molbiol.ru -> антитела к заданному пептиду

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* антитела к заданному пептиду -- где сделать и как лучше? --

Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

shure
Постоянный участник

09.06.2008 16:20

URL #1

привет!

надо сделать антитела на заданный пептид (15-20 аминокислот). хотелось бы найти контору, которой можно будет заплатить деньги и сказать сиквенс и потом получить антитела. навернео такие сервисы есть? где лучше и как вообще ето происходит, какие получаются антитела (поли-моно) и тд?
ну и почем стоит и как долго.

где про ето почитать поподробнее, а то ни разу такого не делал я.

про кроличьи уши и сами-кололи не пишите пожалуста.

спасибо.

guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость

09.06.2008 17:43

URL #2

Антитела будут кроличьи(если вам не ведро сыворотки надо, тогда скорее всего овечьи или козлиные, лошадиные). Контор много, можно Гуглем искать. Где лучше никогда не узнаете, ибо антитела это всегда лотерея, дешевле всего у Китайцев. Как происходит. Сначала запрос мол хотим, потом вам сообщают цену, если вы из цивилизованной страны, то часто оплата после работы. Сообщаете последовательность и вам через пару тройку месяцев присылают сыворотку, а лучше сыворотки от нескольких животных. Если говорить о лучше, то на мой взгляд следует отдавать предпочтение конторам в непосредственной географической близости к вам. Лучше через дорогу, еще лучше в одном институте и в соседней лаборатории. В этом случае проще контролировать процесс и можно наладить нормальный контакт с непосредственным исполнителем.

shure
Постоянный участник

09.06.2008 23:09

URL #3

спасибо.
те.е от нескольких животных, значит.
а ето называется custom antibodies?

ASDF
Постоянный участник

10.06.2008 07:31

URL #4

нужна сыворотка или моноклоны ?

shure
Постоянный участник

10.06.2008 11:28

URL #5

я в жаргоне не очень.
сыворотка - ето поликлональные? или ето вообще нечищенное что-то?

ну в идеале моноклональные антитела, да. скорее всего несколько разных клонов на всякий пожарный.

спасиба

guest: ммм
IP-штамп: fr.ReEIhc9B8A
гость

10.06.2008 12:07

URL #6

--а ето называется custom antibodies?
Наверное.

-ну в идеале моноклональные антитела, да. скорее всего несколько разных клонов на всякий пожарный.

Вот это очень дорого, просто панель клонов стоит порядка 2000 евро. А отбор плюс тестирование будет под все 10000. И их лучше уже на полноценный антиген получать, а не на пептиды.

--те.е от нескольких животных, значит.
Ну в смысле чтоб имунизировали не одного кроля, а несколько.

Guest
IP-штамп: frC/a/AY1lqjU
гость

10.06.2008 13:29

URL #7

Agrisera
говорите им последовательность белка, они сами делаут дизаин антигена. На кажды белок - 2 кролика, антитела конечно поликлональные. На выходе получаете сыворотку в которой ваши антитела. Если надо, они вам их афинно почистят, т.е. неспецифика должна уйти.

shure
Постоянный участник

10.06.2008 14:18

URL #8

спасиба

полноценного нету антигена - одно предсказание.
те.е мне нужны поликлональные почищенные антитела на мою последоватеьность?

в общем понятно более менне.

а если я хочу потом ети антитела (если заработают) использовать имунногистохимии - мне надо как-то ето обговаривать или думать какие брать?

laska56
Участник

10.06.2008 19:46

URL #9

Разбейте проблему на маленькие проблемки:
1. Синтез пептида.
2. Иммобилизация гаптена на носителе (получение антигенного препарата).
3. Получение поливалентной сыворотки.
4. Гаптен-специфическая аффинная очистка антител.
А моноклоны, Вам не нужны. На какой бок пептида их цеплять, и почему именно на тот?
А зачем кролики? А вдруг у крысок обалденные титры будут?
Короче, первую проблемку смогут решить особы приближенные к РАН, а все остальные многие и Мы в том числе. Тут все зависит от полноты налитого стакана (кол-ва гаптена).

Guest
IP-штамп: frC/a/AY1lqjU
гость

10.06.2008 21:05

URL #10

Агрисера сделает вам все - дизаин и синтез антигена, coupling, иммунизация, афинная очистка. Есть есче неплохая контора в Канаде, но Аgrisera ближе =) Конечно, если хочетса секономить, то синтез и афиннуу очистку можете сделать сами. Я не очень понял что вы имеет в виду под "обговаривать или думать какие брать?"
У вас будет несколько иммунизированных жывотных, у вас будут "bleeds", можете скринировать антитела на ваших екстрактах и потом выбрать животное с более "качественными" антителами. Затем чистите ваши антитела афинно. При гистохимиу на знау, но для WB и ELISA работает.

shure
Постоянный участник

10.06.2008 23:45

URL #11

спасибо. сам я конечно не буду заморачиватсья с синтезом и гаптенам и все такое. про контору понятно - сайт у агрисеры вполне такой вменяемый - деньги тоже вроде.

про обговаривать - я имел виду что последующая работа планируется так - будут антитела, проверенные на клеточно фракции в которой присутствует белок с в состав которого входит пептид. потом ети антитела я думал использовать для окраски гистологических срезов - можно наверное сразу попросить их сделать метку на них какую-нибудь флюоресцентную или придется использовать вторичные антитела?

ну и вообще - для такой работы необходимы какие-то особенные анитела полученные опр. методом - специально почищщеные или не из кролика а из мыши и тд. хотя скорее всег о срезы будут из крыс - тогда наверное кролики или козы лучше будут работать? простите за наивность.

буду благодарен за советы.

EKol

11.06.2008 09:08

URL #12

Мы синтезируем пептиды и получаем сами антипептидные поликлональные антитела. Лаборатория в Москве. Можем проконсультировать по выбору антигенного пептида. Стоимость синтеза пептида 15-20 а.к. остатков для иммунизации - примерно 6000-10000 руб. в зависимости от структуры. Всё остальное обговаривается отдельно, т.к. при частичном Вашем участии (например, предоставление белка-носителя, если у Вас он есть) цена на антитела может быть ниже. Кроме того, у нас маленький виварий, и не всех животных мы можем содержать (с курами, что в Вашем случае было бы оптимально, мы у себя работать не можем, придется на стороне). Звоните (495)246-33-75 (раб.) или пишите в личку.
С уважением,
Колесанова Екатерина Федоровна.

Сообщение было отредактировано EKol - 11.06.2008 09:09

Guest
IP-штамп: frC/a/AY1lqjU
гость

11.06.2008 14:44

URL #13

Я совсем даже не специалист по продукции антител.

Напишите/позвоните в Агрисеру, там очень милые луди, обсудите.
Основная проблема в том, что если вы возьмете екстракт из вашей мышки и проинкубируете его с преимунной сывороткой того же кролика, у вас будет крааасивая лесенка.

если нужно только WB ставить - можно вырезать тоонкуу полоску вашей мембраны (где примерно белок должен быть), и инкубировать с антителами это тонкуу лапшину. Для хистохимми наверняка нужно аффино чистить, тогда должны остатьса только антитела к вашему пептиду.
Good luck

Guest
IP-штамп: frQG2qglqvAdc
гость

12.06.2008 00:31

URL #14

Насколько я знаю, у В.И. Цетлина в ИБХ несколько лет назад получали "на заказ" кроличьи (естественно, поликлональные) антитела против ими же синтезированного пептида заданной заказчиком последовательности. Часть пептида после синтеза оставляли на смоле и на таком сорбенте аффинно выделяли антитела из сыворотки, если это требовалось. Стоило это меньше, чем "у буржуинов", процентов 70% от их стоимости. Да и контора квалифицированная.

laska56
Участник

12.06.2008 07:43

URL #15

Для гистохимии лучше сразу какой-нибудь ФИТЦ присоединить, да и запас гаптен-пептида неплохо под рукой иметь, для отмены специфичекой реакции конкуренцией с растворимым гаптеном ( есть такой способ контроля!).

prituz

01.08.2017 16:03

URL #16

(Guest @ 10.06.2008 14:29)

Пущинские лаборатории возят агрисеру напрямую, правда получится дороже, чем у них на сайте, зато можно провести как расходы по гранту.

watchesbiz
Постоянный участник

23.11.2021 15:07

URL #17

http://replicarolexwatches.simpsite.nl/
https://www.smore.com/rj7kh-best-replica-watches
https://www.athleticsnation.com/users/Replicarolexwatches
https://pastebin.pl/view/ab0e458a
https://mix.com/watcheshutukcom
https://www.woddal.com/post/359216_tiny-acc...nybody-039.html
https://share.naturalnews.com/posts/3904099
https://demo.wowonder.com/post/214429_the-i...-producers.html
https://rapichat.com/post/5369_our-purpose-...ible-there.html
https://dashburst.com/replicarolexwatches/1
https://sway.office.com/KifcQvn36MK821G8
https://flipboard.com/@replicarolex24
https://getpocket.com/redirect?url=https%3A...eshut.uk.com%2F
https://www.openstreetmap.org/user/Hints%20...20Rolex%20Watch

preeti

22.06.2022 08:34

URL #18

Canon enhances the printer scan functionality, and includes a robust security feature set. For more information, you can visit our website at https://urlis.net/ijijstartcanon and get more information at your convenience.

preeti

22.06.2022 08:35

URL #19

To install Office Setup, go to https://urlis.net/officecomsetupp website and enter the Office Setup product key.

preeti

22.06.2022 08:36

URL #20

Webroot is a subsidiary of Carbonite, which is, in turn, a subsidiary of OpenText, which provides enterprise information management
software, including security software, to companies. For more information visit our website at https://urlis.net/webrootsafe

preeti

22.06.2022 08:37

URL #21

If you do not have a Norton account, to create an account from your web browser, go to https://urlis.net/nortoncomsetup and click on Sign In. After that you complete your sign-up process.

preeti

22.06.2022 08:37

URL #22

If you do not have a Norton account, to create an account from your web browser, go to https://urlis.net/nortoncomsetup and click on Sign In. After that you complete your sign-up process.

preeti

22.06.2022 08:39

URL #23

Provide the best MS Office product key for your office. To install the Office Setup Product Key, click on the link https://urlis.net/officecomsetup given by us.

preeti

22.06.2022 08:39

URL #24

Amazon.com mytv is probably the best platform to watch movies and TV shows on the web continuously. Now you will be able to watch your favorite shows on your PC or PC as well as on your Smart TV and Gushing Stick. For more details click on our website https://urlis.net/amazoncommytv

preeti

22.06.2022 08:40

URL #25

Norton's anti-malware engine uses machine learning, advanced heuristics, and an ever-updating malware directory to identify malware. For more information visit our https://urlis.net/nortonsetup Click on the website and get the details.

preeti

22.06.2022 08:40

URL #26

This software includes various features and tools that help in automated preparation and filing of tax. TurboTax is very useful, as it simplifies the complex process. You need to install and activate TurboTax from https://urlis.net/turbotaxdownload when you purchase the software.

preeti

22.06.2022 08:41

URL #27

canon is material that is accepted as an official part of a story in that story's personal universe because of its fan-hype base.this fan is mostly used for worksof fiction.for more information ,you can visit our website https://urlis.net/ijcanonstart and get more informationat your convenience.

preeti

22.06.2022 08:42

URL #28

Download the driver or software for the printer scanner. To install your additional Canon driver or software go to the https://urlis.net/canoncomsetup link and follow the steps on it.

preeti

22.06.2022 08:43

URL #29

The Network Device Setup Utility is a software application that enables your computer to communicate with a printer. You can use this utility on your computer to perform basic settings such as entering a printer IP address or selecting a network frame type. For more information, you can visit our webste at https://urlis.net/ijcanoncomsetup and click on your you can get more information at your conveninence.

guest: Ufa1688
IP-штамп: frpXPq5TOmUHs
гость

20.07.2022 22:08

URL #30

The US and its Funky Games Western allies have sought Funta Gaming to turn around momentum Red tiger in Ukraine as Russia makes JILI incremental gains in the ALLWAYSPIN western part of the country. Biden รูเล็ต has approved billions in บาคาร่า arms shipments and ufabet เข้า สู่ระบบ other security assistance aff 1688 and applied several rounds ทางเข้าufa1688 of sanctions on Moscow.

guest: Ufa1688
IP-штамп: frpXPq5TOmUHs
гость

10.08.2022 11:44

URL #31

Established in 2003 our ดรีมเกมส์ physiotherapy team has บาคาร่า successfully treated over หวยออนไลน์ 50,000 clients หวยยี่กี helping them to experience รูเล็ต life fully again. Trusted by ไฮโล experts in the medical field หวยลาว Core Concepts ufabet เข้า สู่ระบบ Physiotherapy works ทางเข้าufa1688 closely with orthopaedic aff 1688 surgeons and GPs.

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.