Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Форез с плазмидной ДНК
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Mantequilla




 прочитанное сообщение 03.04.2015 14:10     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

1. Есть плазмида, ее было видно на форезе. Спустя примерно недели хранения при температуре 4С на форезе ничего не видно. При этом ПЦР с встраиваемого фрагмента идет и при измерении на нанодропе есть плазмидная ДНК. В чем может быть дело?
confused.gif
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 03.04.2015 14:19     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

задумайтесь о том, что на нанодропе вы не можете определить есть ли у вас там ПЛАЗМИДА или нет.

возможные решения: 1. контаминация и развал, для ПЦР достаточно 1-2 молекул матрицы чтобы поднялось
2. забыли этидий в буфер добавить.
Участник оффлайн! Mantequilla




 прочитанное сообщение 03.04.2015 15:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

1. Если это развал плазмиды, то почему мы не видим никаких фрагментов, хотя бы шмера.
2. Этидий добавляли, и был образец, который светился на этом же форезе
Спасибо за быстрый ответ)
Участник оффлайн! Horse-radish
Участник



 прочитанное сообщение 03.04.2015 15:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Вариант 1, предложенный ship, наиболее вероятный.
3. Контаминация ПЦР-реагентов. При проведении ПЦР ставили безматричный контроль?
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 03.04.2015 16:16     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

(Mantequilla @ 03.04.2015 13:40)
Ссылка на исходное сообщение  1. Если это развал плазмиды, то почему мы не видим никаких фрагментов, хотя бы шмера.


99.9% плазмиды повалилось до мелких кусочков или до нуклоеотидов, а на форезе то что осталось вы врядли увидите, но для пцр этого хватит за глаза.
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 03.04.2015 16:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

ну и кстати все таки плазмиды хранят на -20С. хотя если все чисто - то и на +4С с ней ничего не будет.
возьмите остатки и попробуйте ими трансформировать колей.
Участник оффлайн! R.J.Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 03.04.2015 17:14     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

если повалилось до нуклеотидов, то ПЦР отстанет оч. сильно, что в руках автора будет означать- ПЦР не пришел, скорее всего. Немного притянутое за уши объяснение. Возможно, плазмиды было не столько (а сколько, кстати?), чтобы после обычного, а не тотального развала, увидеть шмер, все же 1-2-3 полосы превращаются во множество, соответсвенно...
Участник оффлайн! Mantequilla




 прочитанное сообщение 04.04.2015 10:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

3. Безматричный контроль ставился, там ничего не синтезируется

На самом деле плазмида хранилась и при -20 (основная ее часть), а та часть, которая использовалась все время, в холодильнике при -4. Но форез в последующем ставился и с той, что при -20 была. И результат тот же

Плазмиды было около 20 нг/мкл

Всем спасибо за ответы
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  03.12.2021 16:59     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

http://replicarolexwatches.simpsite.nl/
https://www.smore.com/rj7kh-best-replica-watches
https://www.athleticsnation.com/users/Replicarolexwatches
https://pastebin.pl/view/ab0e458a
https://mix.com/watcheshutukcom
https://www.woddal.com/post/359216_tiny-acc...nybody-039.html
https://share.naturalnews.com/posts/3904099
https://demo.wowonder.com/post/214429_the-i...-producers.html
https://rapichat.com/post/5369_our-purpose-...ible-there.html
https://dashburst.com/replicarolexwatches/1
https://sway.office.com/KifcQvn36MK821G8
https://flipboard.com/@replicarolex24
https://getpocket.com/redirect?url=https%3A...eshut.uk.com%2F
https://www.openstreetmap.org/user/Hints%20...20Rolex%20Watch
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  28.12.2022 10:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

https://omegawatches89.mystrikingly.com/
https://www.deviantart.com/omegawatches89/j...pular-930508248
https://eatsleepride.com/c/383270
https://fortunetelleroracle.com/fashion/ama...s-online-737627
https://www.intensedebate.com/people/omegawatches89
https://fortunetelleroracle.com/fashion-acc...-popular-737613
https://anotepad.com/notes/ykiydhnj
https://medium.com/@omegawatches89/amazing-...ne-b4863ed55af0
https://omegawatches90.mystrikingly.com/
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/repli...ve-items-online
https://62e8da780bf7c.site123.me/
https://padlet.com/omegawatches89/9ibenzfwbcer7k71
https://omegawatches89.simplesite.com/452939012
https://62e8da780bf7c.site123.me/blog/excit...-replica-online
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/advan...replica-watches

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 19:00
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft