Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Форез олигонуклеотидов -- comments to a permanent page of the site --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Тема связана с: PAAG электрофорез
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Forum robot
Постоянный участник
на сервере в Москве



 прочитанное сообщение 16.06.2005 12:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Проведение PAAG фореза олигонуклеотидов. Подготовка форезного аппарата. Количество олигонуклеотида на дорожку. Выбор процентности геля. Окрашивание, фотографирование. Подвижность красителей.
Гость
IP-штамп: frswkCVHxyt0w
гость



 прочитанное сообщение 16.06.2005 12:39     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Прошу написать знающих людей, как можно разогнать на электрофорезе изоформы цитохрома Р 450 (2% агароза, горизонтальный электрофорез).
Участник оффлайн! Mac-1
Постоянный участник
оттуда



 прочитанное сообщение 17.06.2005 22:12     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

(Гость @ 16.06.2005 05:39)
Ссылка на исходное сообщение  Прошу написать знающих людей, как можно разогнать на электрофорезе изоформы цитохрома Р 450 (2% агароза, горизонтальный электрофорез).


Попробуйте ИЭФ - изоэлектрофокусирование в амфолитах (фармалитах, если их еще выпускают).
Я когда-то видел фотографию разделения изоформ цитохрома именно таким способом.
К тому же, если не ошибаюсь, эти изоформы входили даже в кит маркеров для ИЭФ. smile.gif
_Danil_
IP-штамп: frftLGqhpFF.A
гость



 прочитанное сообщение 11.01.2006 21:25     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

При проведение количественного фореза (т.е. такого после которого вы будете вырезать кусок геля с нужным вам производным олигонуклеотида) НЕ следуйте дополнению от Маши (нагревание геля ускоряет полимеризацию)!
Нагревание геля в процессе полимеризации чаще всего его (процесс) безусловно ускоряет но может привести к тому что гель получится корявый
Oligolamer
IP-штамп: frswkCVHxyt0w
гость



 прочитанное сообщение 10.04.2006 14:52     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Автору (Администрации):
почему бы не развести форез на качественный и количественный (главы в одной теме?), чтоб не было путаницы и "ляпов" из-за применения одного для кардинально другого?
Guest
IP-штамп: frVUncTC1Qf86
гость



 прочитанное сообщение 10.04.2006 15:33     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Потому что надо всегда всё делать как следовает, и не делить форезы на "допустимо корявые" и "картиночные".
guest: Oligolamer
IP-штамп: frswkCVHxyt0w
гость



 прочитанное сообщение 11.04.2006 16:59     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

2Guest
Не понял Вашего (логики) ответа.
Участник оффлайн! Redactor
admin.
Берлин, Германия



 прочитанное сообщение 11.04.2006 17:03     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(Oligolamer @ 10.04.2006 13:52)
Ссылка на исходное сообщение  Автору (Администрации):
почему бы не развести форез на качественный и количественный (главы в одной теме?), чтоб не было путаницы и "ляпов" из-за применения одного для кардинально другого?


Я сам просто не смогу разделить на две методики. У меня опыта не хватает нормально описать отличия одного от другого.
Участник оффлайн! Oligolamer

Украина



 прочитанное сообщение 13.04.2006 13:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Хорошо, может методики разводить и не надо (а просто я - ...lamer teapot.gif ).

Но если можно (кто-нибудь добрый), объясните/уточните такие позиции в методике:

*
Подготовка форезного аппарата
...3. Если
(кстати, "если после номера пункта стоит точка - то предложение пункта пишется с заглавной буквы)
хочется, чтобы гель легко снимался со стекол — силиконизировать.

У нас в лаборатории говорят, что силиконизирование даёт обратный эффект - гель лучше прилипает.
З.Ы. При этом в комментариях для п.3. идёт ссылка на:
п.3.
Силиконизирование - см. "Сиквенс"

Где
bind-silane очень летучее вещество и даже небольшого его количества достаточно, чтобы приклеить гель к стеклу


*
Количество олигонуклеотидов на дорожку

нижний предел (с красочками) - явно рассчитан на качественное определение...
верхний предел (без красок) - для кол-венного определения
Только что значит - разрешение ещё приемлемое? Если больше - то,что будет - дорожки "перекрываются" или олиги не "бегут"? confused.gif

*
Выбор % геля
7. на 12х8х0.07см3 гель требуется ~7ml (лучше приготовить 10ml).

Что за величины?!
Выше же было "если брать ~10µg на 10х0.5 mm2 ячейку", т.е. толщина 0,5 мм;
а тут вдруг 0,07 см какие-то (откуда ещё 0.2 мм "нарисовались")? eek.gif

*
расплавленную 2% агарозу (в ТВЕ 1x) налить ...


КАКУЮ АГАРОЗУ?! - ведь в ПААГе олиги гоняют?! mad.gif
Или эта статья выложена на всеобщее обозрение чтобы задурить головы возможным конкурентам?! frown.gif - ну, нельзя же так, право слово

Сообщение было отредактировано Oligolamer - 13.04.2006 16:10
Участник оффлайн! Тот Самый




 прочитанное сообщение 13.04.2006 16:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

Слыш, ты эта... субординацию соблюдаи. Раз ламер, значит выводы не делай, особенно про задурить голову. Тебе не надо.
Силан для силиконизирования двух сортов бывает: связывающий и отталкивающий.
Ну и т.д. и т.п.
Участник оффлайн! A Chemist
Постоянный участник
Минск



 прочитанное сообщение 14.04.2006 09:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

Силан для силиконизирования двух сортов бывает: связывающий и отталкивающий.

Это не совсем точное утверждение. Есть еще как минимум один сорт, третий (не брак).
Участник оффлайн! Re
Участник



 прочитанное сообщение 14.04.2006 11:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

(Oligolamer @ 13.04.2006 11:06)
Ссылка на исходное сообщение  Хорошо, может методики разводить и не надо (а просто я  - ...lamer  teapot.gif ).

Но если можно (кто-нибудь добрый), объясните/уточните такие позиции в методике:
У нас в лаборатории говорят, что силиконизирование даёт обратный эффект - гель лучше прилипает.
КАКУЮ АГАРОЗУ?! - ведь в ПААГе олиги гоняют?!  mad.gif
Или эта статья выложена на всеобщее обозрение чтобы задурить головы возможным конкурентам?!  frown.gif  - ну, нельзя же так, право слово

Спокойно. дружище, спокойно...
Стекла мойте, силиконизировать "repel" - силаном вряд ли понадобится.
Агарозу, если посмотрите на картинку, используют как пробку, чтобы акриламид до полимеризации не вытекал. Если толщина геля не как для сиквенса, он может вытекать даже при заливке в горизонтальном положении. тут уж кто резиночку прокладывает, кто агарозную пробку делает, кто спейсеры смазывает, - словом, лучше самодельную методику перенимать из рук в руки, или фирменную - по инструкции к прибору.
Участник оффлайн! Oligolamer

Украина



 прочитанное сообщение 19.04.2006 16:22     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

...и не видел я
"инструкции к прибору"
Это как - прибор для олигофореза? - звучит забавно
(:
К сожалению, хотелось бы чтоб эта онлайновая методика была концептуальна. А то пока что выгдляит так, как будто натянули материалу из разных методичек...
Guest
IP-штамп: frYCDKWxyC83I
гость



 прочитанное сообщение 10.05.2007 06:39     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

помогите пожалуйста.
по методике на сайте, олиги можно увидеть по теням на бумаге или хроматографической пластинке. Не знаю что я делаю не так, но никаких теней не видно.
Источник УФ - обычный трансиллюминатор.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 18.08.22 07:21
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft