Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Как приготовить, ПЦР-буфер с сульфатом аммония?
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! tovaroved




 прочитанное сообщение 13.12.2006 16:28     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование
Вопрос
Не давно решил попробовать приготовить буфер на сульфате аммония, до какой поры работать на коммерческих?
до этого имел дело с буфером на хлориде калия, отличчно работает в моем исполнении.
Приготовил буфер, а потом мысль поситила, аммоний сульфат ведь должен иметь буферные свойства, а его рН 1М раствора 5.0-6.0, видимо его на додовести до какогото значения лучшего для полимеразы, с помощью раствора аммиака?
попробовал сделать просто, без доведения рН
1x
75 мМ ТрисHCl рН8,8
20 мМ (NH4)2SO4
плюс 8% глицерин, БСА до 0,1 мг/мл, Твин20 0,1%, ксиленцианол 0,1 мг/мл (это чтоб сразу на форез наносить),
работает немного хуще чем коммерческий (там 67 мМ Трис и 17 мМ сульфата, при таких концентациях обеих солей хуже раза в два-три).

Подскажите что не так, заранее благодарен
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  13.12.2006 16:45     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

http://www.bio.net/bionet/mm/methods/1998-...ber/071234.html

http://www.bio.net/bionet/mm/methods/2004-...ary/097726.html

http://www.bio.net/bionet/mm/methods/2004-...ary/097724.html

можно тока трис
http://www.idahotech.com/pdfs/rc_pdfs/Rapi...0V2.%201994.pdf

БСА и ксилен ?

это ферментас с добавками - БСА неизвестно какой а ксилен можно махнуть на крезол
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 13.12.2006 17:36     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

ксилен тоже какой ?
http://www.neb.com/nebecomm/products/productM0271.asp
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 13.12.2006 17:42     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

условия пцр переоптимизировать в разведениях темплат для каждого буффера
отдельно а потом сравнить - а так не понятно frown.gif
Участник оффлайн! serhiosus
Участник
Minsk



 прочитанное сообщение 14.12.2006 13:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Давно работаю на буфере 10Х (650 мМ Трис рН 8,8 + 160 мМ Сульфат + 2% Tween 20) , без глицерола и БСА. Срабатывает не хуже, а иногда и лучше чем Fermentas.
При добавлении глицерола до 5% в 1Х наблюдал ухудшение некоторых амплификаций. А так, все отлично, причем трис у меня не molbiol grade, а взятый из старых пожелтевших запасов и переосажденный в спирту. сульфат - 80-годов, правда ОСЧ, Tween 20 техже времен.
Участник оффлайн! distemper
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 14.12.2006 13:26     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

2 serhiosus: вот-вот, саме оно. с глицерином не фонтан этот буфер не фонтан, а вот с сахарозой процентов эдак до 2-3 вполне неотличимо срабатывает. Токмо я 0.1% Твина лью,не люблю когда мыла в буфере много, пузыри эти в пробирках...
скажу еще одно-я как-то 5 разных полимераз (в смысле производителей) прогонял по разным буферам, дык вот этот работает безотказно с любым ферментом. Самый он так сказать универсальный на мой взгляд.
ЗЫ: магний лучче тоже сернокислый, хотя может это мое так сказать сукбъективное ощущение
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 14.12.2006 14:00     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(serhiosus @ 14.12.2006 12:06)
Ссылка на исходное сообщение  Давно работаю на буфере 10Х (650 мМ Трис рН 8,8 + 160 мМ Сульфат + 2% Тщеен 20) , без глицерола и БСА. Срабатывает не хуже, а иногда и лучше чем Ферментас.
При добавлении глицерола до 5% в 1Х наблюдал ухудшение некоторых амплификаций. А так, все отлично, причем трис у меня не молбиол граде, а взятый из старых пожелтевших запасов и переосажденный в спирту. сульфат - 80-годов, правда ОСЧ, Тщеен 20 техже времен.

глицерол, сахароза,фикол + ксилен - это чтоб прямо в гель
ксилен может ингибировать - нужно титроватъ
либо пробовать крезоловый красный

БСА - вроде нафиг не нужен - можно еще в тот "БСА" вляпаться frown.gif
Участник оффлайн! serhiosus
Участник
Minsk



 прочитанное сообщение 14.12.2006 14:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(distemper @ 14.12.2006 10:26)
Ссылка на исходное сообщение 
скажу еще одно-я как-то 5 разных полимераз (в смысле производителей) прогонял по разным буферам, дык вот этот работает безотказно с любым ферментом. Самый он так сказать универсальный на мой взгляд.
ЗЫ: магний лучче тоже сернокислый, хотя может это мое так сказать сукбъективное ощущение

Насчет магния - и хлористый вполне нормально работает.
Недавно тестировал серию буферов на основе смеси сульфата и калий хлора. Для небольших фрагментов (300bp) лучше срабатывал mix (NH4)2SO4 - 16 мМ + KCl - 10 мМ. По литературке такие буферчики более толерантны к температуре отжига и магнию.
Участник оффлайн! tovaroved




 прочитанное сообщение 14.12.2006 14:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Спасибо.
Конкретно занимался опробыванием новых смесей на буфере с КCl, там все замечательно, ксилен доводил до концентрации 0,08мг/мл, никакого существенного влияния не оказывал, завтра попробую конечно и с крезоловым.
До этого пытался использовать сахарозу для увеличения плотности раствора (чтоб сразу на форез), но чтото не заладилось, она ингибирова раза в три-четыре, так что работать с ней не стал (как основной использовал буфер от ферментас с сульфатом), сахарозу нрадо было б другую проверить, но под руками не было, а заказывать... сказываются финансовые проблемы института.
Поэтому решил попробовать на глицерине, как исходный взял от набора "Института Эпидемиологии".
Как мне кажется все проблемы связваны с потерей буферных свойств при реакции, был опыт: сравнивал работу буферов на КCl с 100 и 500 мМ Трис, 500 мМ гораздо лучше, так и с сульфатом повысил содержание с 67 до 75 мМ заметное улучшение, интересно как много можно вообще Триса в реакцию вводить?
Участник оффлайн! tovaroved




 прочитанное сообщение 14.12.2006 14:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

(Guest @ 13.12.2006 13:45)

ссылки не грузятся, сегодня сервер не работает?
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 14.12.2006 16:02     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

(serhiosus @ 14.12.2006 13:18)
Ссылка на исходное сообщение  Насчет магния - и хлористый вполне нормально работает.
Недавно  тестировал серию буферов на основе смеси сульфата и калий хлора. Для небольших фрагментов (300бп) лучше срабатывал мих (НХ4)2СО4 - 16 мМ + КЦл - 10 мМ. По литературке такие буферчики более толерантны к температуре отжига и магнию.

вроде про этот буферочек QIAGEN уже давно всем уши прожжуал frown.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 14.12.2006 16:08     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

(tovaroved @ 14.12.2006 13:55)
Ссылка на исходное сообщение  ссылки не грузятся, сегодня сервер не работает?

вроде работает confused.gif www.bio.net потом "cresol " потом "search"
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 14.12.2006 16:15     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(tovaroved @ 14.12.2006 13:50)
Ссылка на исходное сообщение  Спасибо.
Конкретно занимался опробыванием новых смесей на буфере с КЦл, там все замечательно, ксилен доводил до концентрации 0,08мг/мл, никакого существенного влияния не оказывал, завтра попробую конечно и с крезоловым.
До этого пытался использовать сахарозу для увеличения плотности раствора (чтоб сразу на форез), но чтото не заладилось, она ингибирова раза в три-четыре, так что работать с ней не стал (как основной использовал буфер от ферментас с сульфатом), сахарозу нрадо было б другую проверить, но под руками не было, а заказывать... сказываются финансовые проблемы института.
Поэтому решил попробовать на глицерине, как исходный взял от набора "Института Эпидемиологии".
Как мне кажется все проблемы связваны с потерей буферных свойств при реакции, был опыт: сравнивал работу буферов на КЦл с 100 и 500 мМ Трис, 500 мМ гораздо лучше, так и с сульфатом повысил содержание с 67 до 75 мМ заметное улучшение, интересно как много можно вообще Триса в реакцию вводить?

Лайтцыклер со стеклянными капиллярами работает на ЧИСТОМ Трисе 50 мМ конечная - никаких KCl
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 14.12.2006 16:22     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

(tovaroved @ 14.12.2006 13:50)
Ссылка на исходное сообщение  Спасибо.
Конкретно занимался опробыванием новых смесей на буфере с КЦл, там все замечательно, ксилен доводил до концентрации 0,08мг/мл, никакого существенного влияния не оказывал, завтра попробую конечно и с крезоловым.
До этого пытался использовать сахарозу для увеличения плотности раствора (чтоб сразу на форез), но чтото не заладилось, она ингибирова раза в три-четыре, так что работать с ней не стал (как основной использовал буфер от ферментас с сульфатом), сахарозу нрадо было б другую проверить, но под руками не было, а заказывать... сказываются финансовые проблемы института.
Поэтому решил попробовать на глицерине, как исходный взял от набора "Института Эпидемиологии".
Как мне кажется все проблемы связваны с потерей буферных свойств при реакции, был опыт: сравнивал работу буферов на КЦл с 100 и 500 мМ Трис, 500 мМ гораздо лучше, так и с сульфатом повысил содержание с 67 до 75 мМ заметное улучшение, интересно как много можно вообще Триса в реакцию вводить?

наскоко помню 75 мМ Трис без солей был впервые описан для сиквенса
а потом для ПЦР ГЦ богатых темплатов smile.gif годик так 1992 smile.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 14.12.2006 16:29     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

(Guest @ 14.12.2006 15:22)
Ссылка на исходное сообщение  наскоко помню 75 мМ Трис без солей был впервые описан для сиквенса
а потом для ПЦР ГЦ богатых темплатов smile.gif годик так 1992 smile.gif

1: Proc Natl Acad Sci U S A. 1988 Dec;85(24):9436-40.Click here to read Click here to read Links
DNA sequencing with Thermus aquaticus DNA polymerase and direct sequencing of polymerase chain reaction-amplified DNA.

* Innis MA,
* Myambo KB,
* Gelfand DH,
* Brow MA.

Department of Microbial Genetics, Cetus Corporation, Emeryville, CA 94608.

The highly thermostable DNA polymerase from Thermus aquaticus (Taq) is ideal for both manual and automated DNA sequencing because it is fast, highly processive, has little or no 3'-exonuclease activity, and is active over a broad range of temperatures. Sequencing protocols are presented that produce readable extension products greater than 1000 bases having uniform band intensities. A combination of high reaction temperatures and the base analog 7-deaza-2'-deoxyguanosine was used to sequence through G + C-rich DNA and to resolve gel compressions. We modified the polymerase chain reaction (PCR) conditions for direct DNA sequencing of asymmetric PCR products without intermediate purification by using Taq DNA polymerase. The coupling of template preparation by asymmetric PCR and direct sequencing should facilitate automation for large-scale sequencing projects.

PMID: 3200828 [PubMed - indexed for MEDLINE]
Участник оффлайн! curious67
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 16.12.2006 23:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

да-а-а, а я помнится, в 91-ом только начал ручной Сэнгер с секвеназой осваивать, и еще достигуха было- по двуцепочке секвенили, уже не надо было одноцепочку выделять. Знал бы тогда, как все запущено у нас- никогда б не стал продолжать. Спасибо, напомнили, атас...
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 18.12.2006 10:48     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

(tovaroved @ 13.12.2006 15:28)
Ссылка на исходное сообщение  Не давно решил попробовать приготовить буфер на сульфате аммония, до какой поры работать на коммерческих?
до этого имел дело с буфером на хлориде калия, отличчно работает в моем исполнении.
Приготовил буфер, а потом мысль поситила, аммоний сульфат ведь должен иметь буферные свойства, а его рН 1М раствора 5.0-6.0, видимо его на додовести до какогото значения лучшего для полимеразы, с помощью раствора аммиака?
попробовал сделать просто, без доведения рН

75 мМ ТрисХЦл рН8,8
20 мМ (НХ4)2СО4
плюс 8% глицерин, БСА до 0,1 мг/мл, Твин20 0,1%, ксиленцианол 0,1 мг/мл (это чтоб сразу на форез наносить),
работает немного хуще чем коммерческий (там 67 мМ Трис и 17 мМ сульфата, при таких концентациях обеих солей хуже раза в два-три).

Подскажите что не так, заранее благодарен

Mr.LongPCR - использовал слегка другой буфер
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 18.12.2006 10:49     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

(Guest @ 18.12.2006 09:48)
Ссылка на исходное сообщение  Mr.LongPCR                    - использовал слегка другой буфер

http://klentaq.com/products/netters.pdf
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 18.12.2006 10:56     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

(Guest @ 14.12.2006 13:00)
Ссылка на исходное сообщение  глицерол, сахароза,фикол + ксилен - это чтоб прямо в гель
ксилен может ингибировать - нужно титроватъ
либо пробовать крезоловый красный

БСА - вроде нафиг не нужен - можно еще в тот "БСА" вляпаться frown.gif

в пцр вроде можно совать "пищевые красители" в качестве индикаторов smile.gif
возьмите Тархун - из него "зеленую смесь" и в ПЦР smile.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 18.12.2006 11:46     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

(curious67 @ 16.12.2006 22:57)
Ссылка на исходное сообщение  да-а-а, а я помнится, в 91-ом только начал ручной Сэнгер с секвеназой осваивать, и еще достигуха было- по двуцепочке секвенили, уже не надо было одноцепочку выделять. Знал бы тогда, как все запущено у нас- никогда б не стал продолжать. Спасибо, напомнили, атас...

Не за что smile.gif Начинать ПЦРитъ в 1991 - нормально smile.gif Тока 3 года потерял smile.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 18.12.2006 12:02     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

(Guest @ 18.12.2006 10:46)
Ссылка на исходное сообщение  Не за что smile.gif Начинать ПЦРитъ в 1991 - нормально smile.gif Тока 3 года потерял smile.gif


1: Nature. 1987 Nov 26-Dec 2;330(6146):384-6.Click here to read Links
Characterization of beta-thalassaemia mutations using direct genomic sequencing of amplified single copy DNA.

* Wong C,
* Dowling CE,
* Saiki RK,
* Higuchi RG,
* Erlich HA,
* Kazazian HH Jr.

Department of Pediatrics, Johns Hopkins University School of Medicine, Baltimore, Maryland 21205.

Direct sequencing of specific regions of genomic DNA became feasible with the invention of the polymerase chain reaction (PCR) which permits amplification of specific regions of DNA. Recently, human mitochondrial DNA was amplified and directly sequenced. Using a thermostable DNA polymerase of T. aquaticus (Saiki, R.K. et al., manuscript in preparation) in the PCR, we have applied a combination of PCR and direct sequence analysis of the amplified product to a human single-copy gene. We studied the genomic DNA of five patients with beta-thalassaemia whose mutant alleles were uncharacterized, and found two previously undescribed mutations, along with three known alleles. One new allele is a frameshift at codons 106-107 and the other is an A-C transversion at the cap site (+1) of the beta-globin gene. This latter is the first natural mutation observed at the cap site and it occurs in a gene which is poorly expressed.
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 18.12.2006 12:25     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

(serhiosus @ 14.12.2006 12:06)
Ссылка на исходное сообщение  Давно работаю на буфере 10Х (650 мМ Трис рН 8,8 + 160 мМ Сульфат + 2% Тщеен 20) , без глицерола и БСА. Срабатывает не хуже, а иногда и лучше чем Ферментас.
При добавлении глицерола до 5% в 1Х наблюдал ухудшение некоторых амплификаций. А так, все отлично, причем трис у меня не молбиол граде, а взятый из старых пожелтевших запасов и переосажденный в спирту. сульфат - 80-годов, правда ОСЧ, Тщеен 20 техже времен.



Согласен - в полипропилене нормально работает - но в стекле фиг frown.gif

1: Bioorg Khim. 1997 Jun;23(6):526-8. Links
[Fast DNA amplification in small ultrathin-wall microplates]
[Article in Russian]

* Tret'iakov AN,
* Pantina RA,
* Kaboev OK.

A new method was developed for fast DNA amplification by polymerase chain reaction in tiny ultrathin microplates formed directly on the thermocycler's thermoblock. The microplates are made from thin (40-60 microns) polypropylene film by the thermal vacuum-formation method. Due to the effective heat transfer to 10-15 microliters samples and a high velocity of heating and cooling of the thermoblock (up to 7 degrees C/s), the total duration of the DNA amplification (30 cycles) is only 15-30 min.

PMID: 9265475 [PubMed - indexed for
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 18.12.2006 12:31     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

(Guest @ 18.12.2006 11:25)
Ссылка на исходное сообщение  Согласен - в полипропилене нормально работает - но в стекле фиг frown.gif

1: Bioorg Khim. 1997 Jun;23(6):526-8. Links
    [Fast DNA amplification in small ultrathin-wall microplates]
    [Article in Russian]

        * Tret'iakov AN,
        * Pantina RA,
        * Kaboev OK.

 

: Anal Biochem. 1990 May 1;186(2):328-31. Links
Minimizing the time required for DNA amplification by efficient heat transfer to small samples.

* Wittwer CT,
* Fillmore GC,
* Garling DJ.

Department of Pathology, University of Utah Medical School, Salt Lake City 84132.

Hot-air temperature cycling of 1- to 10-microliters samples in glass capillary tubes can amplify DNA by the polymerase chain reaction in 15 min or less. A rapid temperature cycler of low thermal mass was constructed to change sample temperatures among denaturation, annealing, and elongation segments in a few seconds. After 30 cycles of 30 s each, a 536-bp beta-globin fragment of human genomic DNA was easily visualized with ethidium bromide on agarose gels. With rapid cycling, amplification yield depended on polymerase concentration. The time required for DNA amplification can be markedly reduced from prevailing protocols if appropriate equipment and sample containers are used for rapid heat transfer to the sample.

PMID: 2363506 [PubMed - indexed for MEDLINE]
Участник оффлайн! суннатилла




 прочитанное сообщение 04.07.2019 13:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

можно просит ?
как влияет хлорид аммония на температуру реакции в пцр ?
Участник оффлайн! kenseq
Участник



 прочитанное сообщение 09.07.2019 00:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

(tovaroved @ 13.12.2006 17:28)
Ссылка на исходное сообщение  Не давно решил попробовать приготовить буфер на сульфате аммония, до какой поры работать на коммерческих?
до этого имел дело с буфером на хлориде калия, отличчно работает в моем исполнении.
Приготовил буфер, а потом мысль поситила, аммоний сульфат ведь должен иметь буферные свойства, а его рН 1М раствора 5.0-6.0, видимо его на додовести до какогото значения лучшего для полимеразы, с помощью раствора аммиака?

ну куй его знаэт я пцр в этом буффере делал в 1994 30 циклов за 15 минут могу скинут ПубМед lol.gif
Участник оффлайн! kenseq
Участник



 прочитанное сообщение 09.07.2019 07:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

накуя глицерин и бса confused.gif confused.gif confused.gif
Участник оффлайн! kenseq
Участник



 прочитанное сообщение 09.07.2019 07:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

товаровед глицерин и бса накуй не нугны твин сойдет jump.gif jump.gif beer.gif beer.gif
Участник оффлайн! kenseq
Участник



 прочитанное сообщение 09.07.2019 07:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

(суннатилла @ 04.07.2019 14:48)
Ссылка на исходное сообщение  можно просит ?
как влияет хлорид аммония на температуру реакции в пцр ?

никак
Участник оффлайн! kenseq
Участник



 прочитанное сообщение 09.07.2019 07:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

Подскажите что не так, заранее благодарен


глицерин и бса smile.gif

глицерин енто для лонг пцр когда в голову вэбло пцрит 20 кб
товаровед ты есцо бетаин туды за***ч для полного счастя beer.gif beer.gif jump.gif jump.gif jump.gif

товаровед енто к пцр психам которые пцрят 20 кб smile.gif

бца добавляли 30 лет назад чтоб полимераза не горела а так сойдет твин или тритон
Участник оффлайн! kenseq
Участник



 прочитанное сообщение 09.07.2019 12:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

(kenseq @ 09.07.2019 13:07)
Ссылка на исходное сообщение  извините я ваамсчето физфак лгу 1978 и в вашем садовом яйце не разбираюс smile.gif

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5670203/
Участник оффлайн! kenseq
Участник



 прочитанное сообщение 15.07.2019 20:31     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

дарю личную пабликуху на памят beer.gif jump.gif

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9265475
кстати вот тут тоге аммоний
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8052258

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 26.08.19 06:47
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft