Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Лигирование и рестрикция
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! jelenarus




 прочитанное сообщение 13.08.2018 17:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Здравствуйте. Кто делал рестрикцию и лигирование в одну реакцию? Без использования спец.буферов, а, допустим, с каким-нибудь НЕБовским рестрикционным буфером, например, КатСмарт. На сайте написано, что Т4 лигаза эффективно работает в этом буфере.
Нужен проткол, правильный расчет концентрации всех реагентов. Подскажите, пожалуйста
Участник оффлайн! R-J-Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 13.08.2018 17:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

в свое время у Стратаджина была такая система с Srf I. Но сейчас такой нет, как нет самой Sfr.
Надо понимать, зачем такое извращение- для ВСЕХ ферментов условия субоптимальные? По буферам и температурам. Вы хотите снизить фон? Для этого не надо класть все в одну пробирку, достаточно после лигирования дорезать лигат, если есть чем. Будет лучше
А если хотите сэкономить время, то ваще смешно, лигирвоание идет 15 мин
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 13.08.2018 19:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

задачу сформулируйте, что сделать хотите?
Участник оффлайн! R-J-Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 14.08.2018 10:38     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

ну, думаю, ничего такого глубокого. судя по предыдущим темам, типичный неопытный неофит
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 14.08.2018 17:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

ну я вот за почти 20 лет так и не сталкивался с необходимостью делать такое. поэтому и спрашиваю, зачем это нужно? что за задача такая
Участник оффлайн! R-J-Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 14.08.2018 18:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

ну, у Strategene была изящная система, когда вектор постоянно дорезался при лигировании, и в пределе вся типа вставка всасывалась в вектор, что минимизировало кол-во "пустышек". А тут? думаю, праздная игра ума
Guest
IP-штамп: fr2nCBTtQKhN2
гость



 прочитанное сообщение 14.08.2018 22:53     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

Я вцот никкам не могу понимать почему мы не имеем специал;ным социалных агенств РЕБЯТ ИЗ ДЕРЕВЕНь ..
Участник оффлайн! AVP
Постоянный участник
New Jersey



 прочитанное сообщение 15.08.2018 00:56     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(jelenarus @ 13.08.2018 10:32)
Ссылка на исходное сообщение  Здравствуйте. Кто делал рестрикцию и лигирование в одну реакцию? Без использования спец.буферов, а, допустим, с каким-нибудь НЕБовским рестрикционным буфером, например, КатСмарт. На сайте написано, что Т4 лигаза эффективно работает в этом буфере.
Нужен проткол, правильный расчет концентрации всех реагентов. Подскажите, пожалуйста


не понимаю трудностей, например, при рестрикции и последующем лигировании у вас пропадает сайт рестрикции для данных(ой) рестриктаз(ы). В данной манипуляции нужно учитывать оптимумы температуры как для рестритаз(ы), так и лигазы и возможность дальнейшего убиения вышеперечисленных, например, 65оС (доп. степ, в прграммипуемом инкубаторе).
P.S. ключи от квартиры, лежат в тумбочке в прихожей слева как зайдете.
Удачи
Участник оффлайн! R-J-Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 15.08.2018 11:23     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

трудноестей нет, но ЗАЧЕМ? левой пяткой чесать правое ухо?
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  20.11.2021 17:42     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

https://jumpshare.com/v/QxZ9Rn2mfDCaBq2AdBG1
https://www.edocr.com/v/znnrba3z/watcheshut...lica-Watches-UK
https://www.tuugo.us/Companies/best-replica...s/0310006695505
https://topsitenet.com/article/988178-hints...ca-rolex-watch/
http://simp.ly/p/nxGlWb
https://telegra.ph/Hints-on-Choice-of-a-Hig...lex-Watch-02-22
https://replicarolexwatche2.blog.fc2.com/blog-entry-1.html
https://www.knowpia.com/s/blog_60f7e7c31014a97a
https://zenwriting.net/replicawatches24/hin...ica-rolex-watch
https://globalcatalog.com/replicawatchesuk.us/en
http://www.cplusplus.com/articles/iE1wvCM9/
https://eatsleepride.com/c/346210/hints_on_...ica_rolex_watch
https://www.myminifactory.com/users/watcheshutukcom
https://www.mioola.com/ReplicawatchesUK/post/199764/
https://en.gravatar.com/allreplicawatches24
https://8tracks.com/replicawatchesuk
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.12.2022 10:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

https://omegawatches89.simplesite.com/452939033
https://dailygram.com/index.php/blog/116219...eplica-watches/
https://plaza.rakuten.co.jp/omegawatches89/...y/202208040000/
https://blog.easyfie.com/how-to-prepare-you...on/#comment-285
https://form.jotform.com/223253786289064
https://discussions.ubisoft.com/user/omegawatches89
https://www.worldranklist.com/profile/108194
https://blog.udn.com/omegawatches89/176226568
https://penzu.com/p/56f52c40
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/tips-...replica-watches
https://omegawatches91.mystrikingly.com/
https://ameblo.jp/omegawatches89/entry-12756647425.html
https://telegra.ph/Where-To-Find-Elegant-An...es-Online-08-03
https://omegawatches89.seesaa.net/article/490300768.html
https://medium.com/@omegawatches89/reasons-...ar-e16d1fabc26f
https://omegawatches89.simplesite.com/452939109
https://teletype.in/@omegawatches89/bVw2sShID4x
https://www.pearltrees.com/omegawatches89#item456651209
https://dailygram.com/index.php/blog/116219...eplica-watches/

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.03.24 10:48
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft