Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* myeloperoxidase & horseradish peroxidase
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! anti anti




 прочитанное сообщение 07.06.2019 10:58     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Асалам алейкум братья! Вопрос такой: могут ли конкурировать за субстрат эндогенные пероксидазы человека (из сыворотки) и пероксидаза хрена (из конъюгата) и путём восстановления перекиси и окрашивания хромогена в ИФА или вестерне давать фон?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.06.2019 12:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

А откуда на блоте человеческая сыворотка. Если это ЭФ-проба, то там все пероксидазы хорошо так проварились. Но даже если мы допустим, что они частично ренатурировали, то фона они давать не могут, а должны давать артефактные дополнительные бэнды.

Сообщение было отредактировано MMM - 07.06.2019 12:28
Участник оффлайн! anti anti




 прочитанное сообщение 07.06.2019 12:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Спасибо МММ что откликнулись, чтоб я без вас делал! Человеческая сыворотка - как источник антител. Но не суть, вот смотрите, ставим блот или ифа или вообще дот блот без эф разделения, не важно что сорбируем(какой-либо антиген) на пластик/мембрану, далее капаем сыворотку => капаем конъюгат с HRP => капаем ТМБ и детектируем сигнал и может ли так получится что мембрана посинела/проба окрасилась из-за эндогенной пероксидазы сыворотки а не HRP конъюгата?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.06.2019 15:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Если вы нормально забили мембрану и используете хороший ,буфер, препятствующий неспецифическому связыванию, то - нет.
Кстати, при забивке молоком фон может теоретически давать лактопероксидаза, но я с этим никогда не сталкивался.
Участник оффлайн! anti anti




 прочитанное сообщение 07.06.2019 18:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

не не никаких молок, только казеинат натрия, буфер нормальный вроде, с бса
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 08.06.2019 08:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

(anti anti @ 07.06.2019 19:51)
Ссылка на исходное сообщение  не не никаких молок, только казеинат натрия, буфер нормальный вроде, с бса

Тогда как пероксидаза из сыворотки сможет зацепиться за мембрану или какую другую поверхность? К тому же пользоваться сывороткой, а не аффинно-очищенными АТ - это моветон.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 24.07.19 11:25
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft