molbiol.ru -> Иммуноблот в биоптате ткани

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* Иммуноблот в биоптате ткани -- помогите разобраться --

Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

NastyaRy
Постоянный участник

24.09.2013 09:14

URL #1

Доброго времени суток!

У нас стоит задача: с одного материала (лёгкие морских свинок) сделать гистологию с различными окрасками и еще методом иммуноблота померить конкретный белок (тяжелую цепь миозина). В связи с этим возникают вопросы:
1) По статьям гистологию необходимо делать как в левом, так и в правом лёгком. Иммуноблот, наверное, тоже. Как в таких случаях разделяют ткань, чтобы без отражения на качестве можно было использовать оба метода оценки в одном материале?
2) В статьях написано, что биоптат ткани замораживают в жидком азоте. Как они это делают? Биоптат кладут в криопробирку и погружают в азот или кусок ткани опускают пинцетом в азот, а затем кладут в эппендорф?
3) Какое соотношение лизирующего буфера и фрагмента ткани оптимально выбрать для лизиса и получения гомогената? Состав лиз. буфера в статьях приведен, а вот соотношение его к ткани – нет (Lung homogenates were prepared by pulverizing tissue under liquid nitrogen and subsequent
sonification in homogenization buffer (composition in mM: Tris.HCl 20.0, dithiothreitol
(DTT) 0.1, phenyl methyl sulphonyl fluoride (PMSF) 0.2; pH 7.5, supplemented with 2
μg/ml leupeptin, 2 mg/ml aprotinin and 10 μg/ml soybean trypsin inhibitor)).

Заранее благодарю за ответ!

guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость

24.09.2013 12:20

URL #2

Берете ткань одну часть сэмпл буфер для фореза по Лэмли и кипятить, можно перед эти потереть пестиком для эппика. Другую часть зафиксировать по протоколу для гистологии. Кипяченую пробу можно хранить на -20 несколько месяцев,если в буфер добавить ЭДТА и все указанные вами ингибиторы протеаз, то наверное и год, а на -80 несколько лет. Что касается количества буфера на ткань, то оно колеблется от 1:2 до 1:10 в зависимости от экстрагируемости целевого компонента и его количества в пробе.

watchesbiz
Постоянный участник

06.12.2021 15:59

URL #3

http://replicarolexwatches.simpsite.nl/
https://www.smore.com/rj7kh-best-replica-watches
https://www.athleticsnation.com/users/Replicarolexwatches
https://pastebin.pl/view/ab0e458a
https://mix.com/watcheshutukcom
https://www.woddal.com/post/359216_tiny-acc...nybody-039.html
https://share.naturalnews.com/posts/3904099
https://demo.wowonder.com/post/214429_the-i...-producers.html
https://rapichat.com/post/5369_our-purpose-...ible-there.html
https://dashburst.com/replicarolexwatches/1
https://sway.office.com/KifcQvn36MK821G8
https://flipboard.com/@replicarolex24
https://getpocket.com/redirect?url=https%3A...eshut.uk.com%2F
https://www.openstreetmap.org/user/Hints%20...20Rolex%20Watch

nigoal123
IP-штамп: frXqkB4MpP2jQ
гость

25.05.2022 08:34

URL #4

Not only do we put nigoal students under pressure ลิงค์รับทรัพย์ to master the inconsistent sexy gaming spelling patterns and complex สล็อต grammar of the English language ka gaming but we require them to know

The best way to help our 123goal students to overcome the 11hilo challenge of writing in any 123bets want to read it. pggame123 genre is to help them to break big gaming things down into their component

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.