Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
guest: 123vega | Отправлен 19.05.2022 10:43 |
For the past 15 years, India |
|
nigoal123 | Отправлен 19.05.2022 06:44 |
Anyone can connect organic traffic from |
|
watchesbiz | Отправлен 24.11.2021 15:06 |
Flyamer | Отправлен 22.10.2016 11:30 |
А в G2 в клетке хоть все 4 копи могут по-разному починиться, это совсем непойми что будет. Конечно, может, этот TIDE все разберет, тогда это не нужно. |
|
Flyamer | Отправлен 22.10.2016 10:49 |
(Flyamer @ 22.10.2016 02:31) |
|
Esya | Отправлен 22.10.2016 03:32 |
Но ведь клонировать ПЦР-продукт из человеческих клонов надо будет в е коли, чтобы потом секвенировать. а зачем? |
|
Flyamer | Отправлен 22.10.2016 01:31 |
Да, они там пишут на сайте где-то, что бывают проблемы с доступом из-за фаерволов... Да это я понимаю, что универсальное. Но ведь клонировать ПЦР-продукт из человеческих клонов надо будет в е коли, чтобы потом секвенировать. А то если в двух аллелях по-разному починился разрыв, опять же будет мешанина в сиквенсе. |
|
Sergeant | Отправлен 21.10.2016 14:13 |
(Flyamer @ 21.10.2016 10:18) 1. Ну это я про лицензию для желающих прикрутить R скрипты на свой веб сервер. Меня и бесплатный вариант устроит. Вот только есть небольшая проблемма. Программа не работает ни с одного рабочего места. Серый экран и никаких признаков жизни. Пробовал дома. Там работает. 2. А причем здесь E.Coli? Я вроде бактериальный геном редактировать не собираюсь. Клонирование понятие универсальное. Бактериями не ограничивается. В моей ситуации я плюю вирус на человеческие клетки. Потом давлю антибиотиком неифецированные клетки. Что получается? Получается компот из гомозиготных, гетерозиготных нокаутов. Плюс варианты с делециями, но активным белком. Плюс неспецифика. На вестерне в сумме все это дает падение экспессии до 30-50%. Меня КАТЕГОРИЧЕСКИ не устраивает. Выход из ситуации- рассадить инфецированные клетки в 96 велочный планшет примерно по одной клетке на лунку. И ждать пока в лунках вырастут клоны. Если клетки шустро делятся тогда за 2-3 недели можно наростить клеток до товарного колличества и делать скрининг на этих клонах. А если клетки дохлые и ростут очень медленно, то до клонов можно и не дожить. |
|
Flyamer | Отправлен 21.10.2016 12:18 |
Какой еще ценник? Это бесплатная штука (онлайн которая). Причем здесь 293? Е. коли быстро делятся |
|
Sergeant | Отправлен 20.10.2016 17:09 |
Плюс есть вот эта штука, которая может решить все проблемы, но я не пробовал. Ценник впечатляет. И как то я сомневаюсь , что эта штука вообще может взлететь. Но ПОПРОБУЮ. то только клонирование ПЦР-продукта и секвенирование клонов Пробовали. Теоретически Да. А практически нужно иметь целый взвод негров для клонирования и скрининга. Плохо масштабируемо. С клональной селекцией тоже не так уж радужно. Долго. И не все клетки так резво делятся как 293. |
|
Посмотреть тему (откроется в новом окне) | |