Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
GOG8 Постоянный участник |
В качестве переносчика миРНК предлагается использовать клетки непатогенного штамма бактерии E.coli. Бактерия-переносчик, содержащая ген РНК-полимеразы фага Т7, экспрессирует миРНК под контролем Т7 промотора. Бактерия-переносчик также должна экспрессировать фактор инвазин (invasin, Inv), позволяющий ей сначала связаться с рецептором бета-интегрином (beta-integrin) на клеточной мембране клетки-мишени, а затем и проникнуть внутрь нее. Для предотвращения попадания генетического материала в лизосомы также необходима экспрессия фактора листериолизина О (listeriolysin O, HlyA). Доктор Ли предложил две схемы доставки миРНК помощью E.coli - в культуре клеток и in vivo. В первом случае культуру клеток E.coli выращивали совместно с клетками человека в течение двух часов. В результате в клетках человека происходило значительное снижение количества мРНК бета-катенина (CTNNB1) - мишени миРНК (рис. 1). Для проверки метода in vivo клетки E.coli, экспрессирующие миРНК и вспомогательные факторы, ежедневно в течение четырех недель подмешивали в пищу мышам. В качестве альтернативы клетки штамма-переносчика вводили мышам в кровяное русло через 5 дней в течение 2-х недель. В обоих случаях наблюдали значительное снижение экспресии гена-мишени (рис. 2). Метод может совершить настоящий переворот как в методах культуры клеток млекопитающих, так и в методах лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта и мочеполовой системы. Ссылки по теме Статья На рис: (1) - RT-PCR анализ мРНК CTNNB1 в клетках человека после совместной культивации со штаммом-переносчиком миРНК. (2) - Окраска антителами против бета-катенина срезов толстой кишки мышей получавших перорально контрольный штамм или штамм-переносчик миРНК. Рис. из статьи Xiang et al. Nature Biotechnology (2006). Сообщение было отредактировано GOG8 - 21.05.2006 19:02
Сообщение в колонке новостей, раздел "Наука: общая и молекулярная биология" 23.05.2006 07:22 |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
guest: majorsite IP-штамп: frQwaTIvu652E гость |
|
« Предыдущая тема · Колонка новостей · Следующая тема » |