Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
APTES |
Кто-нибудь сам шил себе шарики для твердофазного синтеза днк, пептидов? Или регенерировал поюзаные. Каково оно? А то стоит флакон с APTES на 100 мл, выкидывать жаба душит. |
MMM Постоянный участник |
А так делаете раствор 2% в толуоле например. Стекло с кислотой кипятите пол часика, промываете водичкой обильно, потом сушите ночку при 120оС и заливаете волшебным раствором. Раствор можно и в баньке подержать градусах при 60 несколько часов, а можно на комнате оставить на сутки. Потом промываете толуолом, и сушите при 120оС |
kakseq |
(MMM @ 18.08.2019 22:01) для синтеза не шил. Кроме аминопропилтриэтоксисилана вообще-то нужны сами шарики точнее макропористое стекло. С юзаными шариками бы связываться не стал. А так делаете раствор 2% в толуоле например. Стекло с кислотой кипятите пол часика, промываете водичкой обильно, потом сушите ночку при 120оС и заливаете волшебным раствором. Раствор можно и в баньке подержать градусах при 60 несколько часов, а можно на комнате оставить на сутки. Потом промываете толуолом, и сушите при 120оС ммм я для ДНК микроаррев аминировал покровные стекла мелкоскопа не так жестоко |
kakseq |
(MMM @ 18.08.2019 22:01) для синтеза не шил. Кроме аминопропилтриэтоксисилана вообще-то нужны сами шарики точнее макропористое стекло. С юзаными шариками бы связываться не стал. А так делаете раствор 2% в толуоле например. Стекло с кислотой кипятите пол часика, промываете водичкой обильно, потом сушите ночку при 120оС и заливаете волшебным раствором. Раствор можно и в баньке подержать градусах при 60 несколько часов, а можно на комнате оставить на сутки. Потом промываете толуолом, и сушите при 120оС ммм ты забыл что все процедуры отмывки стекла в ултрозвуковой бане |
kakseq |
(MMM @ 18.08.2019 22:01) для синтеза не шил. Кроме аминопропилтриэтоксисилана вообще-то нужны сами шарики точнее макропористое стекло. С юзаными шариками бы связываться не стал. А так делаете раствор 2% в толуоле например. Стекло с кислотой кипятите пол часика, промываете водичкой обильно, потом сушите ночку при 120оС и заливаете волшебным раствором. Раствор можно и в баньке подержать градусах при 60 несколько часов, а можно на комнате оставить на сутки. Потом промываете толуолом, и сушите при 120оС "А так делаете раствор 2% в толуоле например" © из органики аминосиланит гемморр легче из спирта с водичкой |
kortkeros Участник |
(MMM @ 18.08.2019 22:01) для синтеза не шил. Кроме аминопропилтриэтоксисилана вообще-то нужны сами шарики точнее макропористое стекло. С юзаными шариками бы связываться не стал. А так делаете раствор 2% в толуоле например. Стекло с кислотой кипятите пол часика, промываете водичкой обильно, потом сушите ночку при 120оС и заливаете волшебным раствором. Раствор можно и в баньке подержать градусах при 60 несколько часов, а можно на комнате оставить на сутки. Потом промываете толуолом, и сушите при 120оС |
genseq Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
Ацетон плох тем, что не позволяет нагреть систему и тем самым повысить эффективность связывания APTES, те он может быть использован(желательно сухой), но не с такой эффективностью. Нагрев после обработки необходим, что бы молекулы APTES, связавшиеся с поверхностью диоксида, связались еще и между собой образуя на поверхности своеобразную органосилоксановую двумерную пленку, которая ограничивает доступ воды к кремний-кислородным связям и упрочняет связь молекул APTES с поверхностью диоксида кремния. |
genseq Постоянный участник |
(MMM @ 26.08.2019 15:02) Надо, надо травить. Потому что любой диоксид кремния при лежании с поверхности пассивируется и активные гидроксилы на поверхности замыкаются сами на себя. Обработка раствором кислоты реактивирует эти гидроксилы разрушая, образовавшиеся при хранении кислородные мостики. Это такой способ если хотите омоложения диоксида кремния. Ацетон плох тем, что не позволяет нагреть систему и тем самым повысить эффективность связывания APTES, те он может быть использован(желательно сухой), но не с такой эффективностью. Нагрев после обработки необходим, что бы молекулы APTES, связавшиеся с поверхностью диоксида, связались еще и между собой образуя на поверхности своеобразную органосилоксановую двумерную пленку, которая ограничивает доступ воды к кремний-кислородным связям и упрочняет связь молекул APTES с поверхностью диоксида кремния. Выглядит убедительно, но я всё равно сомневаюсь. Поскольку не уверен в механизмах реакций, идущих при травлении стекла, связывании им APTES и финишной термообработке. Травление Замыкание поверхностных силанольных групп вопросов не вызывает. Но для их размыкания требуются слабощелочные условия. В сильнощелочных стекло (соли кремниевой кислоты), и даже кристаллический кварц (двуокись кремния), будут растворяться. А вот с кислотным гидролизом нужно разбираться. Стекло, наверное, будет терять катионы натрия (и т.п.), но смежные силанольные группы будут моментально конденсироваться. И вообще кислотный гидролиз стекла и кремния вызывает сомнения. Хотя в соляной кислоте стекло, наверное, способно проявлять некоторые чудеса, характерные для плавиковой кислоты, и даже для её солей. Связывание APTES Для связывания с силанольными группами необходим его хотя бы частичный гидролиз, поскольку это не обменная реакция (или всё-таки обменная?), а конденсация по крайней мере двух силанольных групп с выделением молекулы воды. Такой конденсации могут помешать только щелочные условия. Специально гидролизовать APTES нет смысла. Гидролиз идёт спонтанно, в присутствии даже следовых количеств воды. Если её не слишком много, то APTES свяжется как положено - одной силанольной группой. Две другие останутся этоксисилановыми. Финишная термообработка Этоксигруппы хорошо гидролизуются парами воды, присутствующей в воздухе. Такой гидролиз стимулируется повышением температуры. Кроме того, прокаливание стёкол способствует конденсации свободных силанольных групп на поверхности стекла. Поэтому прогрев (15...20 минут при 115...120 град.) значительно улучшает связывающую способность аминированных стёкол. Главное при этом - не переборщить (аминные группы "загнутся"). Хотя "недобарщивать" тоже не стоит. Но это всё теории. Поэтому буду признателен за любые замечания практиков. Сообщение было отредактировано genseq - 26.08.2019 19:51 |
MMM Постоянный участник |
Обменная не обменная - это вопрос философский. Гидролиз там никакой не нужен. Спирт уходит силоксан образуется. Вода будет только давать побочный параллельный процесс ухода спирта и образования не активного силанола. При обработке кислотой она как раз действует, только на поверхность кремнезема и на поверхностные силанольные группы, а щелочь будет его частично растворять. |
elektrikvasilij Участник |
я на боросиликатное стекол пробовал во времена Андрея Мирзабекова директора Института Молекулярной Биологии типа ДНК-чип ммм в Америге Барбара Траск придлагала ВЫПАРИВАТ аминосилан на предметные стекла мелкоскопа могу дат ссылку в ПубМеде на Барбару и метод аминосилан но это было так давно |
737MAX Участник |
(APTES @ 18.08.2019 19:40) Доброго времени суток всем. Кто-нибудь сам шил себе шарики для твердофазного синтеза днк, пептидов? Или регенерировал поюзаные. Каково оно? А то стоит флакон с APTES на 100 мл, выкидывать жаба душит. жаба душит на епоксисиланах габа душит круче |
737MAX Участник |
"в Америге Барбара Траск придлагала ВЫПАРИВАТ аминосилан на предметные стекла" (ц) я однажды попрпбовал этот протокол ВЫПАРИВАНИЯ Сут протокола: спиртовый раствор слиана заливаетсйя в скороварку над ним на сеточку кладутся предметные стекла потом скороварку на газовую кухонную плиту рвануло мама не горюй зато покрытие стекла СУПЕРРАВНОМЕРНОЕ |
APTES |
Единственное, возникли вопросы. Эти методики вы нашли опытным путем или это адаптация методов из каких-то публикаций? Если можете дать ссылки на публикации, было бы просто супер! 737MAX: "на епоксисиланах габа душит круче " Скажите, а какие вы эпоксисиланы применяете и для чего? Почему бы на тот же APTES не пришить к аминогруппе эрихлоргидрин(получился бы N-(2-Oxiranylmethyl)-3-(triethoxysilyl)-1-propanamine)? GABA бы может и не душила так? |
КсенияЛарина |
(APTES @ 06.09.2019 22:59) 737MAX: "на епоксисиланах габа душит круче " Скажите, а какие вы эпоксисиланы применяете и для чего? Почему бы на тот же APTES не пришить к аминогруппе эрихлоргидрин(получился бы N-(2-Oxiranylmethyl)-3-(triethoxysilyl)-1-propanamine)? GABA бы может и не душила так? проще силанить прямо епокси мне нужно было прифигачить аминированые олиги |
X34 Участник |
(elektrikvasilij @ 29.08.2019 00:08) я на боросиликатное стекол пробовал во времена Андрея Мирзабекова директора Института Молекулярной Биологии до сих пор диссер его с подписью выбросить рука не поднимается |
КсенияЛарина |
(X34 @ 09.09.2019 15:52) нефдачник чоли |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |