Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
OlgaGen |
прошу помочь советом, кто сталкивался с данной проблемой: выделила ядра из замороженной ткани, отмыла в PBS, добавила антител на ядерный белок, и поставила инкубацию на ночь. После инкубации нужно было отмыть от первичных антител - поставила крутиться на 300g 10 минут и.. около 90% ядер оказалось склеено в несуспендируемый осадок!! У кого такое было? Как этого избежать? Спасибо! |
Митин Постоянный участник |
О том, что ядра и без антител склеиваются, я уже не буду, такой осадок хоть как-то разбивается. |
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(OlgaGen @ 26.04.2013 15:52) Уважаемые коллеги, прошу помочь советом, кто сталкивался с данной проблемой: выделила ядра из замороженной ткани, отмыла в ПБС, добавила антител на ядерный белок, и поставила инкубацию на ночь. После инкубации нужно было отмыть от первичных антител - поставила крутиться на 300г 10 минут и.. около 90% ядер оказалось склеено в несуспендируемый осадок!! У кого такое было? Как этого избежать? Спасибо! "выделила ядра из замороженной ткани, отмыла в ПБС" зачем вам ядра для для антител на ядерный белок - прекрасно антитела на ядерный белок лезут в фиксированные колетки |
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(OlgaGen @ 26.04.2013 15:52) Уважаемые коллеги, прошу помочь советом, кто сталкивался с данной проблемой: выделила ядра из замороженной ткани, отмыла в ПБС, добавила антител на ядерный белок, и поставила инкубацию на ночь. После инкубации нужно было отмыть от первичных антител - поставила крутиться на 300г 10 минут и.. около 90% ядер оказалось склеено в несуспендируемый осадок!! У кого такое было? Как этого избежать? Спасибо! ПБС даже без ЕДТА - уберет вам магний - и ваше ядро растворится |
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(OlgaGen @ 26.04.2013 15:52) Уважаемые коллеги, прошу помочь советом, кто сталкивался с данной проблемой: выделила ядра из замороженной ткани, отмыла в ПБС, добавила антител на ядерный белок, и поставила инкубацию на ночь. После инкубации нужно было отмыть от первичных антител - поставила крутиться на 300г 10 минут и.. около 90% ядер оказалось склеено в несуспендируемый осадок!! У кого такое было? Как этого избежать? Спасибо! магний или спермин-спермидин во всех буфферах для ядер |
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
|
nigoal123 IP-штамп: fr/1ZkUsuBQOE гость |
it sets the tone for |
nigoal123 IP-штамп: frpXPq5TOmUHs гость |
They are writing their |
guest: 123 IP-штамп: frJhOCvSv9ICE гость |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |