Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Olezhek Постоянный участник Tsukuba, Japan/КФУ, РФ |
Пожалуйста поделитесь азами переноса РНК из геля на мембрану для Нозерна. У меня нет под рукой форезной машинки обычно используемой для трансфера. Либо ее нужно срочно покупать, либо (помня картинку из Molecular Cloning) делать перенос чуть ли не в той же емкости, где проводился РНК форез... Я понимаю что вопрос очень примитивный и заранее извиняюсь.. просто отсутствие опыта дает себя знать... Также очень было бы интересно узнать предпочтения аудитории в форезных буферах и буферах для трансфера РНК. Заранее спасибо! |
K-2 Постоянный участник |
1. Формальдегидный форез в Na-фосфатном буфере. Гель не отмывать и не красить. 2. Перенос на нитроцеллюлозу в 20xSSPE ночь, если на нейлон - можно конц. SSC уменьшить. Емкость - любые два корыта с фитилями, а гель на стекле между корытами. На геле мембрана (смачивается заранее). Сверху стопка фильтровалки в 5 раз толще геля, стекло и груз. 3. Сполоснуть мембрану 2xSSC, высушить и запечь в вакууме 2 часа при 80 С. Детали - в старом Маниатисе. Так творилась история. А дальше, наверное, будут вопросы про гибридизацию? |
|
|
Ufa1688 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |