Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Агроном Постоянный участник |
|
Cathie22 Постоянный участник |
|
Агроном Постоянный участник |
(Cathie22 @ 03.07.2012 11:34) Ну без фермента если. А если без олигонуклеотидных компонентов, то она, наверное, и на +4 нормально похранится. Ну, в том и вопрос - можно ли полную смесь. Ферменты (полимераза и ревертаза) по рекомендации производителя набора хранятся в замороженном виде. И еще добавлю - полимераза инактивированная (для хот-старта). Сообщение было отредактировано Агроном - 03.07.2012 10:59 |
Cathie22 Постоянный участник |
|
vtosha Постоянный участник |
По-моему, сейчас такие ферменты дубовые, тем более для ПЦР, что они вполне могут и на +4 долго жить. |
RNK Постоянный участник СССР |
|
Агроном Постоянный участник |
|
Lesha Постоянный участник |
|
RNK Постоянный участник СССР |
DMSO не мешает при ПЦР, снижает только Тм отжига на несколько градусов, но можно оставить условия реакции как есть. Сообщение было отредактировано RNK - 03.07.2012 17:38 |
xenopus Постоянный участник Moscow |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
|
IMK Участник |
(RNK @ 03.07.2012 21:30) DMSO не мешает при ПЦР, снижает только Тм отжига на несколько градусов, но можно оставить условия реакции как есть. я бы не делал таких решительных заявлений... |
Агроном Постоянный участник |
|
hathkul Участник |
|
Агроном Постоянный участник |
|
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(Агроном @ 23.10.2012 09:37) Решил написать - может кому интересно. Вчера провел ПЦР с замороженными аликвотами полной ПЦР-смеси (заморожены в начале июля, при -25) коммерческого набора на гепатит С. По контролям и просто по образцам все прошло хорошо, изменений относительно свежей смеси не заметил. а почему контроля хранения при комнатной температуре нет ? лето вроде не жаркое |
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(Агроном @ 23.10.2012 09:37) Решил написать - может кому интересно. Вчера провел ПЦР с замороженными аликвотами полной ПЦР-смеси (заморожены в начале июля, при -25) коммерческого набора на гепатит С. По контролям и просто по образцам все прошло хорошо, изменений относительно свежей смеси не заметил. "коммерческого набора на гепатит Ц" © - очень интересно про "коммерческий набор" |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Агроном @ 23.10.2012 10:37) Решил написать - может кому интересно. Вчера провел ПЦР с замороженными аликвотами полной ПЦР-смеси (заморожены в начале июля, при -25) коммерческого набора на гепатит С. По контролям и просто по образцам все прошло хорошо, изменений относительно свежей смеси не заметил. Значит, в контролях Ревертазы и РНК не было... Все самое интересное начинается, когда ПРОЦЕСС повторяется многократно, а не от однократного замораживания на жаркий период года. |
Агроном Постоянный участник |
Чего интересно про набор?) Хотите узнать фирму - сообщайте в личку, публичной рекламой заниматься не намерен. Поясняю вкратце состав того, что было заморожено: нуклеотидтрифосфаты+магний+праймеры+TaqMan зонды+ полимераза+ревертаза+вода. При постановке реакции использовались РНКовые контроли. Ессно замораживал я это именно с целью чтобы не размораживая остальные пробирки брать из холодильника готовые и с ними работать) Сообщение было отредактировано Агроном - 23.10.2012 11:41 |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Еще пару раз заморозите - ревертазе кирдык А РНК контроли в виде РНК-транскриптов или "армированной РНК" действительно хорашо защищены от РНК-аз, но не от замораживания-размораживания. |
Агроном Постоянный участник |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Агроном @ 23.10.2012 13:02) Да не хочу я их перезамораживать)))) я их с той целью и разаликвотил, чтобы весь набор из за моих низменных потребностей провести анализ парочки образцов не тягать из морозилки на стол и обратно. Вы меня огорчили... |
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(Агроном @ 23.10.2012 11:36) Если интересует - делайте хоть контроль хранения в автоклаве при 120 градусах - у меня чисто практический интерес. Чего интересно про набор?) Хотите узнать фирму - сообщайте в личку, публичной рекламой заниматься не намерен. Поясняю вкратце состав того, что было заморожено: нуклеотидтрифосфаты+магний+праймеры+ТаяМан зонды+ полимераза+ревертаза+вода. При постановке реакции использовались РНКовые контроли. Ессно замораживал я это именно с целью чтобы не размораживая остальные пробирки брать из холодильника готовые и с ними работать) "Хотите узнать фирму - сообщайте в личку" (ц) не хочу Не барское дело гепатиты гонять |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |