.kiev.ua
perevozkin.kiev.ua
bov12
IP-штамп: frWoyLp/FCXKE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  16.11.2021 14:32     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #42 множественное цитирование

Interesting stuff to read. Keep it up.오나홀
jad12
IP-штамп: frWoyLp/FCXKE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  17.12.2021 07:36     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #43 множественное цитирование

Great line up. We will be linking to this great article on our site. Keep up the good writing.라이브카지노
superslotv9
IP-штамп: frXkFtWqamLPg
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.12.2021 07:14     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #44 множественное цитирование

Apply for membership, receive 50% new member promotions, free trials, free credits, best-ranked websites Guaranteed by many customers
superslotv9
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  15.01.2022 13:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #45 множественное цитирование

http://audiobookkeeper.ruhttp://cottagenet.ruhttp://eyesvision.ruhttp://eyesvisions.comhttp://factoringfee.ru
http://filmzones.ruhttp://gadwall.ruhttp://gaffertape.ruhttp://gageboard.ruhttp://gagrule.ru
http://gallduct.ruhttp://galvanometric.ruhttp://gangforeman.ruhttp://gangwayplatform.ruhttp://garbagechute.ru
http://gardeningleave.ruhttp://gascautery.ruhttp://gashbucket.ruhttp://gasreturn.ruhttp://gatedsweep.ru
http://gaugemodel.ruhttp://gaussianfilter.ruhttp://gearpitchdiameter.ruhttp://geartreating.ruhttp://generalizedanalysis.ru
http://generalprovisions.ruhttp://geophysicalprobe.ruhttp://geriatricnurse.ruhttp://getintoaflap.ruhttp://getthebounce.ru
http://habeascorpus.ruhttp://habituate.ruhttp://hackedbolt.ruhttp://hackworker.ruhttp://hadronicannihilation.ru
http://haemagglutinin.ruhttp://hailsquall.ruhttp://hairysphere.ruhttp://halforderfringe.ruhttp://halfsiblings.ru
http://hallofresidence.ruhttp://haltstate.ruhttp://handcoding.ruhttp://handportedhead.ruhttp://handradar.ru
http://handsfreetelephone.ruhttp://hangonpart.ruhttp://haphazardwinding.ruhttp://hardalloyteeth.ruhttp://hardasiron.ru
http://hardenedconcrete.ruhttp://harmonicinteraction.ruhttp://hartlaubgoose.ruhttp://hatchholddown.ruhttp://haveafinetime.ru
http://hazardousatmosphere.ruhttp://headregulator.ruhttp://heartofgold.ruhttp://heatageingresistance.ruhttp://heatinggas.ru
http://heavydutymetalcutting.ruhttp://jacketedwall.ruhttp://japanesecedar.ruhttp://jibtypecrane.ruhttp://jobabandonment.ru
http://jobstress.ruhttp://jogformation.ruhttp://jointcapsule.ruhttp://jointsealingmaterial.ruhttp://journallubricator.ru
http://juicecatcher.ruhttp://junctionofchannels.ruhttp://justiciablehomicide.ruhttp://juxtapositiontwin.ruhttp://kaposidisease.ru
http://keepagoodoffing.ruhttp://keepsmthinhand.ruhttp://kentishglory.ruhttp://kerbweight.ruhttp://kerrrotation.ru
http://keymanassurance.ruhttp://keyserum.ruhttp://kickplate.ruhttp://killthefattedcalf.ruhttp://kilowattsecond.ru
http://kingweakfish.ruhttp://kinozones.ruhttp://kleinbottle.ruhttp://kneejoint.ruhttp://knifesethouse.ru
http://knockonatom.ruhttp://knowledgestate.ruhttp://kondoferromagnet.ruhttp://labeledgraph.ruhttp://laborracket.ru
http://labourearnings.ruhttp://labourleasing.ruhttp://laburnumtree.ruhttp://lacingcourse.ruhttp://lacrimalpoint.ru
http://lactogenicfactor.ruhttp://lacunarycoefficient.ruhttp://ladletreatediron.ruhttp://laggingload.ruhttp://laissezaller.ru
http://lambdatransition.ruhttp://laminatedmaterial.ruhttp://lammasshoot.ruhttp://lamphouse.ruhttp://lancecorporal.ru
http://lancingdie.ruhttp://landingdoor.ruhttp://landmarksensor.ruhttp://landreform.ruhttp://landuseratio.ru
http://languagelaboratory.ruhttp://largeheart.ruhttp://lasercalibration.ruhttp://laserlens.ruhttp://laserpulse.ru
http://laterevent.ruhttp://latrinesergeant.ruhttp://layabout.ruhttp://leadcoating.ruhttp://leadingfirm.ru
http://learningcurve.ruhttp://leaveword.ruhttp://machinesensible.ruhttp://magneticequator.ruhttp://magnetotelluricfield.ru
http://mailinghouse.ruhttp://majorconcern.ruhttp://mammasdarling.ruhttp://managerialstaff.ruhttp://manipulatinghand.ru
http://manualchoke.ruhttp://medinfobooks.ruhttp://mp3lists.ruhttp://nameresolution.ruhttp://naphtheneseries.ru
http://narrowmouthed.ruhttp://nationalcensus.ruhttp://naturalfunctor.ruhttp://navelseed.ruhttp://neatplaster.ru
http://necroticcaries.ruhttp://negativefibration.ruhttp://neighbouringrights.ruhttp://objectmodule.ruhttp://observationballoon.ru
http://obstructivepatent.ruhttp://oceanmining.ruhttp://octupolephonon.ruhttp://offlinesystem.ruhttp://offsetholder.ru
http://olibanumresinoid.ruhttp://onesticket.ruhttp://packedspheres.ruhttp://pagingterminal.ruhttp://palatinebones.ru
http://palmberry.ruhttp://papercoating.ruhttp://paraconvexgroup.ruhttp://parasolmonoplane.ruhttp://parkingbrake.ru
http://partfamily.ruhttp://partialmajorant.ruhttp://quadrupleworm.ruhttp://qualitybooster.ruhttp://quasimoney.ru
http://quenchedspark.ruhttp://quodrecuperet.ruhttp://rabbetledge.ruhttp://radialchaser.ruhttp://radiationestimator.ru
http://railwaybridge.ruhttp://randomcoloration.ruhttp://rapidgrowth.ruhttp://rattlesnakemaster.ruhttp://reachthroughregion.ru
http://readingmagnifier.ruhttp://rearchain.ruhttp://recessioncone.ruhttp://recordedassignment.ruhttp://rectifiersubstation.ru
http://redemptionvalue.ruhttp://reducingflange.ruhttp://referenceantigen.ruhttp://regeneratedprotein.ruhttp://reinvestmentplan.ru
http://safedrilling.ruhttp://sagprofile.ruhttp://salestypelease.ruhttp://samplinginterval.ruhttp://satellitehydrology.ru
http://scarcecommodity.ruhttp://scrapermat.ruhttp://screwingunit.ruhttp://seawaterpump.ruhttp://secondaryblock.ru
http://secularclergy.ruhttp://seismicefficiency.ruhttp://selectivediffuser.ruhttp://semiasphalticflux.ruhttp://semifinishmachining.ru
http://spicetrade.ruhttp://spysale.ruhttp://stungun.ruhttp://tacticaldiameter.ruhttp://tailstockcenter.ru
http://tamecurve.ruhttp://tapecorrection.ruhttp://tappingchuck.ruhttp://taskreasoning.ruhttp://technicalgrade.ru
http://telangiectaticlipoma.ruhttp://telescopicdamper.ruhttp://temperateclimate.ruhttp://temperedmeasure.ruhttp://tenementbuilding.ru
tuchkashttp://ultramaficrock.ruhttp://ultraviolettesting.ru
superslot gaming
IP-штамп: frXkFtWqamLPg
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  30.03.2022 05:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #46 множественное цитирование

Popular slot websites that are easy to play, easy to break, have a chance to win big prizes, get rich easily Apply for free credit
superslot gaming
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.06.2022 19:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #47 множественное цитирование

инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинйоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоlandmarksensorинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
tuchkasинфоинфо
guest: Ufa1688
IP-штамп: frJhOCvSv9ICE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  05.07.2022 11:57     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #48 множественное цитирование

The issue was ufabet เข้า สู่ระบบ thrust to the fore 1688.com in 2019 when Lee Myung hee ufa168 matriarch of the Korean หวยลาว Air dynasty, was accused หวยใต้ดิน of physically and verbally หวยรัฐบาล abusing her staff, including ไฮโล by throwing metal shears Habanero at her gardener and forcing Big gaming another staff member to kneel สล็อตออนไลน์ after forgetting to buy ginger.
guest: Ufa1688
IP-штамп: fr/1ZkUsuBQOE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.07.2022 14:51     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #49 множественное цитирование

Bannon is one of two ทางเข้าufa1688 uncooperative witnesses ufabet เข้า สู่ระบบ to be charged so far by the Justice aff 1688 Department for contempt of dragoonsoft Congress. Trump White House Live22 adviser Peter Navarro JILI was indicted by a grand jury SLOTXO last month for not Habanero complying with a Microgaming committee subpoena and บาคาร่า has pleaded not guilty.
guest: Ufa1688
IP-штамп: fr/1ZkUsuBQOE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.07.2022 12:24     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #50 множественное цитирование

But experts say ทางเข้าufa1688 the billionaires' recent aff 1688 struggles are in part ufabet เข้า สู่ระบบ a symptom of their ufa168 past success: Many of the ลิงค์รับทรัพย์ candidates they're challenging หารายได้เสริม from the right, from Abbott down D88 Green Dragon have embraced more and Dream Gaming more conservative positions Funky Games on issues from transgender AMEBA rights to guns to voting

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Колонка новостей · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.03.24 05:20
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft