Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* ELISA дизайн протокол
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 20.11.2017 22:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #51 множественное цитирование

т.е. Primary Capture Antibody, которым изначально покрыт планшет...Сверху Sample - это мое антитело и на него мой белок Fc, который прицепиться (надеюсь) к моему антителу....потом, Biotinylated Antibody, которое прицепиться к белкуFc и потом Str HRP

Сообщение было отредактировано Rob - 21.11.2017 00:04
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 20.11.2017 22:33     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #52 множественное цитирование

(MMM @ 20.11.2017 18:24)
Ссылка на исходное сообщение  Угу! Все по кругу ходите.
Вопрос:
Вы хотите найти некую эффективную концентрацию своего Fc белка?
Или вы хотите сравнить аффинность вашего белка с неким стандартом.

--Т.е. на подготовленный планшет я добавляю свое антитело
Этот номер не пройдет! В данном наборе планшет уже сенсебилизирован и добавить на него чего-то своего не удастся.
Вот нанести свой Fc-белок вы можете. А дальше вас может ждать либо удача, либо разочарование. Если в данном наборе антитела, которыми сенсебилизирован планшет и которые биотинилированы оба работают против Fc  фрагмента, но на направлены против разных его участков - все будет хорошо, а вот если хотя бы одно из них направлено против Fab, то вы ничего не увидите.

Если я правильно понимаю, у него фьюжн белка с Fc.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 21.11.2017 00:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #53 множественное цитирование

--.Сверху Sample - это мое антитело
А ваше антитело "получено" в человеке?
А ваш Fc-белок, Fc какого зверя воспроизводит?
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 21.11.2017 17:20     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #54 множественное цитирование

Да, антитело полностью человеческое...А белок-Fc имеется в двух вариантах: Fc human и Fc mouse
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 22.11.2017 20:42     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #55 множественное цитирование

Ага! Вот представьте себе, что в этом наборе антитела, сенсебилизирующие планшет против Fc hIgG. Вы наносите свои человеческие АТ, которые захватываются нижними антителами за Fc фрагмент, потом вы добавляете к этому бутерброду человеческий Fc фрагмент - он будет конкурировать с человеческими антителами нанесенными ранее на антитела сенсебилизирующие планшет. Разве это хорошо? Далее коньюгат антител против антител человека с биотином будет взаимодействовать с антителам человека и с их Fc фрагментом, нанесенным на них. Разве это хорошо? Если вы возьмете свой Fc фрагмент из мыши, то коньюгат с биотином его не узнает.

Ну, и вообще мне непонятно, как АТ человека против Fc человека вообще могут существовать в растворе они должны выпадать в осадок или это должен быть только Fab фрагмент, но тогда не факт, что он будет связываться с АТ, сесебилизирующими планшет.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 27.11.2017 18:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #56 множественное цитирование

Да уж...
тогда у меня другая идея...
Пометить мой белок Fc (не важно человек или мышки) специальной краской..
Проинкубировать планшет антителом...сверху помеченный белок...и прочитать сигнал.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 27.11.2017 19:41     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #57 множественное цитирование

-Пометить мой белок Fc (не важно человек или мышки) специальной краской..-
Вы на полпути к решению.

Прочтите еще раз мое сообщение в этом же топике от 15.09.2017 00:06(реплика 16):
"Но на самом деле вам надо сделать не так. Вам надо мышинную химеру или просто человеческий нативный Fc пометить биотином связать ее с нижними античеловеками, а потом вытеснять тестируемым белком и белком сравнения (тем же нативным Fc или мышинной химерой, но не меченными биотином) и вытеснять эквимолярными количествами и сравнивать результаты вытеснения с помощью стрептавидин пероксидазы."
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 01.12.2017 21:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #58 множественное цитирование

(MMM @ 27.11.2017 20:41)
Ссылка на исходное сообщение  -Пометить мой белок Fc (не важно человек или мышки) специальной краской..-
Вы на полпути к решению.

Прочтите еще раз мое сообщение в этом же топике от 15.09.2017 00:06(реплика 16):
"Но на самом деле вам надо сделать не так. Вам надо мышинную химеру или просто человеческий нативный Fc пометить биотином связать ее с нижними античеловеками, а потом вытеснять тестируемым белком и белком сравнения (тем же нативным Fc или мышинной химерой, но не меченными биотином) и вытеснять эквимолярными количествами и сравнивать результаты вытеснения с помощью стрептавидин пероксидазы."


Благодарю

Ваше мнение, нужно ли инкубировать планшет с немеченным антителом? Или можно делать напрямую...на планшет положить тестируемое антитело, сверху - биотинилорованный протеин Fc, ...а потом Стрептавидин HRP?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 02.12.2017 17:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #59 множественное цитирование

--нужно ли инкубировать планшет с немеченным антителом?
Да!!
--Или можно делать напрямую...на планшет положить тестируемое антитело, сверху - биотинилорованный протеин Fc, ...а потом Стрептавидин HRP?
Так можно тестировать качественно нанличие сваязывания или его отстутствие. Сравнить таким способом ничего не удасться.
Участник оффлайн! Susani

Россия



 прочитанное сообщение 06.12.2017 15:38     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #60 множественное цитирование

у всез разное мнения( и кого слушать
Участник оффлайн! Xowincahi

Москва



 прочитанное сообщение 10.12.2017 02:59     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #61 множественное цитирование

слушайте экспертов) или спросите у гугла))
Участник оффлайн! osvedyua

Казань



 прочитанное сообщение 11.12.2017 01:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #62 множественное цитирование

Интересно, а что такое человеческое антитело из мышки?
Участник оффлайн! Tttenenil

Россия



 прочитанное сообщение 14.12.2017 14:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #63 множественное цитирование

ну если вы не знаете, то вам на форум заходить рано)
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 14.12.2017 18:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #64 множественное цитирование

(MMM @ 02.12.2017 18:05)
Ссылка на исходное сообщение  --нужно ли инкубировать планшет с немеченным антителом?
Да!!
--Или можно делать напрямую...на планшет положить тестируемое антитело, сверху - биотинилорованный протеин Fc, ...а потом Стрептавидин HRP?
Так можно тестировать качественно нанличие сваязывания или его отстутствие. Сравнить таким способом ничего не удасться.


А вот еще одна идея у меня...инкубировать планшет тестируемым антителом....отдельно в пробирке инкубировать это же тестируемое антитело с тестируемым белком (белок титровать). Этот микс из пробирки добавить на планшет...инкубировать...и измерять сигнал. По наличию сигнала будет видна сила связывания антитела и белка в пробирке.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 14.12.2017 18:01     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #65 множественное цитирование

(Tttenenil @ 14.12.2017 15:34)
Ссылка на исходное сообщение  ну если вы не знаете, то вам на форум заходить рано)

По Вашему на форум можно только знаущим - презнающим..?
Участник оффлайн! zaravalinh

Москва



 прочитанное сообщение 17.12.2017 22:16     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #66 множественное цитирование

я вот тоже мало знаю) только почитать зашел и что?
Участник оффлайн! razhandal

Краснодар



 прочитанное сообщение 03.01.2018 02:56     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #67 множественное цитирование

да тогда вам тоже на дверь тут укажут)) вообще то шутка)) тут люди добрые
Участник оффлайн! nadianyana

Украина



 прочитанное сообщение 09.01.2018 22:27     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #68 множественное цитирование

да весело тут-меня то не выгоняйте
Участник оффлайн! nrymrtln

РОССИЯ



 прочитанное сообщение 04.02.2018 02:27     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #69 множественное цитирование

Под связывающей активностью вы что подразумеваете?
Участник оффлайн! myajwfho

Россия



 прочитанное сообщение 20.02.2018 18:06     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #70 множественное цитирование

Подразумеваю, как будет антитело связываться с белком.

Покрываю плитку анти-человеческим неспецифич. антителом...потом блокирую BSA...потом, белок Fc человеческий...потом, антитело человеческое, произведенное в мышках...и сверху
Участник оффлайн! Handarin

Россия



 прочитанное сообщение 23.02.2018 20:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #71 множественное цитирование

Хочу добавить деталей...

покрываю пластик плитки goat anti-human UNLB антителом...инкубирую ночь
потом, белок, у которого human Fc....инкубирую
потом, антитело human Fc (mouse origin)...инкубирую
потом, goat anti-human HRP..инкубирую...

крашу

Не будет ли HRP антитело вязаться к UNLB антителу?
Участник оффлайн! Sarodren

Россия



 прочитанное сообщение 06.04.2018 18:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #72 множественное цитирование

Козлиное UNLB немеченное антитело на плитке разпознает все, что можно разпознать или только какую то спец. область, как примеру, Fc?
Участник оффлайн! fsmgoiws

Россия



 прочитанное сообщение 10.05.2018 19:05     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #73 множественное цитирование

Интересно, а что такое человеческое антитело из мышки?
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  20.11.2021 17:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #74 множественное цитирование

https://www.uptrennd.com/post-detail/hints-...-watch~ODY3MDU2
https://anotepad.com/note/read/mqg8p5jm
https://www.crokes.com/replicarolexwatches/profile/
https://ko-fi.com/post/Watches-Shopping-Gui...-Watc-E1E13PZV9
https://www.merchantcircle.com/blogs/replic...x-Watch/1966540
https://www.nairaland.com/6427528/watches-s...de-finding-fake
https://www.vingle.net/posts/3587193
https://fortunetelleroracle.com/sport/replica-watches-280478
https://www.goodreads.com/story/show/132736...ake-rolex-watch
https://www.diigo.com/item/note/85twz/phwr?...2395edb2dac07ea
https://github.com/ReplicawatchesUK/Replica...ake-Rolex-Watch
https://www.reddit.com/user/Bestreplicawatc...ke_rolex_watch/
https://slashdot.org/submission/13306958/wa...ake-rolex-watch
https://www.wattpad.com/1030107359-replica-...guide-finding-a
https://www.instructables.com/member/Fakero...licPreview=true
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.12.2022 11:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #75 множественное цитирование

https://telegra.ph/Advantages-Of-Replica-Watches-08-03
https://issuu.com/home/published/_6_.docx
https://www.gta5-mods.com/paintjobs/watchesswiss
https://omegawatches89.onweb.it/
https://padlet.com/omegawatches89/je3eq9ol3xzmb9bp
https://www.pinterest.com/omegawatches89/
https://knowyourmeme.com/users/omegawatches89
https://bitcointalk.org/index.php?topic=76487.new#new
https://omegawatches89.blog.hu/
https://knowyourmeme.com/forums/general/top...f-so-why?page=1
https://penzu.com/p/c6f21f5d
https://www.reddit.com/user/omegawatches89/...are_so_popular/
https://www.vingle.net/posts/4647076
https://penzu.com/p/c68b65cc
https://diigo.com/0pige9

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.03.24 11:22
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft