Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Zanuda |
|
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
Допустим, что нейтрофилы могут взаимодействовать с фиколлом(как никак, а полисахарид) в этом случае фиколл будет выступать коагулянтом для нейтрофилов. Они будут слипаться в большие конгломераты и выпадать в осадок. |
Pharmaсol Постоянный участник |
Если один, то скорее всего if a large volume of e.g. blood is layered on top of Percoll and centrifuged, the cells pull serum through the Percoll layer and form a continuous gradient. Иначе нейтрофилы садятся с эритроцитами. Для отделения нейтрофилов на фиколле надо 2 градиента 1077 и 1119, на разделе градиентов и будут сидеть нейтрофилы. Сообщение было отредактировано Pharmaсol - 26.07.2013 22:29 |
Zanuda |
|
Pharmaсol Постоянный участник |
видимо что-то не так с градиентами, либо условия ЦФ не подходящие |
Cheri |
Polymorphprep™Application : Granulocytes separation (PMNs) from non diluted human blood. Ready to use solution, GMP product. Dextran 500: 8.0% (w/v) Density: 1.113 ± 0.001 g/ml Osmolality: 445 ± 15 mOsm Endotoxins: 0.13 EU/ml (threshold < 1.0 EU/ml) |
Алексей Соколов Постоянный участник Санкт-Петербург |
Сообщение было отредактировано Алексей Соколов - 09.08.2013 11:27 |
Egor-Odessa |
(Алексей Соколов @ 09.08.2013 12:27) С выделением нейтрофилов на двух плотностях фиккола есть несколько ключевых моментов, которые могут существенно повлиять на результат: 1. Не используйте гепарин в качестве антикоагулянта, он активирует нейтрофилы - подходит ЭДТА, а лучше цитрат. 2. Разбавляйте кровь перед нанесением на градиент 1:1 физ раствором. 3. Откручивание на центрифуге с охлаждением приводит к активации тромбоцитов, которые слипаются с нейтрофилами и утаскивают их в осадок к эритроцитам. Обратите внимание - прозрачная или мутная у нас плазма после центрифугирования - если прозрачная, то тромбоциты утащили нейтрофилы вниз. речь идет о гепарине, раскапанном вручную по пробиркам? дело в том, что ряд иностранных статей для исследования фагоцитоза в клинических целях рекомендует брать только гепарин. |
guest: Михаил IP-штамп: frStLqL5.YgBU гость |
|
nigoal123 IP-штамп: frXqkB4MpP2jQ гость |
The best way to help our |
nigoal123 IP-штамп: frGvfkzt/vMtQ гость |
The planning stage is |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |