Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
yanovskaya |
1. Акриламид 2х перекристаллизованный (2К), не менее 98%, для электрофореза, Standard grade, extrapure, 500 г; 2. Акриламид 4х перекристаллизованный (4К), не менее 99,9%, для электрофореза, ultrapure, 500 г; 3. Аммоний персульфат (надсернокислый), для электрофореза, >98%, 250 г; 4. Бромфеноловый голубой (200- 350 п.о.), сод. красящего в-ва не менее 95%, Импорт, 25 г; 5. Глицин, molecular biology grade, 99.5%, 500 г; 6. Дитиотреитол-DL, >100 %, Импорт, 5 г; 7. Масло минеральное, для Protean i12 IEF и Protean IEF systems, 500 мл; 8. Метилен-бис-акриламид, более 99%, Mol bio grade, 50 г; 9. Мочевина, для электрофореза, 500 г; 10. Натрия додецилсульфат, >99%, BioChemical, 250 г; 11. Стрип IPG готовый, 7 см, pH 3-10 NL, 12 шт/уп, 1 уп; 12. Стрип IPG готовый, 7 см, pH 3–10, 12 шт/уп, 1 уп; 13. ТЕМЕД, 25 мл; 14. Трис гидрохлорид, Molecular biology grade, 250 г; 15. Трис(гидроксиметил)аминометан, не менее 99,0 % 100 г; 16. ЧАПС, не более 99%, 5 г. Сообщение было отредактировано yanovskaya - 17.05.2019 05:49 |
MMM Постоянный участник |
И совершенно непонятно чем вы собираетесь красить(выявлять) белки. Кумаси ярко синий хотя бы предусмотреть надо. Маркер мол весов белковый нужен. Ну по мелочи - глицерин к примеру. И зачем вам два акриламида? Берите какой-нибудь один. |
vooden |
(MMM @ 17.05.2019 08:32) Соляная кислота - прекурсор. Если лаборатория уже не работает с прекурсорами, то ради одной соляной кислоты заводить систему учета нерационально. Лучше по таблицам мешать хлорид и гидрооксид. |
MMM Постоянный участник |
(vooden @ 17.05.2019 09:24) Какой ужас!!!!! Ну собственно если лаборатория не работает с третьей таблицей четвертого списка, то это вроде как и не лаборатория, а офис. Однако! Даже если и не работают. Можно использовать 10-12% солянку, которая прекурсором не является. Таблиц для трисовых буферов для фореза в справочниках нет. А что бы одни справочные данные пересчитать в другие - боюсь у таких специалистов будут проблемы. |
Asterix Постоянный участник |
Ну и как сказали , кумасси и маркеры мол-веса. Берите крашеные , которые видно в геле , точный молекулярный вес по маркерам все равно не определить, это индикатор скорее. Ну и кумасси для окраски геля растворяют в уксусной кислоте с метанолом и этим же составом и отмывают. Поетому их необходимо довольно много, даже если и рециклировать .. Ну по 5 литров закажите для начала. |
dk Постоянный участник Россия |
Для фореза АкА не нужен высокой чистоты, возмите 2Х - хватит более чем. ПерАм и ТЕМЕД очень много (если только про запас, но персульфат это не очень любит). Если проблемы с солянкой - можно на трис-ЭДТА-борате работать, но он не для всех ферментов подходит. Маркер белковых весов (не знаю, правда, с какими вы будете работать) можно "дёшево и сердито" на альбумины заменить. |
MMM Постоянный участник |
(dk @ 17.05.2019 21:01) Это не правда. Акриламид нужен хороший(это не значит, что на нем должно быть обязательно написано: electrophoresis grade). Просто, покупая акриламид какой-нибудь для оргсинтеза. Можно нарваться как на великолепный, так и на ужасный препарат. А вот electrophoresis grade может быть не блестящим, но плохи не бывает. А то, что плохой акриламид есть причина размытых и хвостящих белковых зон - это медицинский факт. |
Asterix Постоянный участник |
|
yanovskaya |
|
Blaid Постоянный участник |
Если только форезом ограничиваться не собираетесь, то для продолжения понадобятся дополнительные реактивы и расходники. А вариантов прокраски гелей (и их последующей отмывки) существует достаточно много. Есть такие, где нужны уксусная к-та и метанол, а есть такие, где понадобится что-то другое (или к уксусной и метанолу нужно будет что-то ещё, например медный купорос для контрастирования и повышения чувствительности). Аналогом дитиотрейтола может быть бета-меркаптоэтанол (хотя он не очень удобен в работе из-за вонючести). Сообщение было отредактировано Blaid - 20.05.2019 15:30 |
yanovskaya |
Но на данные момент необходимо поставить методику оценки изоформ цитохрома P450. Дальше планируем проводить масс-спектрометрический анализ. Есть масс с ионной ловушкой и MALDI. Буду все пробовать. |
MMM Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
|
TAMARA5 Участник |
|
Fritz Постоянный участник Москва |
Если лаборатория/институт располагают имейджером (на манер ChemiDoc XRS+), то для целей высокой протеомики, вместо колдовства с окрасками-отмывками, можно с успехом использовать 2,2,2-трихлорэтанол и счастью не будет предела |
Asterix Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
(Asterix @ 24.05.2019 00:37) 2,2,2-трихлорэтанол - это отличный наркотик... весьма пролонгированного действия... Если будет возможность купить за грант и оформить на таможне как научный реактив, ... берите литрами ... потом все окупите сторицей А вы не попутали его с хлораль гидратом. Трихлорэтанол относительно лабилен и склонен выделять HCl, так что он скорее язву желудка может вызвать, чем наркотическое опьянение.
|
Fritz Постоянный участник Москва |
(Asterix @ 23.05.2019 22:37) 2,2,2-трихлорэтанол - это отличный наркотик... весьма пролонгированного действия... Если будет возможность купить за грант и оформить на таможне как научный реактив, ... берите литрами ... потом все окупите сторицей Что-то и правда не в ту степь, ибо....c трихлофосом Вы его перепутали, очевидно Упрощенная матчасть: |
Daemonarchestratygos Постоянный участник |
(MMM @ 17.05.2019 05:32) А если у них рН-метра нет, с Tris-совместимым электродом? |
dk Постоянный участник Россия |
Сообщение было отредактировано dk - 30.05.2019 20:14
|
MMM Постоянный участник |
(Daemonarchestratygos @ 30.05.2019 20:37) А если у них весов нет и мерных цилиндров?..... ? Да, и "трис совместимые электроды" - это миф, выдуманный маркеторасами. Сообщение было отредактировано MMM - 31.05.2019 11:57
|
valiksharov |
(MMM @ 31.05.2019 12:52) А если у них весов нет и мерных цилиндров?..... ? Да, и "трис совместимые электроды" - это миф, выдуманный маркеторасами. вот тут днк можно быстро гнать в воде |
Daemonarchestratygos Постоянный участник |
(dk @ 30.05.2019 18:13) Можно у Досона в справочнике биохимика посмотреть объёмные прописи для нужного pH трис-HCl. Я так сто лет уже его не титрую - и всё ОК. Книжки для этого и пишутся. |
vb Постоянный участник |
(MMM @ 31.05.2019 09:52) А если у них весов нет и мерных цилиндров?..... ? Да, и "трис совместимые электроды" - это миф, выдуманный маркеторасами. Ну вообще справедливости ради, если нормальные реактивы, то смешивая основной и гидрохлорид, мы получаем более стабильные результаты. Так как меньше возможности ошибки совершить. Правильно титровать и измерять рН еще нужно научить и не всегда это получается. Лаборанты ну очень разные бывают. таблицы были прям в каталоге сигмы |
R-J-Dio Постоянный участник |
|
hopfen Участник |
(MMM @ 17.05.2019 08:32) Тиомочевина нужна. трис солянокислый не нужен, а вот соляная кислота нужна. Еще агарозки немного. И совершенно непонятно чем вы собираетесь красить(выявлять) белки. Кумаси ярко синий хотя бы предусмотреть надо. Маркер мол весов белковый нужен. Ну по мелочи - глицерин к примеру. И зачем вам два акриламида? Берите какой-нибудь один. |
Alex1979 Россия |
|
Arbeiter-Samaritier-Bund |
(Alex1979 @ 19.07.2019 15:02) Добрый день. Коллеги, хочу приобрести ЦЕ (пептидные карты и многое другое). Выбираю между двумя производителями Сциех ЦЕСИ8000Плус и Агилент 7100 с возможность подключения к мс-мс. Последний привлекательнее по цене. Но, хотелось бы услышать мнения тех, кто работал с ними. Стоит ли переплачивать? Очень важен качественный сервис и аппликационная поддержка. На Сциех получили предложение от двух фирм М-спектр и Альгимед, кто сталкивался с ними? Агилент в свое время меня достал уебисчем в виде ДНК микроаррев с капами Агилента не работал но с микроарреями и сканнерами Агилент 7100 с Ваамсчето Агилент исcторичесcки американсcкие електрики которых ешо током не убило |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |