Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Проблеммы в выделении плазмидной ДНК
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! VOS
Участник
Кольцово



 прочитанное сообщение 09.08.2002 12:45     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Столкнулась с выделением плазмидной ДНК из Atromonas. ДНК плохо выглядит на агарозе, ее мало, при рестрикции полный развал.
confused.gif
Участник оффлайн! K-2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2002 13:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

А как выделяли?
Участник оффлайн! tupoi
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2002 14:07     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

А какого размера плазмидная ДНК? А геном Atromonas?
Участник оффлайн! Tom
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2002 22:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Дык я думау что это не pUC какaя-нибудь с чего решили что плазмиды будет много?? Бторое каким ферментом пытались резать.
[Текст переведён с транслита]
Участник оффлайн! VOS
Участник
Кольцово



 прочитанное сообщение 10.08.2002 07:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Выделяла обычным щелочным, набором "Медиген", методом Кадо (тоже с щелочью, но более жесткие условия), фенолила, вместе с хромосомной пыталась.
Плазмида не родная, высококопийная, производная pVAX, размер где-то 5500. Я проводила коньюгацию с E.coli (трансформация и электропорация не идет у этой Aeromonas). Устойчивость к антибиотику у Aeromonas появилась после этого. На агарозе плазмиду вижу (вид ужасный), движется в районе моей плазмиды из E.coli (сложно точно оценить по такой ужасной ДНК).
Рестрикцию проводила разными ферментами (например EcoRI, HindIII, BstEII, PvuII). Пыталась снижать температуру, время рестрикции, все равно ДНК валится.
Участник оффлайн! Ivolga
Постоянный участник
HK



 прочитанное сообщение 11.08.2002 08:24     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Оль, я так поняла, что это ты. Давай попробуем на колонке с цезием, нарасти побольше, сначала грубое выделение щелочью, а потом с цезием. Еще лучше было бы на ультрацентрифуге, но мороки с ее запуском много слишком. А вот если и после развал будет...
Ребята, кто знающий может быть у этой подлой бактерии замена тимидина на урацил? У E.coli есть такие генинженерные штаммы для удобства сайтспецифического мутагенеза. ДНК у них получается очень хрупкой, валиться от одного взгляда. Может и тут чегой-то подобное?
Участник оффлайн! VOS
Участник
Кольцово



 прочитанное сообщение 12.08.2002 05:41     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

[ 21-08-2002: Сообщение отредактировано: VOS ]
Участник оффлайн! VOS
Участник
Кольцово



 прочитанное сообщение 21.08.2002 06:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Народ!!!
Больше никто не желает высказаться?
Участник оффлайн! avor
moderator



 прочитанное сообщение 21.08.2002 10:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Могу предложить отказаться от фенола и цезий с ултрафугой.
Участник оффлайн! VOS
Участник
Кольцово



 прочитанное сообщение 21.08.2002 12:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

Да, ультра - это хорошо. Но в нашем НИИ ее уже несколько лет ее не включали. И вид у нее не внушает доверия. Она мне еще и для других целей нужна, так, что пока терплю...
Сейчас у меня еще проблема возникла. После отпуска плазмиды моей многострадальной ВООБЩЕ не видно. Я понимаю, что она либо вылетает, либо,скорее всего, становится малокопийной, т.к. устойчивость бактерий к антибиотику осталась.
В идеале надо бы вставлять мой ген в родную для Aeromonas плазмиду. Но совсем без информации о ней....????
Участник оффлайн! f1dark
Постоянный участник
Lahore, Punjab, Pakistan



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  01.10.2022 14:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

F1 Removal is a well known movers and packers company all over the UK. We have been working since 1980 providing professional moving services according to the need of the customers. We have highly trained staff for all sort of moving services during relocation.

Removals Company | Removals Company in London | Office Removal in London | Office Removals London | Relocation Companies London | Removals Company in London | Moving Company in London | Moving Company | Movers in London | Man and Van in London | House Removals in London | House Removals | Packers and movers in London | Packers and movers London | Movers and Packers in London | Relocation Company in London | Commercial Removals | Local Movers | Long Distance Mover | Long Distance Movers | Long Distance Moving Company | renovations | london renovations | renovation companies in london | renovations company london | house renovation in london | Kitchen renovation london | Kitchen fitting london | Kitchen fitters in London | bathroom renovations london | painters and decorators in london | painting and decorating in london | painters in london | london decorators | vinyl tile flooring | vinyl flooring | laminate flooring | parquet flooring | wood flooring | parquet flooring london | luxury vinyl flooring | lvt flooring | wood flooring london | karndean flooring | herringbone flooring | laminate flooring london | amtico flooring | bathroom floor tiling | bathroom tiling | kitchen tiling | floor tiling | porcelain tiling | terrazzo tiling | painting and decorating leicester | painter and decorator ealing | painting and decorating brighton | local decorators

confused.gif rolleyes.gif frown.gif

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.04.24 21:48
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft