molbiol.ru -> PCR продукт в качестве зонда для In situ hybr.

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* PCR продукт в качестве зонда для In situ hybr.

Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

Viacheslav
Участник

14.11.2002 06:36

URL #1

Господа, помогите советом.
Кто-нибудь делает или делал сиё, как насчет специфичности, воспроизводимости...вообщем чем больше инфы, тем лучше.
Заранее благодарю!
<img src="graemlins/beer.gif" border="0" alt="[сходка]" />

Husker
Постоянный участник

14.11.2002 10:05

URL #2

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.f...3&dopt=Abstract
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.f...5&dopt=Abstract
[ 14-11-2002: Сообщение отредактировано: Husker ]

Viacheslav
Участник

14.11.2002 10:56

URL #3

Спасибо за ссылки, однако по ним трудно что-то вразумительное понять, кроме одного, что возможно такое сделать. МНе бы хотелось узнать именно КАК это делать.

Husker
Постоянный участник

14.11.2002 11:12

URL #4

зонд против ДНК или РНК?

Viacheslav
Участник

14.11.2002 11:21

URL #5

Против ДНК. Не хочется возиться с векторами для клонирования, есть мысль просто наработать ПЦР продукт в достаточном ко-ве, выделить, пометить меткой и использовать в качестве зонда для ISH на хромосомах человека.

Husker
Постоянный участник

14.11.2002 11:40

URL #6

ну тогда 2 способа - либо метку прямо в ПЦР, либо, что по-видимому больше подходит - ник-трансляция. Так многие делают, технически - никаких проблем. Что касается специфичности и воспроизводимости - тут уж от зонда зависит - т.е. только вскрытие покажет.....

Viacheslav
Участник

14.11.2002 12:06

URL #7

ОК. Спасибо.

K-2
Постоянный участник

15.11.2002 18:52

URL #8

Для получения меченого продукта ПЦР можно использовать не трифосфат с меткой в ПЦР, а меченый праймер - пометить киназой/Гамма-АТФ. Удельная активность продукта, конечно, будет ниже, но сам продукт будет значительно устойчивее, что для гибридизации ин-ситу существенно, там инкубации долгие (в первом случае идет заметный радиолиз зонда).
P.S. Если кто-то не понял, совет дан из доледникового периода, когда флуоресцентных меток не существовало в природе.

[ 20-11-2002: Сообщение отредактировано: K^2 ]

Tom1
Постоянный участник

15.11.2002 19:37

URL #9

А метить чем собираетесь????
[Текст переведён с транслита]

MiG-31

30.11.2002 11:59

URL #10

Уже несколько лет в нашей лабе для ин ситу зонд нарабатывают и метят в ПЦР. Правда работаем мы с хромосомспецифичными или район специфичными зондами, но тем не менее обычная DOP-PCR и все в порядке, а метим bio-11-dUTP.

IAM1688
IP-штамп: frpXPq5TOmUHs
гость

26.10.2021 12:43

URL #11

I used to suck at writing, big โกงบาคาร่า time! So I understand the ka gaming struggle. However, I had a 1688คาสิโน lot of help to improve my writing and blogging skills เกมวัววัว and I want to pay it forward to สมัคร สล็อต ka gaming help those sa gaming 1688 who had the same ลิ้งรับทรัพย์ struggles I did! The aim of an article is usually to ราคา บอล talk about a topic that we like or that we are familiar โปรแกรมโกงบาคาร่า with. Besides, one of the features that ไฮโล articles have as opposed to other FCE Writing tasks is รูเล็ต that an article must entertain the สล็อต22 reader and, almos always, สูตรโกงบาคาร่า recommend the thing we are Alice run talking about.

watchesonline89
Постоянный участник

25.12.2022 10:09

URL #12

https://omegawatches89.mystrikingly.com/
https://www.deviantart.com/omegawatches89/j...pular-930508248
https://eatsleepride.com/c/383270
https://fortunetelleroracle.com/fashion/ama...s-online-737627
https://www.intensedebate.com/people/omegawatches89
https://fortunetelleroracle.com/fashion-acc...-popular-737613
https://anotepad.com/notes/ykiydhnj
https://medium.com/@omegawatches89/amazing-...ne-b4863ed55af0
https://omegawatches90.mystrikingly.com/
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/repli...ve-items-online
https://62e8da780bf7c.site123.me/
https://padlet.com/omegawatches89/9ibenzfwbcer7k71
https://omegawatches89.simplesite.com/452939012
https://62e8da780bf7c.site123.me/blog/excit...-replica-online
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/advan...replica-watches

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.