Rambler's Top100
 		Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Western
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

 
 Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 08.08.2001 16:26     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование
А вот как можно контролировать перенос из геля? Можно Понсо-С. А кто-нибудь пробовал Амидо черный?
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 09.08.2001 04:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование
Ежели оставить контрольную дорожку, то соответствующую ей полоску мембраны можно красить все тем же кумасси. Пробовали и амидо черным и понсо, но получается гораздо хуже.
Ну и сам гель тоже можно покрасить.
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 09.08.2001 11:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование
А вот на Понсо вы зря клевещете :-)
Оно красит с неплохой чувствительностью (маркеры в стандартных аликвотах для кумасси видны хорощо) и обратимо, то есть последующая блокировка полностью Понсо удаляет. А с Амидо Черным проблема - он не удаляется никак. Может я его неправильно приготовил? на 100 мл 0.25 г амидо черного
15 мл уксусной кислоты
30 мл спирта
С понсом такая пропись нормально работает. А с Амидо черным даже мембрана перекорежилась.
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 10.08.2001 18:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование
Прелесть Понсо заключается в том, что он красит и смывается с белка в очень мягких
условиях без последствий для антигена.
Т.е. после окраски белка, краситель можно смыть и окрасить белок антителами по стандартной Western методике. Что касается кумасси и амидо черного: Самый чувствительный из них кумасси, но им можно красить только ПВДФ-мембраны, потому что, на нитроцеллюлезе он дает несмываемый фон. Эти красители садятся на белок практически необратимо,
т.е. ими можно красить маркер мол. веса отдельно от антительного блота, но не пробу на блоте. Если нужно покрасить тотальный белок в пробе на блот, то лучше это делать в отдельном форезном геле кумасей или серебром . Пропись на амидо черный такая:
АЧ - 0.2% в/о
метанол - 40% о/о
ук - 10% о/о
вода - остальное
качать в руках 3-5'
отмвыка фона
метанол - 40% о/о
ук - 10% о/о
вода - остальное
ВНИМАНИЕ!
нитроцеллюлоза в зависимости
от марки может сжимается в 40% метаноле.
Поэтому, чем меньше время контакта мембраны с краской и отмывкой, те меньше
вероятность изменения ее размеров.
С ПВДФ этого не происходит.
Окраска кумасси такая же как в геле, но отмывка, как в амидо черном.
Пока!!
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 29.10.2001 06:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование
С другой стороны - если Вас в принципе волнует весь ли белог перенесся с геля, попытайтей прокрасить (кумасси или серебром) сам гель.
А вот мембрану красить не советую. Не знаю почему, то ли эпитопы портятся, то ли что еще, но часто Вы уже не можете probe your membrane with appropriate antibody.
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 30.10.2001 20:17     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование
О! Да!
Кумассями мембрану красить не след. Как и амидо черным. Это приводит к ужасающему результату. Вряд ли портятся эпитопы, но факт, что такую мембрану можно выкинуть - она не красится антителами.
Участник оффлайн! moonlife3009

United Kingdom
 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.09.2022 09:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование
F1 Renovations is one of the leading renovation companies all over the UK. We provide painting and decorating services, including all types of decoration like house renovation, kitchen renovation, bathroom renovation, tiling, flooring, etc. We provide quality service at cheap rates.

Removals Company | Removals Company | Office Removal in London | Office Removals London | Relocation Companies London | Removals Company in London | Moving Company in London | Moving Company | Movers in London | Man and Van in London | House Removals in London | House Removals | Packers and movers in London | Packers and movers London | Movers and Packers in London | Relocation Company in London | Commercial Removals | Local Movers | Long Distance Mover | Long Distance Movers | Long Distance Moving Company | renovations | london renovations | renovation companies in london | renovations company london | house renovation in london | Kitchen renovation london | Kitchen fitting london | Kitchen fitters in London | bathroom renovations london | painters and decorators in london | painting and decorating in london | painters in london | london decorators | vinyl tile flooring | vinyl flooring | laminate flooring | parquet flooring | wood flooring | parquet flooring london | luxury vinyl flooring | lvt flooring | wood flooring london | karndean flooring | herringbone flooring | laminate flooring london | amtico flooring | bathroom floor tiling | bathroom tiling | kitchen tiling | floor tiling | porcelain tiling | terrazzo tiling
Участник оффлайн! Ufa1688
Постоянный участник
 прочитанное сообщение Сообщение на английском  27.09.2022 19:28     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование
Yet in the days ahead 1688.comit will be tempting to dismiss ufabet เข้า สู่ระบบMoscow’s broadened claims ufabet168cof sovereignty and บอลสเต็บsaber-rattling as the dying แฮนดิแคปthroes of an empire ลิงค์รับทรัพย์that forgot to look under the hood UFA1688before it went driving in a storm. สล็อตออนไลน์This is a win or lose moment ราคาบอลfor Putin, and he does not see ufa1688a future in which he loses.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики 		Назначение кнопок:
   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -  
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.04.24 21:38
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft
Powered by Invision Power Board(Trial) v2.0.0 © 2024  IPS, Inc.