Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Первый искусственный фермент с активностью, соизмеримой с природной

Кураторы темы:* Newsline
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Newsline
Участник
Paris, France



 прочитанное сообщение 23.11.2013 17:00     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail

картинка: 15.gif
Возможно в скором будущем можно будет синтезировать ферменты с заданной специфичностью, в том числе к субстратам, несуществующим в природе. Алгоритм и успешную реализацию такого подхода опубликовала группа Дональда Хилверта из высшей технической школы Цюриха, которая впервые получила искусственный фермент с активностью, соизмеримой c природной!

Авторы использовали глобулу ксиланазы и квантово-механические расчеты, чтобы перестроить активный сайт фермента, сделав его катализатором элиминирования Кремпа – важной реакции органического синтеза (на рисунке). Полученный белок (11 мутаций относительно ксиланазы) обладал специфичностью к субстратам реакции, но был практически лишен каталитических свойств, однако проблему удалось решить направленной in vitro эволюцией: после 17 циклов отбора наиболее активных из случайных мутантов (~10 из 1000) был получен белок, HG3.17, ускоряющий реакцию в 6x108 раз, при том, что природные ферменты ускоряют реакцию в среднем в 108-1010 раз!

Кристаллическая структура HG3.17 в комплексе с субстратным аналогом показывает, что новый фермент обладает универсальными свойствами природных катализаторов – комплементарностью формы с субстратами, сближающей их активные группы, и способностью стабилизировать переходное состояние, снижая активационный барьер реакции.

Открытие открывает дорогу к созданию искусственных ферментов и может изменить будущее белковой инженерии. Возможно, через несколько лет каталог ферментов для органических и прочих реакций будет таким же доступным и привычным, каким сегодня является каталог эндонуклеаз.

На рисунке:
Верхняя панель: элиминирование Кремпа (соединение 3 - субстратный аналог). В центре: структура HG3.17 в комплексе с субстратным аналогом, разрешение - 1.1 Å; мутированные позиции относительно ксиланазы и относительно фермента до in vitro эволюции показаны как цветные сферы, субстрат выделен оранжевым цветом. Нижняя панель: активность фермента до (синяя линия) и после in vitro эволюции (красная линия).

Работа:
http://www.nature.com/nature/journal/v503/...ature12623.html

Сообщение было отредактировано Newsline - 10.12.2013 00:50

Всего благодарностей: 21Поблагодарили (21): xenopus, papa Karlo, orun, Mike Shelk, Acrimony, Vadim Sharov, NMR-guy, птаха, Esya, Replikant, epsylonit, filili, Shanty, Dergg, Gubanov Sergey, kentta, abblackhole, klav, Luferchik, dm1, bubnilkin



Сообщение в колонке новостей: Наука: общая и молекулярная биологияСообщение в колонке новостей, раздел "Наука: общая и молекулярная биология"
10.12.2013 13:45
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 10.12.2013 21:08     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Вопрос: куда они вылили бактерии, несущие плазмиды с менее эффективными на момент скрининга изоформами? Не в швейцарскую ли канализацию, часом? wink.gif

Может там уже кто делает фермент эндо-[пластик, полимер, резина]-азу по этому алгоритму? Передайте чтобы в водопровод не выливали открученные остатки культур, а то мало ли - вдруг он пластиковый у них? wink.gif А то и-колай с такими ферментами на борту может иметь серьезное преимущество в так называемом "отборе" - еды вокруг может стать завались, особенно в городах и на свалках вокруг них, куда отходы из таких лаб иногда свозют в целях "бюджетной экономии"®™. wink.gif

Поздравляю весь так называемый "цивилизованный мир", кое-кто в Швейцарии решил, что пора открыть этот ящик...

Еще раз весь мир увидит, что между in silico (а где у нас наибольшие вычислительные мощности печатають за наши деньги но для себя? wink.gif) и in vivo (куда вы аутсорсите гибридомы и нокаутных мышей? wink.gif) скоро рабочих мест не останется. Всё будет делаться быстро и без проблем самими "моделлерами".
Участник оффлайн! Alexander bk
Участник



 прочитанное сообщение 10.12.2013 23:43     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Вопрос: куда они вылили бактерии, несущие плазмиды с менее эффективными на момент скрининга изоформами? Не в швейцарскую ли канализацию, часом?


А что, так кто-то делает? Ведь это нарушение :-)

Вряд ли люди с таким мышлением способны делать работу уровня, который представлен в статье.

Для меня научный результат и скурпулезность (пусть даже в следовании правилам обращения с отработанными материалами) вещи связанные.

Не поэтому ли наши "ученые" так "часто" печатаются в Nature?
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 11.12.2013 02:00     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

"Да я Вас умоляю", работа вполне обычного для современной структурной биологии уровня. Многие вещи не получалось раньше делать из-за недостаточности вычислительных мощностей на задачах не очень поддающихся распараллеливанию (кв-мех расчеты - яркий пример, чем больше система, тем нелинейно сложнее ее просчитывать). Но как их делать уже было ясно лет 20-30. В этой области открытая наука отстает лет на 10-15 от закрытой в бигфарме. Кстати, работа наглядно показывает, что стабильное связывание за счёт энтальпийного компонента свободной энергии, как и пространственную конфигурацию кармана, просчитать можно. Но вот энтропийную механику динамики поведения окрестностей а/ц после связывания - никак и никогда в обозримом будущем, тут уже наш мозг не способен даже осмыслить задачу полностью, чтобы верно поставить задачу перед суперкомпом. Потому они вынуждены были включить для появления этой динамики этап "выкручивания рук" Создателю живого, лицемерно именуемый ими "эволюцией" или "искусственным отбором". Тут, при таком сочетании содеянного, конечно, всё заработало. Теперь посмотрим во что это выльется, и что за флора начнет уже скоро преобладать в нашей биосфере с ее нынешним составом ресурсов, пригодных для расщепления и получения энергии этими бактериями с такими искусственными ферментами на борту.

И занимаются этой наукой какие-нибудь привозные китайцы, индусы или наши, хотящие престижа и заграничной славы, или замуж уже наконец, наёмные сотрудники... Которые вы удивитесь на что способны когда их никто не видит wink.gif
А в ваших политических журналах наших редко печатают потому что их научные интересы редко совпадают с той имитацией науки, которая там печатается вперемешку с серьезными и достоверными статьями (для которых у них и своих исполнителей полно, а наши были нужны из-за политики лет 10 назад, когда нужно было доровнять развалины уничтоженного Союза, внушив этим развалинам разными способами, что разваливаться непристижно и не трендово, нужно "брать трактор", если он пока есть, и валить исполнять свою галлюцинаторную мечту smile.gif).
Участник оффлайн! papa Karlo
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.12.2013 02:38     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

куда они вылили бактерии, несущие плазмиды с менее эффективными на момент скрининга изоформами? Не в швейцарскую ли канализацию, часом?..

Да а куда ж еще ... туда... мне вообще страшно представить себе сколкьо моих очеловеченных дрожжей живет в Бельгийской природе нунче...

И нас там помнится какие-то мутантные одуванчики вокруг института появились... право смешные такие... ну явно же что-то из теплиц отдела Системной Биологии Растений сбежало и скрестилось с дикой природой.

Моих -то хоть не видно невооруженным глазом. Но они тоже там живут. Зуб даю.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): NMR-guy
Участник оффлайн! xenopus
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 11.12.2013 02:42     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

(NMR-guy @ 10.12.2013 19:08)
Ссылка на исходное сообщение 
Может там уже кто делает фермент эндо-[пластик, полимер, резина]-азу по этому алгоритму?


Рано или поздно это случится, с помощью человека или без оной. И тогда будет армагеддец... eek.gif

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): NMR-guy
Участник оффлайн! papa Karlo
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.12.2013 03:05     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

Ну надо же как-то разгрести этот дерьмовый остров из пластика в Индийском океане.... А то засрали все этим пластиком ... вот теперь надо делать тех кто его ест... как иначе-то?
Участник оффлайн! Panaev
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.12.2013 04:41     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(xenopus @ 11.12.2013 03:42)
Ссылка на исходное сообщение  Рано или поздно это случится, с помощью человека или без оной. И тогда будет армагеддец... eek.gif


А что такого катастрофичного произойдет?
Деградация материалов, используемых человеком была всегда. Коррозия металлов, гниение древесины, кожи ну и т.д. И пластик он же не вечный. Под солнышком и без бактерий хорошо сыпется. Вы бы видели, что делает горное солнце и перепады температуры с лучшими образцами веревок из полиамидного волокна, даже обработанного тефлоном.
Участник оффлайн! xenopus
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 11.12.2013 05:16     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Ну, если хотя бы представить, что полиэтиленовые трубы будут сожраны бактериями. Брр.. Этого никто не ждет и не предусматривает, в отличие от ржавчины и т.п. А про веревки я в курсе, сам в походы хожу. beer.gif
Участник оффлайн! Panaev
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.12.2013 05:48     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

Однажды, мой отец (инженер-прочнист) узнал о существовании и даже целенаправленной селекции бактерий, потребляющих нефть и прочие углеводороды. И очень обеспокоился судьбой наших нефтяных месторождений.
Какой же это будет ужас, если эти бактерии туда попадут?!
До сих пор ужаса не произошло. smile.gif
Участник оффлайн! Panaev
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.12.2013 05:56     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

(xenopus @ 11.12.2013 06:16)
Ссылка на исходное сообщение  Ну, если хотя бы представить, что полиэтиленовые трубы будут сожраны бактериями. Брр.. Этого никто не ждет и не предусматривает, в отличие от ржавчины и т.п. А про веревки я в курсе, сам в походы хожу. beer.gif

Это можно представить только на космической станции, где нет более съедобных субстратов. Я вас уверяю, что нормальная бактерия найдет чем прокормиться в почве кроме полиэтилена smile.gif.
Участник оффлайн! xenopus
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 11.12.2013 10:28     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

Я тоже об этом думал - полиэтилен не самая "дешевая" еда. Но, возможно, в каких-то условиях она окажется выгодной.
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 11.12.2013 10:37     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(papa Karlo @ 11.12.2013 04:05)
Ссылка на исходное сообщение  Ну надо же как-то разгрести этот дерьмовый остров  из пластика в Индийском океане....   А то засрали все этим пластиком  ... вот теперь надо делать тех кто его ест...  как иначе-то?

Тока мономеры-то этих веществ - не все "вкусные", часть, как акрилы и некоторые амины и амиды, кроме этих бактерий никто пережевать не сможет, некоторые подавятся а остальные - задохнутся...

(Panaev @ 11.12.2013 05:41)
Ссылка на исходное сообщение  А что такого катастрофичного произойдет?
Деградация материалов, используемых человеком была всегда. Коррозия металлов, гниение древесины, кожи ну и т.д. И пластик он же не вечный. Под солнышком и без бактерий хорошо сыпется. Вы бы видели, что делает горное солнце и перепады температуры с лучшими образцами веревок из полиамидного волокна, даже обработанного тефлоном.

Скорость того процесса, который Вы описываете - дни, недели и месяцы непрерывных перепадов и облучения. Бактерии же смогут, если будет тепло и мокро, хотя бы на поверхности, использовать эти ферменты для извлечения полезных метаболитов за часы и минуты. Это будет не как ржавчина. Скорее как кинетика проедания листа металла кислотой. 3-6 часов - и готово! субстрата уже нет, как глюкозы в М9.

(Panaev @ 11.12.2013 06:48)
Ссылка на исходное сообщение  Однажды, мой отец (инженер-прочнист) узнал о существовании и даже целенаправленной селекции бактерий, потребляющих нефть и прочие углеводороды. И очень обеспокоился судьбой наших нефтяных месторождений.
Какой же это будет ужас, если эти бактерии туда попадут?!
До сих пор ужаса не произошло. smile.gif

Почему же? Эти бактерии как раз и обитают в этих пластах. Просто их популяции лимитируются не нефтяным субстратом, а каким-нибудь более редким метаболитом.
Здесь же мы сознательно "делаем" в отсутствии лимитирущих по субстрату условий НОВЫЙ фактор колонизации той части биосферы, которая ПРЕДВАРИТЕЛЬНО была насыщена НАМИ ЖЕ субстратом, отсутствующим до 20 века в среде вокруг нас.

То есть, кроме нас и бактерий с такими ферментами этот пластик не будет никому интересен.

Вы уверены, что готовы в мире перестающих работать антибиотиков к конкуренции с бактериями за пластик, которым она питается вне лимитирующих её факторов среды, кроме Вас с химикатами? shuffle.gif

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): angelian
Участник оффлайн! angelian
Участник



 прочитанное сообщение 11.12.2013 11:57     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

В начале скептично отнесся к прогнозу NMR-guy, а потом подумал... хех, действительно, стремненько.
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.12.2013 16:02     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

как страшно жить - мы все умрем!
можно пластик оставить бактериям и нмр-гаю - нехай конкурируют. а мы перейдем на исконно-посконные бересту, лен и коноплю. smile.gif

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): papa Karlo, Gubanov Sergey
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 12.12.2013 00:51     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

> бересту, лен и коноплю

пока улучшенную целлюлазу им по тому же алгоритму не вставили в набортный набор плазмид... shuffle.gif
Участник оффлайн! Panaev
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.12.2013 04:27     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

(NMR-guy @ 11.12.2013 11:37)
Ссылка на исходное сообщение  
Почему же? Эти бактерии как раз и обитают в этих пластах. Просто их популяции лимитируются не нефтяным субстратом, а каким-нибудь более редким метаболитом.
Здесь же мы сознательно "делаем" в отсутствии лимитирущих по субстрату условий НОВЫЙ фактор колонизации той части биосферы, которая ПРЕДВАРИТЕЛЬНО была насыщена НАМИ ЖЕ субстратом, отсутствующим до 20 века в среде вокруг нас.

То есть, кроме нас и бактерий с такими ферментами этот пластик не будет никому интересен.

Вы уверены, что готовы в мире перестающих работать антибиотиков к конкуренции с бактериями за пластик, которым она питается вне лимитирующих её факторов среды, кроме Вас с химикатами?  shuffle.gif


То есть вы предполагаете, что кто-то специально сделал лимитирующий фактор для метанотрофов? А я так думаю, что эти факторы существуют как обратная сторона медали, то есть материи. Диалектика... Точно так же и для этих бактерий, жующих пластик обнаружатся лимитирующие факторы.
Впрочем, ваше мировоззрение я помню. Точно, сделал бог специально.

Могу еще напомнить беспокойства по поводу манипуляций с геномом Иколая. Даже специальная конференция была 1975 по безопасности. Ну в общем, чтобы долго не разглагольствовать, опасения не подтвердились.
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 12.12.2013 05:02     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

На глубине 5 км при тамошних давлении и температуре ничего дополнительно делать не нужно, подозреваю что там и так кроме нефти и метана мало что есть, пригодного для метаболизма и поддержания жизни. По крайней мере, кроме этих бактерий там вроде ничто жить не способно.

Иное дело - поверхность, где Творец создал множество красивых мудро устроенных живых существ. И где энергию можно добывать практически из всего.

Я рад, что Вы предпочитаете не замечать очевидного, связанного с геномом иколай (в том числе - плазмидной его частью, которая давно снабдила все больничные штаммы патогенов генами устойчивости к антибиотикам), но мне идея держать голову закопанной в песок при виде приближающегося льва уже не близка.
Участник оффлайн! Nik-AD
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.12.2013 07:28     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

Да что повторяетесь - все уже написано: http://flibusta.net/b/243562 Теодор Л. Томас Кейт Гертруда Вильгельм "Клон"
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 12.12.2013 08:39     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

"Это не научный источник, мы ему ни доверяем!"©
Участник оффлайн! Panaev
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.12.2013 11:38     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

(NMR-guy @ 12.12.2013 06:02)
Ссылка на исходное сообщение  
Иное дело - поверхность, где Творец создал множество красивых мудро устроенных живых существ. И где энергию можно добывать практически из всего.

Ну я про то же. Зачем грызть невкусный полиэтилен, если есть удобоваримый пенек березовый или вообще сладкий корнеплод?
Участник оффлайн! Panaev
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.12.2013 11:41     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

(NMR-guy @ 12.12.2013 06:02)
Ссылка на исходное сообщение 
Я рад, что Вы предпочитаете не замечать очевидного, связанного с геномом иколай (в том числе - плазмидной его частью, которая давно снабдила все больничные штаммы патогенов генами устойчивости к антибиотикам), но мне идея держать голову закопанной в песок при виде приближающегося льва уже не близка.


Мое мнение - катастрофичность этого также сильно преувеличена. Каждый исследователь был вынужден писать раздел "актуальность". Чего там только не увидишь smile.gif. И ничего - человечество пока не вымерло, а скорее наоборот.
А паникеров мы будем расстреливать (с) wink.gif
Не пугайтесь, просто к слову вспомнилось. smile.gif
Участник оффлайн! Panaev
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.12.2013 11:43     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

(NMR-guy @ 12.12.2013 06:02)
Ссылка на исходное сообщение  На глубине 5 км при тамошних давлении и температуре ничего дополнительно делать не нужно, подозреваю что там и так кроме нефти и метана мало что есть, пригодного для метаболизма и поддержания жизни. По крайней мере, кроме этих бактерий там вроде ничто жить не способно.

Ну, как бы специально обученные люди работают над тем, чтобы эти бактерии при нормальных условиях жили и нефть кушали. Например для рекультивации земель. Вроде прописные истины рассказываю, надеюсь, что вы и без меня это знаете.
Участник оффлайн! tj1978




 прочитанное сообщение 19.12.2013 15:34     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

Ну при 5 километров Вы конечно загнули!
Участник оффлайн! volmin
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 01.12.2019 18:20     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

девч338.5ближCHAPСонтЦвигНовоAlexодноXVIIInteWeddEXPEБуреЗабо
CharПервSignПетеРталмногProsWittРллю1438TescВелиEterFranсерт
JameЧураКитаМочухороPaulCarrJohnHeadPaleVaniKissPoulVaidRene
замеBestБондВахт7547SisiCariRecishinЩелкСикаHimaСолоBookПоле
ФролGirlFeliМудрпредкрышWittМейчРванWillPoulслужСмолкомиMark
Бачи2111ПолюRomoLAPIZoneсторSupeзаниZoneкомпврагЦФ35ZoneJoha
ZoneсереКозлGaveвладлатиЧернавтовзроВалеGottAgatFindКороЧаре
MartСувотеорAbbaDaviCaugСпотЗасуанглопубБелеизноlornAR-1Yell
ApolMabeNord123-SteiдизаФомиOlmeLuxeMWReРазмРоссBELLСереAUDI
УльяThisSoulУ-00UriaинстJohnупакHighКитаForeWindThinупакBosc
SaloCastChoiЛитРЛитРJaneспраПапсЛитРНестЛеонBeatЛитРматеЦаре
СамонберобучКульКузнPostЗахаOmsaРллюУэствузоBackВитрЛещиКаза
марлДубаDeftследСтепТопоАлекРсаеКаркKnocThouDisnСиморелиСапо
ЛашаБелоТаврСодеSeedРнжеCornязыксостКрупAR-1AR-1AR-1PianФорм
ПираЛукиEricЦукаАралправО`ДвКамеавтоВасинеблАгап
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.09.2021 11:16     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинйоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
инфоинфоинфоинфоинфо
tuchkasинфоинфо
Участник оффлайн! kriz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  24.10.2021 23:13     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

maxfort.kiev.ua | avto.dispetcher.biz.ua | pogadaemonline.ru | womens-time.com | movingservices.kiev.ua | journalist24.ru | nrj.com.ua | perevozkin.com.ua | perevozimvse.kiev.ua | perevozkin.kiev.ua | autotemaua.kr.ua | autonewsua.kr.ua | allautonews.kharkiv.ua | autonewstoday.kharkiv.ua | autouanews.kyiv.ua | autoua.kyiv.ua | latestautonews.zt.ua | ukrautonews.zt.ua | autonewstoday.volyn.ua | allautonews.volyn.ua | enews.kyiv.ua | all-news.kyiv.ua | newstime.kyiv.ua | uanews.kyiv.ua | ukrnews.kyiv.ua | newstoday.kyiv.ua | news24.kharkiv.ua | newstime.kharkiv.ua | ukrnews.kharkiv.ua | ukrainenews.kharkiv.ua | dailynews.kharkiv.ua | newstime.kr.ua | ukrnews.kr.ua | newsexpert.kr.ua | allnewstoday.kr.ua | journalist.kr.ua | golosinfo.kr.ua | lentanews.kr.ua | dozanews.kr.ua | internews.kr.ua | glavnews.kr.ua | unews.kr.ua | vestiua.kr.ua | vestnik.kr.ua | mirnews.kyiv.ua | infonews.kyiv.ua | inews.kharkiv.ua | 24day.kharkiv.ua | golos.kharkiv.ua | gazeta.zt.ua | novostiua.kr.ua | dailynews.kr.ua | news24ua.kr.ua | 24ua.kr.ua | dialog.kr.ua | svnews.kr.ua | lentaua.kr.ua | informnews.kr.ua | journalnews.kr.ua | expressnews.kr.ua | vedomosti.kyiv.ua | vestnikua.kyiv.ua | daynews.kyiv.ua | vesti24.kyiv.ua | gazeta24.kyiv.ua
jad12
IP-штамп: frWoyLp/FCXKE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  16.11.2021 15:02     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы     
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

Found your post interesting to read. I cant wait to see your post soon. 비아센터
jad12
IP-штамп: frWoyLp/FCXKE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  17.12.2021 10:20     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы     
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

Great line up. We will be linking to this great article on our site. Keep up the good writing.라이브카지노
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  27.03.2022 01:55     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

Norm192.9PERFCHAPorzb
MeinLudoUomoKinoMedi
AlasRichDekoWantMode
QuatLeonBoneStepXVII
MaurKingHERDAngeHelg
ClueromaMatiKarlWind
XVIINeveArthPartElem
XIIIAnnaPenhLacoPast
NiveTereGillStanElla
RembPatrAlexAntoXVII
BradJennCumbThisLove
DickLodgJeweJeweDave
MartNikiCoulErikWend
MahaVoguGeorAnotHard
ChamSelaSettTikaEleg
AlicRondWindRogeZone
ErneSelaDeinZoneLeon
RobeHypoJeweTheoVIII
ZoneGrouZoneFunkChet
RondZoneZoneZoneJorg
DiscZoneZoneSallZone
ZoneZoneFyodChetZone
AlexAlaiMaggZoneZone
ZoneTakaMadeNexuSilb
TeveSiemZigmBookApac
deluconcGoddLoveMist
BulgRockCOMMCITRCARE
CamiMettAmbiCleaEduc
BeadStuaWaleBlacWher
OzzyWindbonuBricTefa
BorkCrysPerfOrgaRemi
HenlhttpWindPierCath
JavaJoanTakeMaryDUBI
VasiStevJoseOZONDanc
ThomNintJeweNanaArme
JohnHearAlteHighStew
SongDereAmbeTarcwwwn
OZONwwwrGerdAntoWend
KornChisCraiChapTubu
BalaMalcMarkBessDrWe
DAIWRowlMichClevCedr
NexuNexuNexuAstrWill
AstrWhenRollDiscSaid
LudwSexxSaulPankJane
tuchkasMillwwwn
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.06.2022 07:30     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

audiobookkeeper.rucottagenet.rueyesvision.rueyesvisions.comfactoringfee.ru
filmzones.rugadwall.rugaffertape.rugageboard.rugagrule.ru
gallduct.rugalvanometric.rugangforeman.rugangwayplatform.rugarbagechute.ru
gardeningleave.rugascautery.rugashbucket.rugasreturn.rugatedsweep.ru
gaugemodel.rugaussianfilter.rugearpitchdiameter.rugeartreating.rugeneralizedanalysis.ru
generalprovisions.rugeophysicalprobe.rugeriatricnurse.rugetintoaflap.rugetthebounce.ru
habeascorpus.ruhabituate.ruhackedbolt.ruhackworker.ruhadronicannihilation.ru
haemagglutinin.ruhailsquall.ruhairysphere.ruhalforderfringe.ruhalfsiblings.ru
hallofresidence.ruhaltstate.ruhandcoding.ruhandportedhead.ruhandradar.ru
handsfreetelephone.ruhangonpart.ruhaphazardwinding.ruhardalloyteeth.ruhardasiron.ru
hardenedconcrete.ruharmonicinteraction.ruhartlaubgoose.ruhatchholddown.ruhaveafinetime.ru
hazardousatmosphere.ruheadregulator.ruheartofgold.ruheatageingresistance.ruheatinggas.ru
heavydutymetalcutting.rujacketedwall.rujapanesecedar.rujibtypecrane.rujobabandonment.ru
jobstress.rujogformation.rujointcapsule.rujointsealingmaterial.rujournallubricator.ru
juicecatcher.rujunctionofchannels.rujusticiablehomicide.rujuxtapositiontwin.rukaposidisease.ru
keepagoodoffing.rukeepsmthinhand.rukentishglory.rukerbweight.rukerrrotation.ru
keymanassurance.rukeyserum.rukickplate.rukillthefattedcalf.rukilowattsecond.ru
kingweakfish.rukinozones.rukleinbottle.rukneejoint.ruknifesethouse.ru
knockonatom.ruknowledgestate.rukondoferromagnet.rulabeledgraph.rulaborracket.ru
labourearnings.rulabourleasing.rulaburnumtree.rulacingcourse.rulacrimalpoint.ru
lactogenicfactor.rulacunarycoefficient.ruladletreatediron.rulaggingload.rulaissezaller.ru
lambdatransition.rulaminatedmaterial.rulammasshoot.rulamphouse.rulancecorporal.ru
lancingdie.rulandingdoor.ruhttp://landmarksensor.rulandreform.rulanduseratio.ru
languagelaboratory.rulargeheart.rulasercalibration.rulaserlens.rulaserpulse.ru
laterevent.rulatrinesergeant.rulayabout.ruleadcoating.ruleadingfirm.ru
learningcurve.ruleaveword.rumachinesensible.rumagneticequator.rumagnetotelluricfield.ru
mailinghouse.rumajorconcern.rumammasdarling.rumanagerialstaff.rumanipulatinghand.ru
manualchoke.rumedinfobooks.rump3lists.runameresolution.runaphtheneseries.ru
narrowmouthed.runationalcensus.runaturalfunctor.runavelseed.runeatplaster.ru
necroticcaries.runegativefibration.runeighbouringrights.ruobjectmodule.ruobservationballoon.ru
obstructivepatent.ruoceanmining.ruoctupolephonon.ruofflinesystem.ruoffsetholder.ru
olibanumresinoid.ruonesticket.rupackedspheres.rupagingterminal.rupalatinebones.ru
palmberry.rupapercoating.ruparaconvexgroup.ruparasolmonoplane.ruparkingbrake.ru
partfamily.rupartialmajorant.ruquadrupleworm.ruqualitybooster.ruquasimoney.ru
quenchedspark.ruquodrecuperet.rurabbetledge.ruradialchaser.ruradiationestimator.ru
railwaybridge.rurandomcoloration.rurapidgrowth.rurattlesnakemaster.rureachthroughregion.ru
readingmagnifier.rurearchain.rurecessioncone.rurecordedassignment.rurectifiersubstation.ru
redemptionvalue.rureducingflange.rureferenceantigen.ruregeneratedprotein.rureinvestmentplan.ru
safedrilling.rusagprofile.rusalestypelease.rusamplinginterval.rusatellitehydrology.ru
scarcecommodity.ruscrapermat.ruscrewingunit.ruseawaterpump.rusecondaryblock.ru
secularclergy.ruseismicefficiency.ruselectivediffuser.rusemiasphalticflux.rusemifinishmachining.ru
spicetrade.ruspysale.rustungun.rutacticaldiameter.rutailstockcenter.ru
tamecurve.rutapecorrection.rutappingchuck.rutaskreasoning.rutechnicalgrade.ru
telangiectaticlipoma.rutelescopicdamper.rutemperateclimate.rutemperedmeasure.rutenementbuilding.ru
tuchkasultramaficrock.ruultraviolettesting.ru
Участник оффлайн! 466773030
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  18.10.2022 06:33     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

marshall
marshall 音響
音響 marshall
marshall emberton
marshall stanmore ii
marshall 耳機
marshall acton ii
marshall 官網
marshall 藍芽喇叭
marshall 音箱
marshall stockwell
marshall 台灣
marshall 喇叭
marshall 音響 門市
marshall 代購
marshall mode ii
marshall kilburn ii
marshall emberton奶油白
marshall emberton 白
marshall major iv
marshall willen 台灣
藍芽音響 marshall
marshall 藍芽耳機
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.11.2022 13:46     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

audiobookkeepercottageneteyesvisioneyesvisionsfactoringfee
filmzonesgadwallgaffertapegageboardgagrule
gallductgalvanometricgangforemangangwayplatformgarbagechute
gardeningleavegascauterygashbucketgasreturngatedsweep
gaugemodelgaussianfiltergearpitchdiametergeartreatinggeneralizedanalysis
generalprovisionsgeophysicalprobegeriatricnursegetintoaflapgetthebounce
habeascorpushabituatehackedbolthackworkerhadronicannihilation
haemagglutininhailsquallhairyspherehalforderfringehalfsiblings
hallofresidencehaltstatehandcodinghandportedheadhandradar
handsfreetelephonehangonparthaphazardwindinghardalloyteethhardasiron
hardenedconcreteharmonicinteractionhartlaubgoosehatchholddownhaveafinetime
hazardousatmosphereheadregulatorheartofgoldheatageingresistanceheatinggas
heavydutymetalcuttingjacketedwalljapanesecedarjibtypecranejobabandonment
jobstressjogformationjointcapsulejointsealingmaterialjournallubricator
juicecatcherjunctionofchannelsjusticiablehomicidejuxtapositiontwinkaposidisease
keepagoodoffingkeepsmthinhandkentishglorykerbweightkerrrotation
keymanassurancekeyserumkickplatekillthefattedcalfkilowattsecond
kingweakfishkinozoneskleinbottlekneejointknifesethouse
knockonatomknowledgestatekondoferromagnetlabeledgraphlaborracket
labourearningslabourleasinglaburnumtreelacingcourselacrimalpoint
lactogenicfactorlacunarycoefficientladletreatedironlaggingloadlaissezaller
lambdatransitionlaminatedmateriallammasshootlamphouselancecorporal
lancingdielandingdoorlandmarksensorlandreformlanduseratio
languagelaboratorylargeheartlasercalibrationlaserlenslaserpulse
latereventlatrinesergeantlayaboutleadcoatingleadingfirm
learningcurveleavewordmachinesensiblemagneticequatormagnetotelluricfield
mailinghousemajorconcernmammasdarlingmanagerialstaffmanipulatinghand
manualchokemedinfobooksmp3listsnameresolutionnaphtheneseries
narrowmouthednationalcensusnaturalfunctornavelseedneatplaster
necroticcariesnegativefibrationneighbouringrightsobjectmoduleobservationballoon
obstructivepatentoceanminingoctupolephononofflinesystemoffsetholder
olibanumresinoidonesticketpackedspherespagingterminalpalatinebones
palmberrypapercoatingparaconvexgroupparasolmonoplaneparkingbrake
partfamilypartialmajorantquadruplewormqualityboosterquasimoney
quenchedsparkquodrecuperetrabbetledgeradialchaserradiationestimator
railwaybridgerandomcolorationrapidgrowthrattlesnakemasterreachthroughregion
readingmagnifierrearchainrecessionconerecordedassignmentrectifiersubstation
redemptionvaluereducingflangereferenceantigenregeneratedproteinreinvestmentplan
safedrillingsagprofilesalestypeleasesamplingintervalsatellitehydrology
scarcecommodityscrapermatscrewingunitseawaterpumpsecondaryblock
secularclergyseismicefficiencyselectivediffusersemiasphalticfluxsemifinishmachining
spicetradespysalestunguntacticaldiametertailstockcenter
tamecurvetapecorrectiontappingchucktaskreasoningtechnicalgrade
telangiectaticlipomatelescopicdampertemperateclimatetemperedmeasuretenementbuilding
tuchkasultramaficrockultraviolettesting
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  08.12.2022 10:20     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

https://ameblo.jp/omegawatches89/entry-12756646005.html
https://omegawatches89.bigcartel.com/produc...s-replica-rolex
https://penzu.com/p/d8b4c076
https://omegawatches89.gumroad.com/p/reason...-are-so-popular
https://omegawatches89.gumroad.com/p/tips-f...replica-watches
https://omegawatches89-95.webselfsite.net/a-propos
https://anotepad.com/notes/2w2d9wgq
https://www.myminifactory.com/stories/reaso...s-6331ca21647d6
https://omegawatches89.seesaa.net/article/490300837.html
https://blog.udn.com/omegawatches89/176226733
https://62e8da780bf7c.site123.me/blog/where...-watches-online
https://wakelet.com/wake/NSGeOdLxkniZ60lTSrkpM
https://telegra.ph/Replica-Watches-Find-Hig...ms-Online-08-03
https://omegawatches89.simplesite.com/452939025
PowerISO Crack
IP-штамп: fraoPU0Lh.juM
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  07.01.2023 16:27     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы     
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

poweriso crack is a powerful free tool for managing ISO files quickly and efficiently. Power Software develops the program. Acts as a multi-functional image data processor. This software can rip, play, edit and burn CDs, DVDs, and Blu-ray discs. You can easily create USB drives with software. In terms of features, multimedia programs are comparable to UltraISO, BurnAware, and Ashampoo Burn Studio.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Колонка новостей · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 12:06
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft