Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Иммуногистохимия -- Помогите с выбором методики. --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! AlexBulldozer
Участник



 прочитанное сообщение 14.10.2012 17:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Здравствуйте, заранее извиняюсь ,если мой вопрос покажется совсем глупым, но я полный ноль в иммуногистохимии,а спросить не у кого.
Мне нужно поставить следующий эксперимент: мышам будут подсажены биоимпланты и надо будет потом определить интенсивность ангио ,остео, и хондрогенеза в местах посадки имплантов.Срезы будут парафиновые,по стандартной гистологической проводке. Понадобятся антитела на остеопонтин,остеокальцин,остенектин,коллаген 2,CD105.
Собственно вопросы такие - можно ли обойтись тут только первыми антителами или лучше делать первые и вторые для усиления для усиления сигнала(неизвестно, много ли будет искомых белков после окончания эксперимента)
И - не могли бы подсказать фирмы производители антител,где можно найти иммуногистохимические антитела на мышиный остеопонтин, остеонектин, остекальцин, CD105, коллаген 2.
Из тех фирм,что я посмотрел (Novacastra, Chemicon, sigma,Becton Dickinson) я не нашел нужные антитела. Только в chemicon смог найти антитела на мышиный остеопонтин.
guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость



 прочитанное сообщение 15.10.2012 07:16     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

--будут подсажены биоимпланты.

Это что такое? Стволовые клетки читоли?

--Понадобятся антитела на остеопонтин,остеокальцин,остенектин,коллаген 2,CD105.

Вы их собираетесь на одном срезе одновременно красить? Если да, то понадобится очень много умения и очень хороший флуоресцентный микроскоп(если метка флуоресцентная) с хорошим софтом. Обычно(на рутинном оборудовании с рутинными метками) больше трех цветов (синий зеленый красный(ну еще можно попытать инфракрасный)) не увидеть. На ферментной метке я вообще очень слабо представляю как это можно сделать.

--Собственно вопросы такие - можно ли обойтись тут только первыми антителами или лучше делать первые и вторые для усиления для усиления сигнала(неизвестно, много ли будет искомых белков после окончания эксперимента).

От того что вы примените вторые антитела сигнал не усилится. Коммерческие антитела никогда не содержат метки, если это не специальные готовые наборы для определенных исследований, так что вам по любому придется использовать непрямой метод(вторые антитела). И тут опять возникает вопрос о там, как красить одновременно несколько антигенов на одном срезе, в этом случае первичные антитела должны принадлежать разным животным, иначе неизбежна перекрестная реакция вторичных антител. Или придется вводить метку в первичные антитела. Это можно сделать самостоятельно или попросить фирму изготовителя, но тогда цена(возрастет очень существенно) и время исполнения заказа увеличится.--

--И - не могли бы подсказать фирмы производители антител,где можно найти иммуногистохимические антитела на мышиный остеопонтин, остеонектин, остекальцин, CD105, коллаген 2.

Есть такой сайтик:

www.biocompare.com

поищите там. Навязшие в зубах конторы: Абкам, санта круз, cell signaling.

Если поиски будут безуспешны. То тогда надо искать по статьям в pubmed, смотреть какие антитела используют авторы.

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): Агроном, AlexBulldozer
Участник оффлайн! AlexBulldozer
Участник



 прочитанное сообщение 15.10.2012 17:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Спасибо за ответ,ммм

"Это что такое? Стволовые клетки читоли?"
Пока что не определился, это будут либо тканеинженерные конструкции- матрикс с клетками, или просто один матрикс. Из чего именно он будет сделан - не знаю так как его делать не я буду.

"Вы их собираетесь на одном срезе одновременно красить?"
Отдельно остеогенез(Остеопонтин,нектин и кальцин),отдельно хондрогенез(Еще не определился какие белки буду смотреть) и отдельно ангиогенез(CD105).
Разумеется более трех меток на одном препарате смотреть не намерен.
Участник оффлайн! LabRabbit




 прочитанное сообщение 22.10.2012 16:03     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

сразу предупреждаю, я каталоги не смотрела. но я бы поискала следующее: первичные анти-маус антитела к вашим маркерам (коза, кролик или крыса, обычно). первичные антитела не крашеные всегда. а к ним-вторичные (антикролик или другие), но не с обычными флуорофорами, а с квантовыми точками. эти точки светятся так, что вы и самый минимум их увидитеjump.gif . я сама занимаюсь наночастицами, своими глазами видела, ФИТЦ и прочие краски уважать перестала-выгорают, трудно найти и т.д. и т.п. можно красить все виды антител на одном препарате.
в остальном-стандартная методика. если что-пишите в личку.
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 22.10.2012 16:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

(LabRabbit @ 22.10.2012 16:03)
Ссылка на исходное сообщение  сразу предупреждаю, я каталоги не смотрела. но я бы поискала следующее: первичные анти-маус антитела к вашим маркерам (коза, кролик или крыса, обычно). первичные антитела не крашеные всегда. а к ним-вторичные (антикролик или другие), но не с обычными флуорофорами, а с квантовыми точками. эти точки светятся так, что вы и самый минимум их увидитеjump.gif . я сама занимаюсь наночастицами, своими глазами видела, ФИТЦ и прочие краски уважать перестала-выгорают, трудно найти и т.д. и т.п. можно красить все виды антител на одном препарате.
в остальном-стандартная методика. если что-пишите в личку.

"я сама занимаюсь наночастицами" © smile.gif))))))))))
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  08.12.2021 16:41     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

https://www.uptrennd.com/post-detail/hints-...-watch~ODY3MDU2
https://anotepad.com/note/read/mqg8p5jm
https://www.crokes.com/replicarolexwatches/profile/
https://ko-fi.com/post/Watches-Shopping-Gui...-Watc-E1E13PZV9
https://www.merchantcircle.com/blogs/replic...x-Watch/1966540
https://www.nairaland.com/6427528/watches-s...de-finding-fake
https://www.vingle.net/posts/3587193
https://fortunetelleroracle.com/sport/replica-watches-280478
https://www.goodreads.com/story/show/132736...ake-rolex-watch
https://www.diigo.com/item/note/85twz/phwr?...2395edb2dac07ea
https://github.com/ReplicawatchesUK/Replica...ake-Rolex-Watch
https://www.reddit.com/user/Bestreplicawatc...ke_rolex_watch/
https://slashdot.org/submission/13306958/wa...ake-rolex-watch
https://www.wattpad.com/1030107359-replica-...guide-finding-a
https://www.instructables.com/member/Fakero...licPreview=true

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 18.04.24 18:43
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft