Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Антон Пушкин |
|
genseq Постоянный участник |
|
Mykhaylo Постоянный участник Україна |
И что есть "полимераза"? Taq небось? Так лучше что-то повеселее XL взять.
|
ksm Постоянный участник |
|
Антон Пушкин |
|
R.J.Dio Постоянный участник |
|
Mykhaylo Постоянный участник Україна |
(R.J.Dio @ 22.01.2017 22:24) А почему бы и нет - работы на 2 дня, реактивы рутинные и копеечные (ну может придется самому пудру аммония сульфата растереть в ступке), фермента с 500 мл на 5-6 лет для всякой рутинной муры и студентов
|
ksm Постоянный участник |
(Mykhaylo @ 23.01.2017 13:38) А почему бы и нет - работы на 2 дня, реактивы рутинные и копеечные (ну может придется самому пудру аммония сульфата растереть в ступке), фермента с 500 мл на 5-6 лет для всякой рутинной муры и студентов так держать! желаю искренней удачи в получении! в протоколах молбиол также валялась рукопись по определению активности полимеразы! но она же не испортит вам кухонного счастливого настроения! еееееееее!!!!! |
Mykhaylo Постоянный участник Україна |
А точная активность тага вам сильно нужна? Методом тыка за 2 прогонки подбирались на хорошо работающих системах паралельно с фирменным и все. Используется, повторюсь, для всякой рутины типа скринов колоний и пр, хотя если 1:100 смешать с чем-то корректирующим, то и для сиквенсов тоже норм шло в 90х |
ksm Постоянный участник |
|
genseq Постоянный участник |
(Антон Пушкин @ 20.01.2017 16:09) Всем привет! Занимался ли кто из Вас получением полимеразы из E.coli XL1–Blue. Как получать компетентные клетки? Проводить трансфекцию? как выделять полимеразу из биомассы клеток?
|
genseq Постоянный участник |
(ksm @ 23.01.2017 13:08) $99 за плазмиду: $65 за косячок: Сообщение было отредактировано genseq - 25.01.2017 16:38
|
Антон Пушкин |
(genseq @ 25.01.2017 17:16) $99 за плазмиду: $65 за косячок: Спасибо!!! |
R.J.Dio Постоянный участник |
|
Veshka Постоянный участник Москва |
|
R.J.Dio Постоянный участник |
Сообщение было отредактировано R.J.Dio - 30.01.2017 12:03 |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Сообщение было отредактировано -Ъ- - 30.01.2017 11:16 |
genseq Постоянный участник |
(-Ъ- @ 30.01.2017 09:16) Никогда не приходило в голову самому выделять полимеразы, ну а как пользователь имею дело с несколькими десятками миллионов единиц в год. Не приходило, и теперь не пришло? |
kb1 Участник |
(genseq @ 30.01.2017 18:30) Во времена Мао Китай вышел на первое место по производству чугуна. В каждой деревне была своя плавильня. Ну, если делать нечего, времени полно, а денег мало, то можно и полимеразу выделить, и фенол перегнать, и... |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Просвещайся, молодое поколено! В СССР так работали.
|
pApA2017 |
(R.J.Dio @ 26.01.2017 16:31) а че к полимеразе прицепились? Более ничего полезного на кухне сделать нельзя, что ли. Ну там, сварить какую-нить гадость типа амфетамина слабо? или взрывчатку?- почему нет? Надо ж руки занять! Или Вы считаете генно-инженерные экзерсисы более простым делом, кторым может заниматься каждый голимый лох? Напрасно, сударь, тут Вы заблуждаетесь глубоко Ну что тут можно сказать? У человека явные психологические проблемы! Здесь наглядный пример того, как на подсознании человек понимает, что он тот самый "голимый лох". Это причиняет ему психологическую боль, которая в итоге компенсируется через акт агрессии и оскорблении человека, который вызывает у него срабатывание психологических якорей (человек стремится к чему-то, человек позитивен, человек радуется, человек стремится познать ту область, в которой индивид стремится доминировать - все это вызывает у рассматриваемого индивида боль). Таже можно наблюдать форму общения в стиле "рубаха парень": "а че", "прицепились", "сварить гадость" и т.д. и круг интересов: "наркотики", "взрывчатка" - типичный набор примативного человека с низменным уровнем интересов. Обычно, такие с высокой долей вреоятности работаю "гэбэшниками", "ментами" и в иных силовых структурах. Можно предположить, что человек работает криминалистом. Неустойчивая психика, повышенная возбудимость, холеричность - субъект социально опасен. Высока вероятность повторения событий "Кратовского стрелка", "Дмитрия Виноградова" и схожих социопатов. Человеку реально нужна срочная психиатрическая помощь! |
distemper Постоянный участник |
(pApA2017 @ 12.11.2017 17:32) Здесь наглядный пример того, как на подсознании человек понимает, что он тот самый "голимый лох". Это причиняет ему психологическую боль, нельзя так с академиками, оне народ чувствительный. |
R-J-Dio Постоянный участник |
(pApA2017 @ 12.11.2017 20:32) Ну что тут можно сказать? У человека явные психологические проблемы! Здесь наглядный пример того, как на подсознании человек понимает, что он тот самый "голимый лох". Это причиняет ему психологическую боль, которая в итоге компенсируется через акт агрессии и оскорблении человека, который вызывает у него срабатывание психологических якорей (человек стремится к чему-то, человек позитивен, человек радуется, человек стремится познать ту область, в которой индивид стремится доминировать - все это вызывает у рассматриваемого индивида боль). Таже можно наблюдать форму общения в стиле "рубаха парень": "а че", "прицепились", "сварить гадость" и т.д. и круг интересов: "наркотики", "взрывчатка" - типичный набор примативного человека с низменным уровнем интересов. Обычно, такие с высокой долей вреоятности работаю "гэбэшниками", "ментами" и в иных силовых структурах. Можно предположить, что человек работает криминалистом. Неустойчивая психика, повышенная возбудимость, холеричность - субъект социально опасен. Высока вероятность повторения событий "Кратовского стрелка", "Дмитрия Виноградова" и схожих социопатов. Человеку реально нужна срочная психиатрическая помощь! и че? Звоните в 911 |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(pApA2017 @ 12.11.2017 20:32) Вам бы по специальности работать, а не в молбиол лезть. А если ее нет, у меня идея - играйте в массовках! |
pApA2017 |
(-Ъ- @ 14.11.2017 11:41) Вам бы по специальности работать, а не в молбиол лезть. А если ее нет, у меня идея - играйте в массовках! Укольчик тебе уже сделали? Так беги сериал с Гандольфини смотреть! Или помет соловья. Пропустишь же все самое важное в жизни с этим форумом! |
ryzen |
(kb1 @ 31.01.2017 00:12) Ну, если делать нечего, времени полно, а денег мало, то можно и полимеразу выделить, и фенол перегнать, и... Выделили из 1л - 20мл полимеразы (плазмида с аддгена), единиц больше чем в полимеразе от еврогена, работает не хуже - ну нам только мышей генотипировать. Как следует из объема - хватит на пару лет генотипирований.
|
ship Постоянный участник Moscow |
|
Mykhaylo Постоянный участник Україна |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
А чего Михайло оскорбился |
Mykhaylo Постоянный участник Україна |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Кстати, меня тоже всегда привлекало натуральное хозяйство. |
LMP Постоянный участник |
(-Ъ- @ 29.11.2017 14:37) но коров почему-то типирует один гордиз
|
R-J-Dio Постоянный участник |
(Mykhaylo @ 29.11.2017 16:15) Ну если 5-10 млн тага за 2 дня для вас 3 кастрюли, рад за ваши кастрюли. Мои студенты раз в год и pUC для маркера выделяют, режут HinfI и MspI и потом используют для рутинных форезов - тоже нельзя? Только рулер 50 и никак иначе? как-то несовременно звучит, почти стимпанк. Можно-то оно можно, но зачем? Если нет денег на голимый Так или маркер, то и на ресерч кончатся очень скоро. Если деньги есть, но жалко отдавать захребетникам, а свое время не жалко (наверное, оно ничего не стоит)- то...как минимум, ваших студентов жалко, и вообще маразм. А карбюратор вы в обеденный перерыв не перебираете случаем- а че денег платить за инжектор или за ремонт каким-то там работягам? Сообщение было отредактировано R-J-Dio - 03.12.2017 22:46 |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Руки так и чешутся. Сообщение было отредактировано -Ъ- - 10.08.2018 12:04
|
metrim Постоянный участник Москва |
|
Tom1 Постоянный участник |
(metrim @ 10.08.2018 10:37) Кстати, а вот в шкафу валяются куча совейских баночек с ДНКазой. С ней можно что то путное сделать ? Можно совершить диверсию в соседней лабе..... |
banned sceptique-NMRguy Постоянный участник временной жизни |
(metrim @ 10.08.2018 21:37) Кстати, а вот в шкафу валяются куча совейских баночек с ДНКазой. С ней можно что то путное сделать ? Добавлять с полимеразой в разных пропорциях в ПЦР и смотреть кто кого. |
R-J-Dio Постоянный участник |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(metrim @ 10.08.2018 21:37) Кстати, а вот в шкафу валяются куча совейских баночек с ДНКазой. С ней можно что то путное сделать ? Не выбрасывайте, пригодится, например, в борьбе против вязькости после лизиса клеток, при выделении той же термофильной полимеразы. Для выделения РНК не годится, RNA-ase free DNA-ase в СССР не производили, это точно. |
R-J-Dio Постоянный участник |
|
banned sceptique-NMRguy Постоянный участник временной жизни |
|
Horse-radish Участник |
(-Ъ- @ 10.08.2018 09:46) Ну что, карапузики, потанцуем!? © (Волк и 7 козлят) Руки так и чешутся. Молоцом! Чел из первой ссылки показывает как сделать сорбент из диссектанта. Купил обувь, достал силикагель из носка ботинка, растолок в ступке - по качеству почти как сигма) |
R-J-Dio Постоянный участник |
|
vb Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
(Horse-radish @ 13.08.2018 18:27) Ужо лучше из кошачьего тувалета. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(MMM @ 20.08.2018 19:06) Не надо ля-ля Al2O3, то бишь глина, не работает, проверено еще в прошлом веке собственноручно . Кошачий туалет годится только при осветлении бражки или вина! Это для самогонщиков-молекулярщиков. Пардон за офтоп. |
MMM Постоянный участник |
Есть силикагелевые кошачьи наполнители |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
vadimchik152a Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |