Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
vb Постоянный участник |
пугает, что методика с радиоактивной меткой. правильно ли я понимаю ситуацию, что если у нас нет этой кухни (радиоактивной), то лучше туда и не лезть? что выбрать в качестве альтернативы? на ум приходит биотиновая метка с авидин-ферментным коньюгатом (щелочная фосфатаза?), флюресцентная метка (пока не знаю что выбрать). нужно дешево, сердито и желательно с минимальными затратами на оборудование. |
MMM Постоянный участник |
|
dk Постоянный участник Россия |
|
LMP Постоянный участник |
Это будет по-лучше радиоактивной метки |
vb Постоянный участник |
|
Pharmaсol Постоянный участник |
Да и дешевле, наверняка, чем Сигма. |
NMR-guy Постоянный участник временной жизни |
Все зависит от того, накой она вам нужна стала опять. Если - количественный пикомолярный анализ или детекция следов чего-то (в том числе - блотом) с последующим наложением на микросрезы, то никакая флуоресценция, не говоря про антитела со стрептавидином (качество которых и афинность к мишени плавает от партии к партии и при хранении), по чувствительности и линейности вам ее не заменит. Договаривайтесь с ИБХ, если сможете их чем-то заинтересовать (выше правильно советуют). Если это макро-исследования всяких экспериментальных биоптатов на предмет "качественно сказать где оно осело" - то тут флуоресцентные метки, зонды конъюгаты квантовых точек и прочее модное и красивое даже лучше подойдет, поскольку работать проще и отходы можно выливать в раковину. |
LMP Постоянный участник |
(Pharmaсol @ 13.12.2016 23:22) DIG потом "визуализировать" еще надо, может проще сразу флуоресцентной Алексой, типа этой да. конечно, есть антитела к DIG с пероксидазой. В своё время закупал всю систему у Бёрингера (кто уж его поглотил потом не помню). А Сигму привёл просто для для описания метода. |
MMM Постоянный участник |
Когда это было, Когда это было..........во сне, наяву ...... -- (кто уж его поглотил потом не помню). Это Рош, Это Рош, Рош,Рош Рош....... В общем диговая система раза в три четыре дороже биотиновой, но если у вас двойная окраска на FISH, то куда вы денетесь с подводной лодки. Кроме, того ДИГ дает меньше фона. --DIG потом "визуализировать" еще надо, может проще сразу флуоресцентной Алексой, типа этой Да и дешевле, наверняка, чем Сигма. Очень вряд ли дешевле. Алексу что визуализировать не надо? Единственный достойный агрегат для визуализации Алексы на мембране - это Typhoon 9500. Потому что там лазеры светят и интерференционные фильтры стоят на отсечке. если вы думаете, что вы посветите на мембрану синим(да и любым др. транслюмом) и увидите Алексу то вы ооочень глубоко заблуждаетесь. Визуализировать пероксидазу дешевле не придумаешь люминол и гидроксикоричная кислота + аптечная перекись рентгеновская пленка и проявитель. Но если у вас в кладовке лаборатории вместо рентгеновского проявителя завалялось парочка тайфунов, то можно и Алексой Сообщение было отредактировано MMM - 14.12.2016 12:58 |
LMP Постоянный участник |
(MMM @ 14.12.2016 10:49) Визуализировать пероксидазу дешевле не придумаешь люминол и гидроксикоричная кислота + аптечная перекись рентгеновская пленка и проявитель +++только пленку не любую, а с чувствительностью не менее 300ор; (300 - 500) норм. |
MMM Постоянный участник |
|
R.J.Dio Постоянный участник |
(dk @ 12.12.2016 22:29) Да, в ИБХ "кухня" налажена. Но не факт, что заинтересуете народ. Но в любом случае "быстро, дёшево и качественно" не получится. не дай Вам Б-г попробовать эту "налаженную" кухню, с такой голимой меткой, как нынешняя. Руки бы поотрывать! |
vb Постоянный участник |
(NMR-guy @ 14.12.2016 04:09) Радиацию в Вашем корпусе Вам никто делать (и покупать) законно не даст (хотя, я знаю, что вы ее там у себя все равно по-тихому делали лет 20 назад). Это должно быть отдельно стоящее или физически изолированное по всем коммуникациям здание с ПОСТОЯННО действующим дозиметрическим шлюзом и еще куча других обязательных норм, которые, если не заложены в проект строительства, выполнить нереально потом. Все зависит от того, накой она вам нужна стала опять. Если - количественный пикомолярный анализ или детекция следов чего-то (в том числе - блотом) с последующим наложением на микросрезы, то никакая флуоресценция, не говоря про антитела со стрептавидином (качество которых и афинность к мишени плавает от партии к партии и при хранении), по чувствительности и линейности вам ее не заменит. Договаривайтесь с ИБХ, если сможете их чем-то заинтересовать (выше правильно советуют). Если это макро-исследования всяких экспериментальных биоптатов на предмет "качественно сказать где оно осело" - то тут флуоресцентные метки, зонды конъюгаты квантовых точек и прочее модное и красивое даже лучше подойдет, поскольку работать проще и отходы можно выливать в раковину. это про что вообще? |
kb1 Участник |
(vb @ 14.12.2016 17:17) ну, какой вопрос - такой ответ. Видимо, это про "свалившуюся методику, которую надо..". Не понятно, Вы что хотите? Если освоить работу с радиоактивной меткой, тогда обращайтесь туда где с ней работают (в ИБХ например). Если стоит конкретная научная задача, то попробуйте корректно ее сформулировать |
vb Постоянный участник |
(kb1 @ 14.12.2016 16:54) ну, какой вопрос - такой ответ. Видимо, это про "свалившуюся методику, которую надо..". Не понятно, Вы что хотите? Если освоить работу с радиоактивной меткой, тогда обращайтесь туда где с ней работают (в ИБХ например). Если стоит конкретная научная задача, то попробуйте корректно ее сформулировать Если 4 человека поняли о чем речь и ответили, а один не понял и ему нужно какую-то ^конкрентную научную задачу^, то боюсь, дело не в моей формулировке. Я вообще не понял пассажи про корпуаса и где я 20 лет назад работал с меткой. Научных задач у меня вообще нет. От сохи мы. |
NMR-guy Постоянный участник временной жизни |
|
Aadvark Участник |
Работать просто. Избегаете всех трудностей, связанных с радиоизотопами Удачи,
|
vb Постоянный участник |
|
nigoal123 IP-штамп: frAWeMdOsBSXM гость |
organic traffic from |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |