Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Рони |
|
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
А главное не ясны мотивы такой схемы, ведь можно сенсибилизировать планшет антигеном. |
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
|
Рони |
|
Рони |
|
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
ЛПС слишком малоизбирательный антиген. И вообще на поверхности клетки обычно столько всего , что антитела к чему нибудь из этого поверхностного набора могут оказаться в сыворотке здорового человека без всяких контактов с возбудителем. Так что велик риск ложноположительных результатов. В любом случае для начала надо изучить какие антитела и какому антигену возбудителя будут однозначно указывать на заболевание и лучше использовать именно этот антиген, а не клетку целиком. Клетку конечно можно попытаться как-то иммобилизовать на планшете химически, а не с помощью сыворотки больного, а потом уже наносить сыворотку больного, но велик риск ложно положительных результатов. Что касается антител к возбудителю то это неплохая вещь для выявления самого возбудителя. Те в посевах и на в зараженных объектах и жидкостях и продуктах. |
Guest IP-штамп: frZJqNZ2eowqQ гость |
|
Guest IP-штамп: frZJqNZ2eowqQ гость |
|
vb Постоянный участник |
(Рони @ 16.02.2013 15:40) антиген-цельные клетки, а цель-создание конюгата пероксидазного на основе МКА мыши к возбудителю (допустим иерсиний), который будет выявлять антитела к этому возбудителю в сыворотке больного человека. конюгата пероксидазного на основе МКА мыши к возбудителю (допустим иерсиний), который будет выявлять антитела понимаете, вот тут у вас, как сказал бы папа карло, институциональное противоречие. а попросту неувязочка. коньюгат к возбудителю не может одновременно выявлять антитела. вы разберитесь сначала с вариантом ифа: сендвич, кто к кому антитела и т.д. если нужно выявлять антитела человека к возбудителю, то конбюгат у вас должен быть против антител человека G там или M. даже A, если хотите... |
птаха Постоянный участник |
если все это затевается науки для то чувствительность и специфичность такой извращенной системы, наверное, можно повысить если сорбировать на планшет не сыворотку, а очищенный IgG, а потом сразу наносить очищенный специфичный для возбудителя АГ (о чем говорил МММ) с пришитой пероксидазой. Получится одностадийный метод для выявления спец. антител. Никакого коммерческого применения такая система понятное дело не найдет, но желание руководства Вы осуществите |
vb Постоянный участник |
на планшет садится антитело против человеческих антител. потом проба сыворотки. потом смесь антигена и коньюгата против этого антигена. Сообщение было отредактировано vb - 17.02.2013 19:16 |
птаха Постоянный участник |
сперва моноклон против Ig а не коньюгат Сообщение было отредактировано птаха - 17.02.2013 18:57 |
птаха Постоянный участник |
если подмодифицировать систему предложенную афтором на манер векторовской может и сгодится, напр., для выявления ранних АТ Сообщение было отредактировано птаха - 17.02.2013 18:58 |
vb Постоянный участник |
(птаха @ 17.02.2013 16:50) ну да. оговорился. |
Guest IP-штамп: frGqyYT8IU7LU гость |
|
guest: рони IP-штамп: fr3LHlkQhhb4w гость |
|
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
|
guest: Alex76 IP-штамп: friCJHCWFt1UU гость |
|
птаха Постоянный участник |
КЭП |
бутанол Постоянный участник Новосибирск |
Из плюсов -клетка большая и антигена на ней много а чтобы связаться с плашкой ей может хватить небольшого процента комплексов типа антиген-антитело т.е. можно получить усиление сигнала довольно значительное, но нелинейное. Второй плюс, можно развлекаться с конкурентным ингибированием и оценкой гетерогенности специфических антител в сыворотке больного относительно моноклональных антител. Из минусов - ложноположительные результаты, значит лучше чтобы конкурентное ингибирование было а тогда клетку вы можете на плашку цеплять за любой антиген. Может тогда уж влияние антител на метаболическую активность клетки? |
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
|
бутанол Постоянный участник Новосибирск |
|
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
|
Panaev Постоянный участник |
|
nigoal123 IP-штамп: fr/1ZkUsuBQOE гость |
it sets the tone for |
nigoal123 IP-штамп: frpXPq5TOmUHs гость |
They are writing their |
guest: 123 IP-штамп: frJhOCvSv9ICE гость |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |