Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Guest IP-штамп: fr/JbzbPKZJ2M гость |
Подскажите, пожалуйста, если кто знает. Кто в России может продать наборы для выделения ДНК/РНК фирмы MoBio (USA)? Официального российского дистрибьютера у них нет. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Но этого же гобра полно в россии и европе, кому оно нужно, пардон... |
Guest IP-штамп: fr/JbzbPKZJ2M гость |
Если Вы знаете доступный в России кит для выделение ДНК/РНК из различных типов почвы, подскажите. |
Almabion Участник |
|
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
MO BIO Laboratories, Inc: C1 150 mM NaCl, 4% SDS, 0.5 M Tris C2 133 mM Ammonium acetate C3 120 mM aluminum ammonium sulfate dodecahydrat Далее по их протоколу можно пользоваться любым китом хоть от Ъ, хоть от Силекса, хоть от Цитокина. Алюминий аммонийные квасцы можно купить: А вот с РНК-ой не очень понятно ибо они используют для нее какую то не силка колонку больше похоже на анионообменник типа Q-sepharose Карбид кремния, я думаю, в первой пробирки можно заменить на любой твердый материал начиная с кварцевых шариков,наждака, шариков из сапфира, или на худой конец абразивного синтетического алмаза. А так все растворы тоже анонсированы 181 mM NaPO4, 121 mM guanidinium thiocyanate SR1 150 mM NaCl, 4% SDS, 0.5 M Tris SR2 120 mM aluminum ammonium sulfate dodecahydrate SR3 5 M NaCl in 22 mM citric acid anhydrous salt, 29 mM trisodium citrate, dehydrate, pH 5.0–5.2 SR4 100% Isopropanol SR5 500 mM NaCl in 50 mM 2-(N-morpholino)propane- sulfonic acid (MOPS) with 15% isopropanol, pH 7.0 SR6 750 mM NaCl in 50 mM MOPS with 15% isopropanol, pH 7.0 SR7 DEPC-treated water В принципе можно поиграться с Q-sepharose и подобрать концентрацию соли при которой смывается РНК без ДНК. Те растворы SR5 и SR6 могут менять концентрацию соли в зависимости от используемой колонки. Но, я полагаю(и так будет гораздо проще), что если вы после SR3 сделаете просто тризольную экстракцию, а лучше RNA по Хомченски (а не их фенольную экстракцию). Вы вряд ли проиграете в качестве. Без всяких последующих колонок. |
Guest IP-штамп: frOY.7heFxH46 гость |
|
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
Это и есть анионообменник. Я про него и говорил. Скорее всего Q-sepharose. |
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
|
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
Это миф о стабильности работы в разных руках. Можете почитать вопли на форуме. Помогите очень грязная ДНК не идет ПЦР(клонирование), лигирование и тд, чистили китом таким то, не знает ли кто кита получше.
|
Rhizon Участник |
Спасибо, должен сказать, что мы умеем выделять ДНК из почвы чисто и количественно с использованием неких комбинированных подходов. Т.е. проблем как бы нет. Но, к сожалению, во всех этих методах довольно много всяких тонкостей, в результате мы имеем то, что в других руках это работает нестабильно. Нужна технология, а не искусство. Поэтому, если у Вас есть какие-то соображения, будем рады с Вами пообщаться. Если не трудно, напишите мне по e-mail, пожалуйста. Сообщение было отредактировано Rhizon - 12.02.2011 12:48 |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Грустно, когда профессионалы так зависимы от этих долбанных китов. Вот и приходится их "готовить"... |
Rhizon Участник |
Ъ, из Ваших слов я понял, что количественное выделение чистых препаратов ДНК/РНК из различных типов почвы для Вас не является проблемой и Вы можете предоставить технологию, которая будет работать с одинаковым успехом в разных руках. В таком случае я весьма заинтересован в сотрудничестве с Вами. Если Вам не трудно, свяжитесь, пожалуйста, со мной по электронной почте. P.S. Кровь, кстати, даже засохшая на асфальте, является объектом, из которого выделить ДНК совсем не трудно. А вот почва, донные осадки (некоторые из которых активно сорбируют ДНК) и пр. представляют собой гораздо более серьезную проблему. |
guest: Andrey N IP-штамп: fr/FWcWysIOtM гость |
На середину ноября цены были такими: PowerSoil® DNA Isolation Kit 12888-50 $403,3 12888-100 $780,7 +100$ за транспортировку (в независимости от того сколько везете-1 коробочку или 50) www.rusbiolink.com |
Guest IP-штамп: fr/JbzbPKZJ2M гость |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Rhizon @ 14.02.2011 16:55) to -Ъ- Ъ, из Ваших слов я понял, что количественное выделение чистых препаратов ДНК/РНК из различных типов почвы для Вас не является проблемой и Вы можете предоставить технологию, которая будет работать с одинаковым успехом в разных руках. В таком случае я весьма заинтересован в сотрудничестве с Вами. Если Вам не трудно, свяжитесь, пожалуйста, со мной по электронной почте. P.S. Кровь, кстати, даже засохшая на асфальте, является объектом, из которого выделить ДНК совсем не трудно. А вот почва, донные осадки (некоторые из которых активно сорбируют ДНК) и пр. представляют собой гораздо более серьезную проблему. Я могу предложить свой готовый кит попробовать, но в любом случае Вам нужно "вытянуть" ДНК из образцов почвы самым банальным SDS-протеназой К методом. Донный осадок нужно измельчить, растереть и т.д., как это делают при выделении из ДНК костей... А сопутствующие гуминовые кислоты и др. ингибиторы - поиспытаете на готовом ките, посмотрим. Лучше сорбцией в обеме, чем на колонках или магн. шариках. Можете начать с очистки выделенной, но "неработающей грязной" ДНК, если такая есть у Вас, иммитируя выделение. Так что пишите. |
Guest IP-штамп: fr.whI5oqq.Vw гость |
Товарищи, если у кого-нибудь в лаборатории используется MO BIO POWER SOIL DNA ISOLATION KIT, сейчас срочно не используется и в наличии есть колонки-фильтры - можно ли купить их у вас (нужно около 15-20 штук)? Грант пришел только сейчас, КИТ из США придет только через два месяца, а работу нужно провести в ближайшие недели. КИТ получим - сможем вернуть колонки (или отдать деньгами). |
Rhizon Участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |