Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
VOS Участник Кольцово |
|
K-2 Постоянный участник |
|
tupoi Постоянный участник |
|
Tom Участник |
[Текст переведён с транслита] |
VOS Участник Кольцово |
Плазмида не родная, высококопийная, производная pVAX, размер где-то 5500. Я проводила коньюгацию с E.coli (трансформация и электропорация не идет у этой Aeromonas). Устойчивость к антибиотику у Aeromonas появилась после этого. На агарозе плазмиду вижу (вид ужасный), движется в районе моей плазмиды из E.coli (сложно точно оценить по такой ужасной ДНК). Рестрикцию проводила разными ферментами (например EcoRI, HindIII, BstEII, PvuII). Пыталась снижать температуру, время рестрикции, все равно ДНК валится. |
Ivolga Постоянный участник HK |
Ребята, кто знающий может быть у этой подлой бактерии замена тимидина на урацил? У E.coli есть такие генинженерные штаммы для удобства сайтспецифического мутагенеза. ДНК у них получается очень хрупкой, валиться от одного взгляда. Может и тут чегой-то подобное? |
VOS Участник Кольцово |
|
VOS Участник Кольцово |
Больше никто не желает высказаться? |
avor moderator |
|
VOS Участник Кольцово |
Сейчас у меня еще проблема возникла. После отпуска плазмиды моей многострадальной ВООБЩЕ не видно. Я понимаю, что она либо вылетает, либо,скорее всего, становится малокопийной, т.к. устойчивость бактерий к антибиотику осталась. В идеале надо бы вставлять мой ген в родную для Aeromonas плазмиду. Но совсем без информации о ней....???? |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |