Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Replikant |
То же касается и стоп-кодона при клонировании в pCI-neo. Сообщение было отредактировано Replikant - 21.10.2012 13:48 |
RJ Dio Постоянный участник |
2) если в рЕТ и в любом другом векторе поставить стоп перед транслируемой последовательностью, то последняя транслироваться не будет 3) если стоп ставится перед регуляторной не-транслируемой последовательностью, коей, без сомнения, является терминатор, то ничего плохого не произойдет. более того, без стопа у вас сзади будет совершенно ненужный бессмысленный довесок, который, скорее всего, только помешает функционированию белка И совет- прежде чем хвататься за пипетку и махать ею из стороны в сторону. еще раз прочтите главы про транскрипцию и трансляцию, по крайней мере, уясните разницу меж этими понятиями. Потом приступайте к переводу реактивов
|
RJ Dio Постоянный участник |
|
Andrew Постоянный участник Москва |
В pET32b теги идут перед полилинкером! Если поставите стоп кодон между ними и клонируемой последовательностью, то на выходите получите просто тиоредоксин без вашего полипептида. Там есть еще 6His-тег на C-конце. Если он будет в рамке со вставкой и тегами на N-конце, то получится два 6His-тега. Кстати о рамке считывания - рекомендую проверить все на "виртуальном" этапе. А то рискуете получить девственно чистый тиоредоксин. ТО о чем вы говорите в pCI, это транскрипционный терминатор (сигнал расщепления и полиаденилирования мРНК). Это относится к транскрипции , а не к трансляции. Своего рода аналог T7-терминатора в PET32.
|
Andrew Постоянный участник Москва |
|
xenopus Постоянный участник Moscow |
|
Andrew Постоянный участник Москва |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |