Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
konyshevil Nighny Novgorod |
Хотелось бы попросить о помощи тех из вас, кто близок к клеточным технелогиям или в той или иной мере занимался выделением макрофагов. В качестве тренировочного пункта нами были выбраны перитонеальные макрофаги, которые мы получали из мышей следующим образом: 1. Как обычно, вскрывали мышь, вымывали р-ром Хенкса с гепарином (5 МЕ/мл) клетки, получали мутноватый раствор. 2. Центрифугировали клетки при 15000 об/мин, 10 мин. При этом ФОРМИРОВАЛСЯ ВОЛОКНИСТО-БЕЛЫЙ ОСАДОК, который удавалось осадить только при 3000 об/мин. При суспендировании он плохо разбивался, и нити остались в растворе, так что посчитать клетки в камере Горяева оказалось весьма затруднительно. Пожалуйста, если кто-то сталкивался с подобными затруднениями или может помочь нам, откликнитесь. Мой вопрос: как осадить макрофаги и предотвратить образование сгустка?\ Спасибо. |
Агроном Постоянный участник |
Центрифугировали клетки при 15000 об/мин, 10 мин не, ну это чересчур. Для макрофагов хватит 400g c избытком. Хенкс без кальция и магния? Мне кажется, что белые нити это таки фибрин у вас выпал. |
Pharmaсol Постоянный участник |
(Агроном @ 26.10.2012 13:31) не, ну это чересчур. Для макрофагов хватит 400g c избытком. Хенкс без кальция и магния? Мне кажется, что белые нити это таки фибрин у вас выпал. +1 |
konyshevil Nighny Novgorod |
Да, Хенкс без кальция и магния. Этот фактор влияет на полимеризацию фибрина? |
Guest IP-штамп: frkQdfaj18oXA гость |
|
Guest IP-штамп: fr8IKppqjEx.k гость |
Кроме того, неудовлетворительно краятся клетки и Гимзой: ядра ярко-малиновые, а цитоплазма вовсе не визуализируется. Может, работали Вы когда0нибудь с окраской таких препаратов? Нет ли другого метода окраски? |
bioasg |
|
bioasg |
|
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |