Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* стоп-кодон в pET и pCI
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Replikant




 прочитанное сообщение 20.10.2012 20:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование
Картинки, фотографии
Вопрос - необходим ли стоп-кодон при клонировании в плазмиде pET32b?
То же касается и стоп-кодона при клонировании в pCI-neo.

Сообщение было отредактировано Replikant - 21.10.2012 13:48
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 21.10.2012 10:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

1. ну и терминология у вас, встройка...где и кто вас учил? как на кухне- там встройка, холодильник всякий. плита....
2) если в рЕТ и в любом другом векторе поставить стоп перед транслируемой последовательностью, то последняя транслироваться не будет
3) если стоп ставится перед регуляторной не-транслируемой последовательностью, коей, без сомнения, является терминатор, то ничего плохого не произойдет. более того, без стопа у вас сзади будет совершенно ненужный бессмысленный довесок, который, скорее всего, только помешает функционированию белка
И совет- прежде чем хвататься за пипетку и махать ею из стороны в сторону. еще раз прочтите главы про транскрипцию и трансляцию, по крайней мере, уясните разницу меж этими понятиями. Потом приступайте к переводу реактивов

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Replikant
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 21.10.2012 10:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

и еще совет- пусть ваше клонирование так и остается виртуальным. Считайте за тост!
Участник оффлайн! Andrew
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 21.10.2012 11:35     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

А что такое "виртуальное клонирование"? confused.gif

В pET32b теги идут перед полилинкером! Если поставите стоп кодон между ними и клонируемой последовательностью, то на выходите получите просто тиоредоксин без вашего полипептида. Там есть еще 6His-тег на C-конце. Если он будет в рамке со вставкой и тегами на N-конце, то получится два 6His-тега. Кстати о рамке считывания - рекомендую проверить все на "виртуальном" этапе. А то рискуете получить девственно чистый тиоредоксин.

ТО о чем вы говорите в pCI, это транскрипционный терминатор (сигнал расщепления и полиаденилирования мРНК). Это относится к транскрипции , а не к трансляции. Своего рода аналог T7-терминатора в PET32.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Replikant
Участник оффлайн! Andrew
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 21.10.2012 14:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

В pCI стоп-кодон нужен, равно как и старт-кодон. Этот вектор не предусматривает каких-либо трансляционных фьюженов. И не забудьте про посл. Козака перед старт-кодоном в своей вставке.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Replikant
Участник оффлайн! xenopus
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 22.10.2012 18:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Не Козака, а Козак. Это тетя такая ваще-то. yes.gif
Участник оффлайн! Andrew
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 22.10.2012 19:14     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

мои извинения мадам Козак
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  08.12.2021 16:41     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

https://www.uptrennd.com/post-detail/hints-...-watch~ODY3MDU2
https://anotepad.com/note/read/mqg8p5jm
https://www.crokes.com/replicarolexwatches/profile/
https://ko-fi.com/post/Watches-Shopping-Gui...-Watc-E1E13PZV9
https://www.merchantcircle.com/blogs/replic...x-Watch/1966540
https://www.nairaland.com/6427528/watches-s...de-finding-fake
https://www.vingle.net/posts/3587193
https://fortunetelleroracle.com/sport/replica-watches-280478
https://www.goodreads.com/story/show/132736...ake-rolex-watch
https://www.diigo.com/item/note/85twz/phwr?...2395edb2dac07ea
https://github.com/ReplicawatchesUK/Replica...ake-Rolex-Watch
https://www.reddit.com/user/Bestreplicawatc...ke_rolex_watch/
https://slashdot.org/submission/13306958/wa...ake-rolex-watch
https://www.wattpad.com/1030107359-replica-...guide-finding-a
https://www.instructables.com/member/Fakero...licPreview=true

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 18:12
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft