Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
|
|
Glebber Постоянный участник London, UK |
[Текст переведён с транслита] |
Cells-nnm Постоянный участник |
ну я в нём и hematopoietic stem cells ращу - чувствуют себя хорошо, почему так - не знаю, самому интересно, попробую разузнать фишка наверное в особенностях гемопоэза в костном мозге
|
Cells-nnm Постоянный участник |
везде 5% прописано |
Дядя ФАКСер Постоянный участник Nothern Maccaronia, Ticinum |
Главное, что б не ниже- иначе не забуферится среда нужным образом. |
|
|
|
|
Коля2 Постоянный участник |
|
Glebber Постоянный участник London, UK |
Support Protocol 1: pH Control in Media Most cell lines proliferate in medium with a pH of 7.4, and they exhibit decreased viability and rates of proliferation as the medium becomes progressively more acidic or more basic (Eagle, 1973). Culture media must buffer the CO2 and lactic acid produced as cells metabolize glucose and glutamine. Historically, bicarbonate, HCO3–, in conjunction with atmospheric CO2, has been used as a buffering system. Each basal medium formulation has a recommended concentration for sodium bicarbonate, usually 20 to 40 mM, to maintain pH and osmolarity. Media that are to be incubated in an elevated CO2 atmosphere contain higher concentrations of bicarbonate than those designed to be used at ambient CO2 levels. Most cell culture media require an atmosphere of 5% CO2 to maintain pH 7.4. However, certain media contain levels of bicarbonate that require different amounts of CO2. For example, DMEM containing 3700 mg/liter of sodium bicarbonate equilibrates to ~pH 7.6 in a 5% CO2 environment and requires 10% CO2 to maintain pH 7.4. The low pKa of bicarbonate (pKa = 6.1) makes it a poor buffer around pH 7.4, and, in the absence of atmospheric CO2, the breakdown of H2CO3 formed from bicarbonate releases CO2 that comes out of solution, causing a rise in pH. With the development of Good buffers (Good et al., 1966), nontoxic buffering agents effective in the pH range of 6 to 8, such as PIPES (pKa = 6.8), MOPS (pKa = 7.2), TES (N-tris[hydroxymethyl]methyl-2-aminoethanesulfonic acid; pKa = 7.5), and HEPES (pKa = 7.55), became available to the research community. HEPES in a concentration range of 10 mM to 25 mM has become a standard buffer in serum-free medium, but it is used in addition to and not in place of the bicarbonate and CO2 system. Phenol red is an indicator dye that is commonly added to medium to provide a visual assessment of pH. Red at pH 7.4, it becomes orange (pH 7.0) and then yellow (pH 6.5) as the pH decreases; it turns violet (pH 7.6) and purple (pH 7.8) as the pH rises. Culture medium should generally be replaced as the phenol red changes from orange to yellow, which reflects the accumulation of lactic acid. from current protocols in cell biology [Текст переведён с транслита] |
Cells-nnm Постоянный участник |
от среды конечно зависит, но мы используем только RPMI1640, например (как впрочем прописано и в классике - Клаус), но между 5 и 8% согласитесь разница большая, особенно для отдельных субпопуляций в 8% инkубаторе наши immature, naive, progenitors & NK клетки пролиферируют гораздо лучше чем на 5% [Текст переведён с транслита] |
NIE Участник |
|
L Участник |
Автор - Cells-nnm: #у нас отдельный инкубатор 8% для NK и прогениторных (лимфоидных клеток - common lymphoid progenitors) - типа лучше растут ну я в нём и hematopoietic stem cells ращу - чувствуют себя хорошо, почему так - не знаю, самому интересно, попробую разузнать фишка наверное в особенностях гемопоэза в костном мозге dumaju 8% #CO2# stimuliruet gemopoez tak kak nemnojko gipoksiju vizivaet i poetomu mojno predpolojit chto #stem cells# budut rasti i proliferirovat lutsche. a chto kasaetsja limfocitov to oni u nas v #RPMI# na 5% #CO2# prekrasno proliferirujut i rastut. |
L Участник |
Автор - Cells-nnm: думаю 8% CO2 стимулирует гемопоез так как немнойко гипоксию визивает и поетому мойно предполойит что stem cells будут расти и пролиферироват лутсче. а что касается лимфоцитов то они у нас в RPMI на 5% CO2 прекрасно пролиферируют и растут.у нас отдельный инкубатор 8% для NK и прогениторных (лимфоидных клеток - common lymphoid progenitors) - типа лучше растут ну я в нём и hematopoietic stem cells ращу - чувствуют себя хорошо, почему так - не знаю, самому интересно, попробую разузнать фишка наверное в особенностях гемопоэза в костном мозге [Текст переведён с транслита] |
неофит Участник большая, добротная пещера на берегу моря |
про хепес, т.е. для хепес содержащей среды СО-шный инкубатор по большому счету не нужен, только температура и влажность. А про лучше растет в 8% для некоторых клеток, может просто среду чуток посильнее закисляет и клеткам этим, прогениторам вашим, просто по кайфу если покислее. |
guest: Владимир IP-штамп: frrLlTPn90XYY гость |
|
Nett Постоянный участник |
|
Itp |
(Cells-nnm @ 28.01.2005 10:14) у нас отдельный инкубатор 8% для NK и прогениторных (лимфоидных клеток - common lymphoid progenitors) - типа лучше растут ну я в нём и hematopoietic stem cells ращу - чувствуют себя хорошо, поставил почему так - не знаю, самому интересно, попробую разузнать фишка наверное в особенностях гемопоэза в костном мозге регулятор газа? |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |