Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Хранение ДНК
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Guest
IP-штамп: frMqP6RPm1mxU
гость



 прочитанное сообщение 22.04.2010 12:17     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Как долго хранится ДНК в ТЕ. И как лучше хранить при -20 или при -80?
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 22.04.2010 12:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

долго. если не оттаивать очень часто. место работы поменять успеете за это время.
при -20С.
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 22.04.2010 12:42     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Практически все зависит от качества выделенной ДНК, от наличия примесей. В ТЕ с консервантами - при 4 оС.
Guest
IP-штамп: frMqP6RPm1mxU
гость



 прочитанное сообщение 22.04.2010 12:44     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Что за консерванты?
Участник оффлайн! Mykhaylo
Постоянный участник
Україна



 прочитанное сообщение 22.04.2010 13:34     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

В ТЕ при +4оС после фенола хранил до 6 лет, главное чтобы пробирки были с очень плотными крышками. Если на -20оС , то храню в воде - некоторые образцы уже больше 15ти лет (опять же важны крышки, чтобы не усохли). Хотя смотря для чего нужна потом ДНК.
Guest
IP-штамп: frMqP6RPm1mxU
гость



 прочитанное сообщение 22.04.2010 13:47     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Нужна для ПЦР
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 22.04.2010 16:00     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(Guest @ 22.04.2010 13:44)
Ссылка на исходное сообщение  Что за консерванты?

ЕДТА в умереных количествах, азид натрия от 0,1 до 0,01%, Проклины всякие. Да мало ли еще каких... А ПЦР по фиг, т.е не ингибируют.
Участник оффлайн! Лошарик

Донецк



 прочитанное сообщение 22.04.2010 18:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Говорят, до месяца при -20С (практически выходит дольше), до года при - 70С (не пробовали, но тоже говорят, что дольше может протянуть).
Участник оффлайн! Dimych
Постоянный участник
Kr-sk - Puschino - NYS - Calgary... Круг замкнулся



 прочитанное сообщение 22.04.2010 20:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Даже РНК в воде при -20 хранится много дольше месяца.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Atropos
Участник оффлайн! Andrew
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 23.04.2010 09:25     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

(Лошарик @ 22.04.2010 16:46)
Ссылка на исходное сообщение  Говорят, до месяца при -20С (практически выходит дольше), до года при - 70С (не пробовали, но тоже говорят, что дольше может протянуть).


Какой месяц... Какой год... Вот недавно разморозили плазмиду, которая с конца восьмидесятых лежала в каком-то полудохлом "розенлеве" (или "саратове"...) и ничего... даже на форезе выглядит вполне прилично, не говоря уже о трансформации. Так что я думаю на -70 и для ПЦРа лет 100 пролежит...

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Atropos
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 23.04.2010 10:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

стоп-стоп-стоп. Если геномка, замораживать ни в коем случае нельзя!
Участник оффлайн! Andrew
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 23.04.2010 10:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

с чего бы это?
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 23.04.2010 12:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

а с того, что не получится нормального раствора, будут плавать сгустки, из которых невозможно будет сделать нормальных последовательных разведений, если вы когда-нибудь покупали фирменную человечину от NEB, скажем, она едет на +4 и хранится так же.

Сообщение было отредактировано RJ Dio - 23.04.2010 12:19
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 23.04.2010 15:07     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

(RJ Dio @ 23.04.2010 11:34)
Ссылка на исходное сообщение  стоп-стоп-стоп. Если геномка, замораживать ни в коем случае нельзя!

Вспоминаются суровые временя Саузернов...
Участник оффлайн! D evgenii
Постоянный участник
Томск



 прочитанное сообщение 24.04.2010 10:14     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

Храню на -80С годами, испарений нет!
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.04.2010 21:36     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

к чему бы это? Про испарение вроде никто и не заморачивался
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 27.04.2010 09:34     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

No frost не пользоваться - не будет (будет, но минимальное) испарения. no.gif
Участник оффлайн! D evgenii
Постоянный участник
Томск



 прочитанное сообщение 27.04.2010 14:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

К тому, что при -20С частенько они высыхают.
Участник оффлайн! Daemonarchestratygos
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 27.04.2010 20:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

(Guest @ 22.04.2010 10:17)
Ссылка на исходное сообщение  Как долго хранится ДНК в ТЕ. И как лучше хранить при -20 или при -80?

Если не геномная (например, плазмидная) - без разницы (для долговременного (годы) хранения можно парафильмом обмотать верхнюю часть эпп-фа или использоватьть пробирку с завинчивающейся крышкой). Впрочем, линейную ДНК (если она имеет концевые фосфаты и они нужны), я бы всё-таки хранил при -80 (если долго). Геномная же ДНК может быть механически повреждена (порвана) кристаллами льда в результате замораживания-оттаивания, так что хранить следует при +4.
Участник оффлайн! akatar




 прочитанное сообщение 28.04.2010 00:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

Геномную (да и плазмидную и всякую прочую) ДНК оптимальнее всего хранить в заморозке на -20, можно в ТЕ, можно просто в воде. Если ДНК была выделена нормально, без значительных белковых примесей, то так она хоть 20 лет лежать может. Даже без всяких азидов и ЭДТА. На -20 даже кДНК по 3, а то и по 5 лет жить может. Чтобы не было издержек от переходов через ноль, можно не весь имеющийся объем каждый раз размораживать-замораживать, а просто сделать 1-2 мелких "рабочих" аликвот.
Выпадение нерастворимого осадка ДНК при хранении связано скорее не с усыханием из-под крышки, а с потерей ДНК сольватной оболочки и залипанием ее самой на себя. Физхимия, так сказать... Температуры типа -70 / -80 очень способствуют такому вымораживанию ДНК из собственной сольватной оболочки; а недовычищенные при выделении белки очень способствуют тому, что регидратировать такие конгломераты потом практически невозможно. А потому, хранить геномку на -70 не рекомендуется. И уж совсем не рекомендуется, как это делают некоторые умельцы, хранить геномную ДНК в виде осадка под спиртом.
И еще такой момент - концентрация геномной ДНК для хранения в заморозке лучше чтобы была не более 1 - 1,2 мгк/мкл; чем ДНК жиже, тем меньше вероятность, что часть ее вывалится в нерастворимый осадок. Хотя основную роль тут играет скорее даже не высокая концентрация ДНК, а именно ее недостаточная чистота, сильные белковые примеси.

А вот для РНК эти сольватные дела вроде бы особой роли не играют, и ее надежнее всего держать как раз на -70. Если при выделении или потом при работе РНКаз в нее не затащили, то даже без ингибиторов РНКаз такая РНК тоже может годами жить.

На +4 геномку в принципе можно без особого ущерба держать неделю-другую, а то и месяц, - но это все же вариант не для длительного хранения, не на годы. Точно не знаю, лично не проверял, но думаю, за пол-года - год на +4 ДНК в значительной мере развалится, так что лучше все же убирать на -20.

Сообщение было отредактировано akatar - 28.04.2010 11:19

Всего благодарностей: 4Поблагодарили (4): Alex2006, arabidopsis, Daemonarchestratygos, NMR-guy
Участник оффлайн! campus
Участник
Иркутск



 прочитанное сообщение 28.04.2010 03:12     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

Я понимаю, что тут разговор про ДНК, но все же... хранил РНК под СПИРТОМ с AcNa при -80 в течении 3 лет. Получал нормальные РТ-ПЦР продукты. Не говорю, что это панацея, но работает yes.gif
Участник оффлайн! akatar




 прочитанное сообщение 28.04.2010 11:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

РНК - можно, и под спиртом, и на -80. Она все-таки и одноцепочечная, и не очень длинная, и нет такого гидрофобного кора, как в дуплексной ДНК; и вообще, даже при сильных белковых примесях, образование таких непробиваемых осадков, как в ДНК, для РНК нехарактерно. Единственное неудобство - если она вдруг понадобится, придется растворять, перемерять концентрацию. А потом как - для дальнейшего хранения опять под спирт высаживать? А зачем, если она и в воде при -70 те же 3-5 лет спокойно живет?

А вот ДНК, даже одноцепочечную, типа праймеров, так хранить не стоит. Особенно под спиртом. Особенно геномку - длинную, двуцепочечную, и, при нынешних быстрых колоночных методах выделения, - зачастую с мощными белковыми примесями.

Сообщение было отредактировано akatar - 28.04.2010 11:16

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): NMR-guy
Участник оффлайн! arabidopsis
Участник



 прочитанное сообщение 28.04.2010 12:03     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

(Guest @ 22.04.2010 10:17)
Ссылка на исходное сообщение  Как долго хранится ДНК в ТЕ. И как лучше хранить при -20 или при -80?


Думаю, пару тысяч лет в замерзшем состоянии пролежит wink.gif А на какой температуре из этих - без разницы.

Сообщение было отредактировано arabidopsis - 28.04.2010 12:03
Участник оффлайн! arabidopsis
Участник



 прочитанное сообщение 28.04.2010 12:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

(Лошарик @ 22.04.2010 16:46)
Ссылка на исходное сообщение  Говорят, до месяца при -20С (практически выходит дольше), до года при - 70С (не пробовали, но тоже говорят, что дольше может протянуть).


Я не знаю что там говорят, но пользуюсь в работе образцами с геномки, которым уже не менее 6 лет. В воде. И ничего с ними не происходит.
Участник оффлайн! arabidopsis
Участник



 прочитанное сообщение 28.04.2010 12:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

(RJ Dio @ 23.04.2010 08:34)
Ссылка на исходное сообщение  стоп-стоп-стоп. Если геномка, замораживать ни в коем случае нельзя!


Скажите это мамонтам wink.gif Конечно особо длинных кусков там не останется, но чаще всего они и не шибко нужны. Касаемо же выпадения в осадок - не храните очень концентрированные растворы и будет вам счастье.

Сообщение было отредактировано arabidopsis - 28.04.2010 12:08
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 28.04.2010 12:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

я вам про корректные разведения. а вы про сохранность. Еще раз повторяю- геномка не замораживается, и если выделена чисто, нихрена ей не сделается. Конечно, если вам надо ПЦр с нее типа есть/нет, то можно и заморозить. а если что поумнее сделать- не надо
Участник оффлайн! klav
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 28.04.2010 18:22     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

Лично мой опыт:
выделяю геномку бактерий SDS лизисом, затем фенолом.
Финально растворяю примерно 5 мкг ДНК/мкл в воде. Такой препарат при хранении на -20С через полгода заметно деградирует, а через год там почти ничего нет.
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 28.04.2010 18:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

грязь
Участник оффлайн! Statin
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 28.04.2010 20:28     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

Согласен с akatar ДНК под спиртом это жесть, и при хранении ДНК под спиртом н, уже через полгода хранения 90% ДНК гикается, растворить ее уже практически не возможно (личный печальный опыт принятия банка ДНК ).
медуза
IP-штамп: fr32TkPWTePOw
гость



 прочитанное сообщение 12.05.2010 10:53     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

а как долго хранится тотал РНК в воде? по методике РНК выделенную разводят в конце водой и хранят на -80 или -20. срок не указан.
нашим РНК уже год.
сделали электрофорез - ни..че..го.. а год назад было. могла ли она разложиться? хранили на -80*С.
Guest
IP-штамп: frxGOYQklo76Y
гость



 прочитанное сообщение 30.06.2015 10:39     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

3 месяца хранения ДНК длиной 1500 по, в воде при -20, у меня привело к тому что сиквенсы не пошли. А на форезе четкие полоски, после денатурации при +95 в течении 5 минут и быстрого охлаждения во льду, на форезе мазня... для контроля брал свежую ДНК такой же длины, она сохранила яркое свечение, не развалилась, но осталась в лунке (не разогналась форезом)
Участник оффлайн! afanasev-max
Постоянный участник
Irkutsk-Moscow-Irkutsk



 прочитанное сообщение 01.07.2015 10:23     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

препарат нечистый, похоже.
депуринизация оснований, вот и валится все после нагрева.
ЗЫ: а вообще, нифига тему подняли! с 10 года
Участник оффлайн! DK.
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 29.12.2016 08:24     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

А что о криопротекторах при хранениии кДНК? В одной из "знакомых лабораторий" хранят с добавлением DMSO до 5%, якобы защищает при циклах замораживания-оттаивания. Были ли какие-либо работы с криопротекцией? - добавки, не мешающие ПЦР.
Участник оффлайн! RNK
Постоянный участник
СССР



 прочитанное сообщение 30.12.2016 16:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

хранить ДНК в присутствии 5% DMSO, можно, и в присутствии спирта, и ПЦР это не мешает
Но лучше в 1хТЕ хранить, в буфере.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): DK.
Участник оффлайн! DK.
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 02.01.2017 20:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

А что, буфер тоже предотвращает "неприятности" при многочисленных замораживаниях-оттаиваниях? Мне это недавно пришлось ощутить "на собственной шкуре" - после шести замораживаний-оттаиваний кДНК оказалось, что детектируемая экспрессия некоторых белков снизилась почти вдвое frown.gif . Остается аликвотить -но объемы микроскопические!

А с криопротекцией есть такие любопытные статьи (правда, для ДНК, а не кДНК ):
Röder B, Frühwirth K, Vogl C, Wagner M, Rossmanith P. Impact of long-term storage on stability of standard DNA for nucleic acid-based methods. J Clin Microbiol. 2010; 48(11):4260-4262.

Schaudien D, Baumgärtner W, Herden C. High preservation of DNA standards diluted in 50 % glycerol. Diag Mol Pathol. 2007:16(3):153-157
Участник оффлайн! Carbon Copy
Постоянный участник
So close no matter how far



 прочитанное сообщение 03.01.2017 23:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

Меня вот другой вопрос интересует, насколько стабильны ДНК и РНК в лизирующем буфере (4М гуанидин тиоцианат)? Скажем, если начать процесс экстрации нулеиновых кислот, но не закончить? Можно ли хранить ДНК в лизирующем буфере при комнатной температуре?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 04.01.2017 13:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #37 множественное цитирование

(DK. @ 29.12.2016 09:24)
Ссылка на исходное сообщение  А что о криопротекторах при хранениии кДНК? В одной из "знакомых лабораторий" хранят  с добавлением DMSO до 5%, якобы защищает при циклах  замораживания-оттаивания. Были ли какие-либо работы с криопротекцией? - добавки, не мешающие ПЦР.


ДМСО и глицерин - да помогут - это очевидно и не требует специальных доказательств. Но глицерин именно в этом приложении, почему-то нравится больше. Будем считать, что это на интуитивном уровне. Не требует объяснений и то, что чем чище реагент, тем лучше.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): DK.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 04.01.2017 13:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #38 множественное цитирование

(Carbon Copy @ 04.01.2017 00:43)
  Меня вот другой вопрос интересует, насколько стабильны ДНК и РНК в лизирующем буфере (4М гуанидин тиоцианат)? Скажем, если начать процесс экстрации нулеиновых кислот, но не закончить? Можно ли хранить ДНК в лизирующем буфере при комнатной температуре?

В общем не рекомендую. Денек другой - почти незаметно, неделя - уже плохо, месяц - совсем плохо. При чем в гидрохлориде сохранность лучше чем в тиоцианате.

Сообщение было отредактировано avor - 07.01.2017 16:11

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): DK., avor
Участник оффлайн! Carbon Copy
Постоянный участник
So close no matter how far



 прочитанное сообщение 04.01.2017 21:31     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #39 множественное цитирование

(MMM @ 04.01.2017 11:50)
Ссылка на исходное сообщение  В общем не рекомендую. Денек другой - почти незаметно, неделя - уже плохо, месяц - совсем плохо. При чем в гидрохлориде сохранность лучше чем в тиоцианате.

Это Вы сами такие эксперементы устраивали? Интересно, с какой целью? В смысле, кому такая лабуда могла ещё в голову прийти.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): DK.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 04.01.2017 23:25     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #40 множественное цитирование

Перевозка и хранение полевого материала
Участник оффлайн! DK.
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.01.2017 13:22     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #41 множественное цитирование

Коллеги, подскажите, пожалуйста, как убрать "неуместную благодарность" - оно, конечно, лишнее спасибо никогда не помешает, но в этом топике я собирался поблагодарить МММ за комментарий о криопротекторах, а в результате рассыпался в "многочисленных благодарностях"... confused.gif

Сообщение было отредактировано DK. - 07.01.2017 13:23
Участник оффлайн! R.J.Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.01.2017 16:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #42 множественное цитирование

экономней надо быть. С Вас пол-литра
Участник оффлайн! avor
moderator



 прочитанное сообщение 07.01.2017 16:20     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #43 множественное цитирование

(DK. @ 07.01.2017 11:22)
Ссылка на исходное сообщение  Коллеги, подскажите, пожалуйста, как убрать "неуместную благодарность" - оно, конечно, лишнее спасибо никогда не помешает. confused.gif



Вроде никак. У меня не получается

Вот из хелпа:
Поблагодарить дважды нельзя. Отменить свою благодарность — тоже.
Участник оффлайн! DK.
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.01.2017 21:22     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #44 множественное цитирование

(R.J.Dio @ 07.01.2017 15:08)
Ссылка на исходное сообщение  экономней надо быть. С Вас пол-литра
- можно "спасибами" smile.gif .
Участник оффлайн! sunword




 прочитанное сообщение 27.01.2018 15:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #45 множественное цитирование

А долго ли хранится лиофилизированная ДНК? Например, выделенная фенол-хлороформным методом и оставленная без добавления воды/TE на последнем этапе. И как её хранить? При -20 или при комнатной температуре?

Сообщение было отредактировано sunword - 27.01.2018 15:32
Участник оффлайн! dk
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 28.01.2018 18:48     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #46 множественное цитирование

Именно "лиофилизированная" - прям вот вымораживание под вакуумом? Вот затейники-то какие пошли, однако.
А вообще кристаллическая ДНК хорошо хранится, но всёж потихоньку окисляется (орг.хим). Можете осадок залить спиртом - вот это уже "на века". Правда, потом большая проблема её растворить. Хранить лучше в холодильнике (физ-кол хим).

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): sunword
Участник оффлайн! sunword




 прочитанное сообщение 29.01.2018 06:21     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #47 множественное цитирование

dk, пардон "высушенная". Короче, этот осадок после месяца нахождения в холодильнике уже не даёт плюсы при проверке по 16S праймерам, хотя после выделения (отобранная толика, также доведённая до осадка и растворённая в mQ) давала плюсы.
Участник оффлайн! dk
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 29.01.2018 09:39     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #48 множественное цитирование

Обычно с кристаллической ДНКой основная проблема - её растворить. У Вас это нормально вышло? Но вот если ДНК деградировала при хранении - то уже ничего не поможет, при этом и концентрацию на НаноДропе каком-нибудь будет показывать (что и понятно). Попробуйте проверить растворение Ваших проб ("поиграйте" с буферами разной ионной силы) и проверьте конц. матрицы в ПЦР. Но вообще выделение ф-х даёт очень чистый продукт, жаль его будет потерять.
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 29.01.2018 22:30     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #49 множественное цитирование

(sunword @ 27.01.2018 16:30)
Ссылка на исходное сообщение  А долго ли хранится лиофилизированная ДНК? Например, выделенная фенол-хлороформным методом и оставленная без добавления воды/TE на последнем этапе. И как её хранить? При -20 или при комнатной температуре?

Хранится десятки лет при комн. температуре.
http://www.biomatrica.com/
Участник оффлайн! Alex7777




 прочитанное сообщение 06.02.2018 00:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #50 множественное цитирование

Как обмануть тест днк,при заборе слюны !? Есть какие мысли ?

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 10:57
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft