Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* выделение нейтрофилов на перколе
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Zanuda




 прочитанное сообщение 26.07.2013 16:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Здравствуйте.Кто нибудь мне может объяснить почему на перколе выходит два кольца-одно нейтрофилы а другое лимфоциты с моноцитами.А на фиколе даже играя с плотностью я получаю только лимфоциты с моноцитами а нейтрофилы уходят в осадок с эритроцитами.
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 26.07.2013 18:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Это не правильное объяснение, а гипотеза.

Допустим, что нейтрофилы могут взаимодействовать с фиколлом(как никак, а полисахарид) в этом случае фиколл будет выступать коагулянтом для нейтрофилов. Они будут слипаться в большие конгломераты и выпадать в осадок.
Участник оффлайн! Pharmaсol
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.07.2013 22:26     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

А перколл как готовите? Два разных градиента в одной пробирке?
Если один, то скорее всего if a large volume of e.g. blood is
layered on top of Percoll and centrifuged, the cells pull serum through the Percoll layer
and form a continuous gradient.
Иначе нейтрофилы садятся с эритроцитами.
Для отделения нейтрофилов на фиколле надо 2 градиента 1077 и 1119, на разделе градиентов и будут сидеть нейтрофилы.

Сообщение было отредактировано Pharmaсol - 26.07.2013 22:29
Участник оффлайн! Zanuda




 прочитанное сообщение 02.08.2013 11:41     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Пробывал.Не получается с двумя градиентами.Нейтрофилы уходят в эритроциты на фиколе.
Участник оффлайн! Pharmaсol
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 02.08.2013 22:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

странно, не должны проскакивать, не примомню у нас такое, правда пользовались мы сигмовскими гистопаками
видимо что-то не так с градиентами, либо условия ЦФ не подходящие
Участник оффлайн! Cheri




 прочитанное сообщение 02.08.2013 22:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Можно попробовать:
Polymorphprep™Application : Granulocytes separation (PMNs) from non diluted human blood. Ready to use solution, GMP product. Dextran 500: 8.0% (w/v) Density: 1.113 ± 0.001 g/ml Osmolality: 445 ± 15 mOsm Endotoxins: 0.13 EU/ml (threshold < 1.0 EU/ml)

http://www.proteogenix-antibody.com/sc-Cel...uct_Type,0.html
Участник оффлайн! Алексей Соколов
Постоянный участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 09.08.2013 11:27     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

С выделением нейтрофилов на двух плотностях фиккола есть несколько ключевых моментов, которые могут существенно повлиять на результат: 1. Не используйте гепарин в качестве антикоагулянта, он активирует нейтрофилы - подходит ЭДТА, а лучше цитрат. 2. Разбавляйте кровь перед нанесением на градиент 1:1 физ раствором. 3. Откручивание на центрифуге с охлаждением приводит к активации тромбоцитов, которые слипаются с нейтрофилами и утаскивают их в осадок к эритроцитам. Обратите внимание - прозрачная или мутная у нас плазма после центрифугирования - если прозрачная, то тромбоциты утащили нейтрофилы вниз.

Сообщение было отредактировано Алексей Соколов - 09.08.2013 11:27
Участник оффлайн! Egor-Odessa




 прочитанное сообщение 04.09.2013 11:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(Алексей Соколов @ 09.08.2013 12:27)
Ссылка на исходное сообщение  С выделением нейтрофилов на двух плотностях фиккола есть несколько ключевых моментов, которые могут существенно повлиять на результат: 1. Не используйте гепарин в качестве антикоагулянта, он активирует нейтрофилы - подходит ЭДТА, а лучше цитрат. 2. Разбавляйте кровь перед нанесением на градиент 1:1 физ раствором. 3. Откручивание на центрифуге с охлаждением приводит к активации тромбоцитов, которые слипаются с нейтрофилами и утаскивают их в осадок к эритроцитам. Обратите внимание - прозрачная или мутная у нас плазма после центрифугирования - если прозрачная, то тромбоциты утащили нейтрофилы вниз.



речь идет о гепарине, раскапанном вручную по пробиркам? дело в том, что ряд иностранных статей для исследования фагоцитоза в клинических целях рекомендует брать только гепарин.
guest: Михаил
IP-штамп: frStLqL5.YgBU
гость



 прочитанное сообщение 05.09.2013 13:51     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Обычно выделяю нейтрофилы на фиколе 1119 (2 мл на дно пробирки) затем аккуратно по стенке маленькой струйкой наслаиваю фиколл 1077 (2 мл), затем аккуратно наслаиваю 8 мл крови (для пробирки 15 мл). Разводить или не разводить кровь - решайте сами, получается и так и так. Откручиваю на 3000 обороток минут 30. Собираю кольцо нейтрофилов. Отмываю от фикола 2 раза в DPBS. Насчет гепарина, EDTA, цитрата и других кончервантов - на EDTA получается лучше чем на гепарине, но чтобы уж совсем не получилось..... Наверно у Вас растворы были разной температуры, доведите кровь и градиенты до одной темпетаруты.
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  06.12.2021 16:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

https://replicawatches24.tumblr.com/post/64...lica-watches-uk
https://ello.co/replicawatchesuk/post/ubut9ig9g4glx-q6nyphka
https://www.evernote.com/shard/s451/client/...%2BWatches%2BUK
https://www.bloglovin.com/@rolexrelicawatch...replica-watches
https://www.designspiration.com/watcheshutuk/saves/
https://write.as/fakerolexwatches/hints-to-...lica-watches-uk
https://www.dailystrength.org/journals/hint...lica-watches-uk
https://issuu.com/replicawatchesuk/docs/dif...he_replica_watc
https://www.keepandshare.com/discuss2/5601/...lica-watches-uk
https://penzu.com/public/9e250377
https://bestreplicawatc.livejournal.com/336.html
https://www.pearltrees.com/replicawatchesuk/item349627941
https://www.intensedebate.com/people/watches24
https://anonfiles.com/N039Qf66q9/Guide_On_H...atch_Online_pdf
nigoal123
IP-штамп: frXqkB4MpP2jQ
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.05.2022 08:33     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

Not only do we put nigoal students under pressure ลิงค์รับทรัพย์ to master the inconsistent sexy gaming spelling patterns and complex สล็อต grammar of the English language ka gaming but we require them to know

The best way to help our 123goal students to overcome the 11hilo challenge of writing in any 123bets want to read it. pggame123 genre is to help them to break big gaming things down into their component
nigoal123
IP-штамп: frGvfkzt/vMtQ
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.05.2022 12:44     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

Use subheadings to nigoal break up the text and make ลิงค์รับทรัพย์ clear paragraphs. sexy gaming Write in a semi-informal dream gaming conversational style. ka gaming And make sure there is organisation

The planning stage is 123goal brainstorming ideas and 11hilo challenge of writing in any 123bets choose the best three or four. pggame123 Think what your subheadings big gaming write a short introduction

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 12:03
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft