Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Лаба для работы с антителами, что нужно? -- оборудование, схема процесса --
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Asgard




 прочитанное сообщение 30.05.2018 09:58     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Ув. формучане, помогите разобраться с процессом и оборудованием для работы с антителами.

Задача такая - есть референсное антитело с известной последовательностью.

Нужно наработать это антитело, провести аланиновое сканирование его cdr областей и наиболее перспективные варианты клонировать в гибридомы для дальнейшей наработки и изучения.

Может кто вкратце описать основные стадии и необходимое для этого оборудование. Или ткнуть меня туда, где об этом написано.

Лаборатория планируется с нуля.

Заранее спасибо.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 13:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Для начала это референсное антитело где-то на бумаге, или в пробирке, или есть продуцент.

А вообще вам понадобится генноинженерная лаборатория это:
бактериальный бокс(ы)
термостаты с качалкой и без для выращивания культур бактерий
Цетрифуги настольные и нет с охлаждением и нет до 15000g
Твердотельные термостаты(лучше с охлаждением) под микропробирки.
Термоциклер для ПЦР(ПЦР бокс)
комплект оборудования для горизонтального электрофореза в агарозе вместе с системой визуализации
Спектрофотометр в том числе и микрообъемный.

Так же вам понадобится культурально клеточное оборудование.
Клеточный бокс
СО2-инкубатор
цитоцентрифуга
Инвертированный микроскоп
Дьюар с жидким азотом и широким горлом(по другому называется криохранилище)

Так же вам понадобится холодильное оборудование от +4 до - 80оС весовое оборудование, рН-метры, магнитные мешалки, качалки и тп Наборы автоматических микропипеток(дозаторов) лаб. столы и шкафы, вытяжные шкафы складские помещения в том числе и с холодильниками.

А выглядит это примерно так с помощью предзаказанных олигонуклеотидов с соответствующими заменами на аланин делается библитека векторов(например фаговая) или экспрессирующая с соответствующими мутантами. Потом идет получение продуцетов или фагов с соответствующих пептидами. А вот потом идет скрининг и от того на ЧТО скрининг и какие методы будут использованный для скрининга зависит дополнительное оборудование, которое может включать.

Белково-химическое оборудования начиная от хроматографии и электрофореза/иммуноблота в том числе и двумерного до ИФА(Который все равно понадобится для отбора целевых клонов)
и заканчивая всяким другим оборудованием флуориметрами, проточными цитометрами, поверхностным плазмонным резонансом и масспектрометрами тд и тп
Участник оффлайн! Asgard




 прочитанное сообщение 30.05.2018 14:36     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

MMM, спасибо за подробный ответ!
А бюджет примерный сможете озвучить? хотя бы порядок цифр.

P.S. Референсное антитело на бумаге.
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 17:53     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Лаборатория для одного антитела....
Круть крутая....
приблизительная цена оборудования ( без учета расходников которые тоже не дешевы...
- инкубатор от от 2,5-10К $ ламинар примерно в ту же цену, центрифуги от 1К до 4К каждая.
Микроскоп самый простенький 1,5К
Дюар -350
Термостат с качалкой для бактером от 3.5К.
цыклер от 1К
ридер для ИФА от 5К
мелкое оборудование:
Пипетки автоматы сет 1.5-2К
для електрофореза ДНК и белков от 4.5К
Холодильники ну тут можно обойтись и бытовыми , но нужны на +4, -20 и -40.
pH-метр, мешалки, качалки все оптом где-то 5-8К
страшное оборудование типа масспека и еспиар котоое МММ в конце написал совершенно не обязательно есгть сервисные компании которые за денежку сделают вам сие анализы.
Итого по минимуму 30.5К бакинских рублей.
как говорил выше без расходников на них если с нуля примерно такая же сумма, может чуть меньше.
Едем дальше какие антитела собираитесь получать очеловеченные или мышиные ????
в основе планируите полноразмерное антитело или только фрагмент???
остальное после ответов....
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 18:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Порядка миллионов евро.
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 18:19     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

МММ окстись ....
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 18:23     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

если все включая системы очистки, масспек и еспиас, проточник, флуориметры...
тогда даже больше ляма получится....
по минимуму можно обойтись 70-100К....
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 18:58     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Ну да если термоциклер за килобакс брать то да. а если за 5, то как раз лям и выйдет. Кстати совсем забыл про парочку дистиллеров и миллипоровскую деионизованную воду.

Сообщение было отредактировано MMM - 30.05.2018 18:59
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 20:07     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Я бы начинал с вентиляции. Думал, что только инженеры в краю родных осинок положили на обеспечение средами. Оказывается и очень ученые сотрудники тоже считают это буржуазным предрассудком....
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 20:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

А то у нас как всегда зафигачат культуральное оборудование с массспеками в затхлую конуру, а потом удивляются, почему вместо биотехнолорических прорывов на радость владимиру владимировиыу мы получили мандавошек размером с таракана.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Fritz
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2018 22:59     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

(vb @ 30.05.2018 10:09)
Ссылка на исходное сообщение  А то у нас как всегда зафигачат культуральное оборудование с массспеками в затхлую конуру, а потом удивляются, почему вместо биотехнолорических прорывов на радость владимиру владимировиыу мы получили мандавошек размером с таракана.

Желчь унд зависть детектед....
))))
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 31.05.2018 06:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

(Tom1 @ 30.05.2018 20:59)
Ссылка на исходное сообщение  Желчь унд зависть детектед....
))))

Я тебя умоляю. Я так долго все это наблюдаю, что почти смирился и постиг дзен. Но иногда рецидивы надежды на логику и здравый смысл бывают.
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 31.05.2018 14:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(Asgard @ 30.05.2018 14:36)
Ссылка на исходное сообщение  MMM, спасибо за подробный ответ!
А бюджет примерный сможете озвучить? хотя бы порядок цифр.

P.S. Референсное антитело на бумаге.

Сотни миллионов рублей и 5-7 лет времени, из которых первые 1-2 года вы будете все заниматься ТОЛЬКО пусконаладкой того, что нужно.

Вам ещё предстоит построить настоящий стерильный и моющийся клеточный блок в здании обязательно с виварием, желательно - кроличьим, а не только крысо-мышиным. Если вивария нет - прибавьте еще 3-5 лет на его постройку, оборудование и сертификацию, бюджет 1,5-2 млрд рублей в зависимости от жадности подрядчиков.
Участник оффлайн! NMR-guy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 31.05.2018 14:42     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

(vb @ 30.05.2018 20:09)
Ссылка на исходное сообщение  А то у нас как всегда зафигачат культуральное оборудование с массспеками в затхлую конуру, а потом удивляются, почему вместо биотехнолорических прорывов на радость владимиру владимировиыу мы получили мандавошек размером с таракана.

Да никто уже не удивляется, все привыкли. lol.gif
А некоторые посредники - так даже и рады. tongue.gif
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 01.06.2018 16:02     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

(NMR-guy @ 31.05.2018 04:40)
Ссылка на исходное сообщение  Сотни миллионов рублей и 5-7 лет времени, из которых первые 1-2 года вы будете все заниматься ТОЛЬКО пусконаладкой того, что нужно.

Вам ещё предстоит построить настоящий стерильный и моющийся клеточный блок в здании обязательно с виварием, желательно - кроличьим, а не только крысо-мышиным. Если вивария нет - прибавьте еще 3-5 лет на его постройку, оборудование и сертификацию, бюджет 1,5-2 млрд рублей в зависимости от жадности подрядчиков.

А он исчо и ябеда...
футакимбыть....
Участник оффлайн! CowDoc
Постоянный участник
Middle East



 прочитанное сообщение 02.06.2018 10:19     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

Вопрос, вам как, временный бюджет слить надо или реальный Проект запустить?
В РФ много контор, кто серьезно работает, по международным стандартам. Все они ВСЕ!!! охреневшие и жадные, желающие минимум 200% прибыли получить, но работать нужно с ними, давить их и за жабры подвешивать.
Кто сможет пройти и предоставить полную бюрократию от/до по оборудованию/помещениям URS-FAT-SAT (URS-->FS-->DS-->IQ-->OQ-->PQ), с тем и работать.
Из последних, с кем работал и остался доволен, наши+французы:
Biotechno Group, 117587, Moscow, Dnepropetrovskaya, 2, +7 (495) 925-3453, +7 (495) 995-0565.
Да, и не слушайте всех этих теоретиков, многое зависит от объема конечного выпуска, если есть деньги и площади, то полгода согласование Проекта (вы должны донести свои идеи инженерам), столько же строительство и упаковка/наладка оборудования, запуск/отработка идет паралельно в пилотной лаборатории.
А то вам сейчас сказок по нарасказываю .... виварии для кроликов строить надо на первом этапе практически девелопмента )))

Сообщение было отредактировано CowDoc - 02.06.2018 10:23
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 02.06.2018 11:56     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

CowDoc! А вы уверены, что автору нужно пароизводство, а не ресерч?
Участник оффлайн! CowDoc
Постоянный участник
Middle East



 прочитанное сообщение 02.06.2018 13:14     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

2MMM
А для этого и делается изначально URS+FS, и проектировщику будет понятно, очередной шизик, или серьезные намерения.
Вы знаете, сколько встречается в последнее десятелетие:"Деньги есть, ты мне построй, а дальше уже само как-то!"
Участник оффлайн! Asgard




 прочитанное сообщение 05.06.2018 17:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

CowDoc
Нужен реальный проект.
Есть виварии для кроликов, в другом месте.

Tom1
Ну почему же одного антитела. Начинать нужно с одного, а дальше будут другие.


Главная задача - это проверить активность полученных вариантов антитела. И соответственно наладить все методики, чтобы можно было проверять другие антитела уже более потоково.
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 05.06.2018 22:33     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

(Asgard @ 05.06.2018 07:13)
Ссылка на исходное сообщение  CowDoc
Нужен реальный проект.
Есть виварии для кроликов, в другом месте.

Tom1
Ну почему же одного антитела. Начинать нужно с одного, а дальше будут другие.


Главная задача - это проверить активность полученных вариантов антитела. И соответственно наладить все методики, чтобы можно было проверять другие антитела уже более потоково.

определитесь нужны моноклоны или обойдетесь поликлонами?????
Участник оффлайн! Asgard




 прочитанное сообщение 06.06.2018 12:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

Нужны моноклональные, конечно. Сразу не написал.
Участник оффлайн! trickortip




 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.07.2019 13:42     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

Thanks for sharing this information. I really like your blog post very much. You have really shared a informative and interesting blog post with people. https://www.trickortip.com

Это СПАМ!
Это сообщение — спам.
Nett
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  22.06.2021 11:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

https://app.ex.co/stories/bestreplicawatche...-regime-for-you
https://rolexrelicawatches.hpage.com/replica-watches-uk.html
https://www.cgmimm.com/articles/hints-to-he...lica-watches-uk
https://www.deviantart.com/fakerolexwatches...es-UK-871090193
https://replicawatches24.exposure.co/best-r...eplicawatches24
https://knowyourmeme.com/users/replicawatchesuk
https://www.scoop.it/topic/bestreplicawatch...ica-rolex-watch
https://uberant.com/article/1268140-hints-o...ca-rolex-watch/
https://devpost.com/watcheshutuk
https://www.ted.com/profiles/26540630/about
https://drive.google.com/file/d/1uTx90WraSJ...iew?usp=sharing
https://ibb.co/hgfZwb0
https://writer.zohopublic.com/writer/publis...10192bd4c742ceb
https://replicawatches24.mystrikingly.com/b...ica-rolex-watch
https://my.desktopnexus.com/ReplicawatchesU...a-rolex--31049/
https://sway.office.com/Tqm7mC7s0VWLhKAl
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  20.11.2021 17:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

https://jumpshare.com/v/QxZ9Rn2mfDCaBq2AdBG1
https://www.edocr.com/v/znnrba3z/watcheshut...lica-Watches-UK
https://www.tuugo.us/Companies/best-replica...s/0310006695505
https://topsitenet.com/article/988178-hints...ca-rolex-watch/
http://simp.ly/p/nxGlWb
https://telegra.ph/Hints-on-Choice-of-a-Hig...lex-Watch-02-22
https://replicarolexwatche2.blog.fc2.com/blog-entry-1.html
https://www.knowpia.com/s/blog_60f7e7c31014a97a
https://zenwriting.net/replicawatches24/hin...ica-rolex-watch
https://globalcatalog.com/replicawatchesuk.us/en
http://www.cplusplus.com/articles/iE1wvCM9/
https://eatsleepride.com/c/346210/hints_on_...ica_rolex_watch
https://www.myminifactory.com/users/watcheshutukcom
https://www.mioola.com/ReplicawatchesUK/post/199764/
https://en.gravatar.com/allreplicawatches24
https://8tracks.com/replicawatchesuk
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.11.2021 14:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

https://archives.profsurv.com/forum/Profess...ert/-67881.aspx
https://atlanta.bubblelife.com/community/an...ex_Watch_Online
https://gumroad.com/rolexrelicawatches/p/di...replica-watches
https://onmogul.com/stories/guide-on-how-to...ex-watch-online
https://list.ly/i/5704105
https://www.behance.net/gallery/114237003/Replica-Rolex
https://www.mlbdailydish.com/users/Replicarolexwatches
http://replicawatches24.simplesite.com/
https://watcheshutuk.cabanova.com/
https://www.pinterest.com/watcheshutuk/_saved/
https://www.linkedin.com/pulse/guide-how-pu...online-hei-bai/
https://justpaste.it/8t11q
https://padlet.com/watcheshutuk/in2opwnfmnmclce8
https://www.allforxi.com/users/Replicarolexwatches
https://profile.hatena.ne.jp/Rolexrelicawatches/profile
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  24.11.2021 14:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

https://app.ex.co/stories/bestreplicawatche...-regime-for-you
https://rolexrelicawatches.hpage.com/replica-watches-uk.html
https://www.cgmimm.com/articles/hints-to-he...lica-watches-uk
https://www.deviantart.com/fakerolexwatches...es-UK-871090193
https://replicawatches24.exposure.co/best-r...eplicawatches24
https://knowyourmeme.com/users/replicawatchesuk
https://www.scoop.it/topic/bestreplicawatch...ica-rolex-watch
https://uberant.com/article/1268140-hints-o...ca-rolex-watch/
https://devpost.com/watcheshutuk
https://www.ted.com/profiles/26540630/about
https://drive.google.com/file/d/1uTx90WraSJ...iew?usp=sharing
https://ibb.co/hgfZwb0
https://writer.zohopublic.com/writer/publis...10192bd4c742ceb
https://replicawatches24.mystrikingly.com/b...ica-rolex-watch
https://my.desktopnexus.com/ReplicawatchesU...a-rolex--31049/
https://sway.office.com/Tqm7mC7s0VWLhKAl
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.11.2021 15:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

https://app.ex.co/stories/bestreplicawatche...-regime-for-you
https://rolexrelicawatches.hpage.com/replica-watches-uk.html
https://www.cgmimm.com/articles/hints-to-he...lica-watches-uk
https://www.deviantart.com/fakerolexwatches...es-UK-871090193
https://replicawatches24.exposure.co/best-r...eplicawatches24
https://knowyourmeme.com/users/replicawatchesuk
https://www.scoop.it/topic/bestreplicawatch...ica-rolex-watch
https://uberant.com/article/1268140-hints-o...ca-rolex-watch/
https://devpost.com/watcheshutuk
https://www.ted.com/profiles/26540630/about
https://drive.google.com/file/d/1uTx90WraSJ...iew?usp=sharing
https://ibb.co/hgfZwb0
https://writer.zohopublic.com/writer/publis...10192bd4c742ceb
https://replicawatches24.mystrikingly.com/b...ica-rolex-watch
https://my.desktopnexus.com/ReplicawatchesU...a-rolex--31049/
https://sway.office.com/Tqm7mC7s0VWLhKAl
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  04.12.2021 07:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

https://jumpshare.com/v/QxZ9Rn2mfDCaBq2AdBG1
https://www.edocr.com/v/znnrba3z/watcheshut...lica-Watches-UK
https://www.tuugo.us/Companies/best-replica...s/0310006695505
https://topsitenet.com/article/988178-hints...ca-rolex-watch/
http://simp.ly/p/nxGlWb
https://telegra.ph/Hints-on-Choice-of-a-Hig...lex-Watch-02-22
https://replicarolexwatche2.blog.fc2.com/blog-entry-1.html
https://www.knowpia.com/s/blog_60f7e7c31014a97a
https://zenwriting.net/replicawatches24/hin...ica-rolex-watch
https://globalcatalog.com/replicawatchesuk.us/en
http://www.cplusplus.com/articles/iE1wvCM9/
https://eatsleepride.com/c/346210/hints_on_...ica_rolex_watch
https://www.myminifactory.com/users/watcheshutukcom
https://www.mioola.com/ReplicawatchesUK/post/199764/
https://en.gravatar.com/allreplicawatches24
https://8tracks.com/replicawatchesuk
Участник оффлайн! Jaipur Escort
Постоянный участник
Jaipur



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  04.12.2021 14:03     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

Get Jaipur escort models for your fun night out

Today's time is going on in such a way that it can be told that nowadays men are not able to extinguish the fire of their bodies, so if you want to calm the fire of your body, then share your thoughts with Jaipur Call Girls. You can quench the fire of your body by spending the night

Jaipur Escorts

If you visit our site Jaipur Escorts, you can get all the information about how you can book our escort girls Jaipur is a very golden and lovely city in which you have a place to spend time. Partner will be required.

Jaipur Escort

Jaipur Escort is the best site in entire Rajasthan which provides you the best girls from all over Rajasthan who will treat you in such a way that she has not met you the first time and will give you the entire night you expect.

Jaipur Escort Service

The aim of Jaipur Escort Service is to provide the best and quality services to our customers and these services are also completely secure so that our customers do not face any kind of trouble and the full benefit of our customer escort serviceable to lift.

Locations For Escort Girls :-

Jaipur Escorts
Ajmer Escorts
Alwar Escorts
Banswara Escorts
Baran Escorts
Barmer Escorts
Bharatpur Escorts
Bhilwara Escorts
Bikaner Escorts
Bundi Escorts
Chittorgarh Escorts
Churu Escorts
Dausa Escorts
Dholpur Escorts
Dungarpur Escorts
Ganganagar Escorts
Hanumangarh Escorts
Jaisalmer Escorts
Jalore Escorts
Jhalawar Escorts
Jhunjhunu Escorts
Jodhpur Escorts
Karauli Escorts
Kota Escorts
Nagaur Escorts
Pali Escorts
Pratapgarh Escorts
Rajsamand Escorts
Sawai Madhopur Escorts
Sikar Escorts
Sirohi Escorts
Tonk Escorts
Udaipur Escorts
Indore Escorts
Betul Escorts
Bhind Escorts
Bhopal Escorts
Dewas Escorts
Dhar Escorts
East Nimar Escorts
Gwalior Escorts
Jabalpur Escorts
Neemuch Escorts
Rajgarh Escorts
Ratlam Escorts
Rewa Escorts
Sagar Escorts
Satna Escorts
Sheopur Escorts
Shivpuri Escorts
Ujjain Escorts
Vidisha Escorts
West Nimar Escorts
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  29.03.2022 07:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

rich371.6BettraysJean
JohnMejoSleeGirlJalo
SonyChicCanoCharAaro
OetkRobepassClasDuPo
TrutXVIIRondEmilCurv
FighRobePureCaudXVII
XVIIDelaPeteSticBala
JackCreoJeweOreaVenu
LinuKissOmegRondXVII
PatrChriKathSachconc
HummLydiVoguCircAvat
SonyFallBirdLycrAriz
FranErneGiorMargRoxy
VIIIJuleAlleGiacEtni
VoguPaliPhilJaakPali
SelaZoneElegSonyEric
LassWindHeleArtsluna
WhatHaroXVIIZoneMoon
PixaRobeDonaZoneZone
ZoneIrwiIrviKlauMORG
ZonemailDzhiZoneTake
AndrQumoVictHarrXVII
ZoneWindZoneGlendiam
XVIINewsWarsBlueMODA
PaulHANSCandBookCabr
BOOMPolaFierChicPETE
MistVanbSauvChriPROT
meloThistraciantHapp
BeadEnglsculTranInte
WindStubGrapAntiPhil
ClatStylIamsXenorles
PattwwwnTherWingHigh
wwwkWaltAureXVIIPros
AcrocredXVIIKareYves
NichSiemJonaWannTrue
ManyJeweLoveGerrLoui
MarlPhilLittWorlSaff
BengSeymJennRiteFree
MoviThomultrChriDUNG
ABBYGladDolbApplTwen
RichHonoJobsIntrFrom
BlueBlueBlueThisHans
BuddUltiDougRiseNaza
LoveRobeXVIIAndrRoss
tuchkasBrotImag
guest: 123
IP-штамп: frJhOCvSv9ICE
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  01.06.2022 12:42     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

It was supposed ปั่นสล็อต to last just nine CANDY BURST days - a staggered สูตรสล็อต lockdown to ALLBET lessen the impact on Shanghai's economy, 123VEGA state media said. It 11HILO lasted 65 days. It crippled the city and 123GOAL scarred its people. Restrictions are now 88KTC being eased as quickly as they FC SLOT were imposed. There's no gradual process AMB CASINO over several weeks.
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  28.06.2022 21:33     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

audiobookkeeper.rucottagenet.rueyesvision.rueyesvisions.comfactoringfee.ru
filmzones.rugadwall.rugaffertape.rugageboard.rugagrule.ru
gallduct.rugalvanometric.rugangforeman.rugangwayplatform.rugarbagechute.ru
gardeningleave.rugascautery.rugashbucket.rugasreturn.rugatedsweep.ru
gaugemodel.rugaussianfilter.rugearpitchdiameter.rugeartreating.rugeneralizedanalysis.ru
generalprovisions.rugeophysicalprobe.rugeriatricnurse.rugetintoaflap.rugetthebounce.ru
habeascorpus.ruhabituate.ruhackedbolt.ruhackworker.ruhadronicannihilation.ru
haemagglutinin.ruhailsquall.ruhairysphere.ruhalforderfringe.ruhalfsiblings.ru
hallofresidence.ruhaltstate.ruhandcoding.ruhandportedhead.ruhandradar.ru
handsfreetelephone.ruhangonpart.ruhaphazardwinding.ruhardalloyteeth.ruhardasiron.ru
hardenedconcrete.ruharmonicinteraction.ruhartlaubgoose.ruhatchholddown.ruhaveafinetime.ru
hazardousatmosphere.ruheadregulator.ruheartofgold.ruheatageingresistance.ruheatinggas.ru
heavydutymetalcutting.rujacketedwall.rujapanesecedar.rujibtypecrane.rujobabandonment.ru
jobstress.rujogformation.rujointcapsule.rujointsealingmaterial.rujournallubricator.ru
juicecatcher.rujunctionofchannels.rujusticiablehomicide.rujuxtapositiontwin.rukaposidisease.ru
keepagoodoffing.rukeepsmthinhand.rukentishglory.rukerbweight.rukerrrotation.ru
keymanassurance.rukeyserum.rukickplate.rukillthefattedcalf.rukilowattsecond.ru
kingweakfish.rukinozones.rukleinbottle.rukneejoint.ruknifesethouse.ru
knockonatom.ruknowledgestate.rukondoferromagnet.rulabeledgraph.rulaborracket.ru
labourearnings.rulabourleasing.rulaburnumtree.rulacingcourse.rulacrimalpoint.ru
lactogenicfactor.rulacunarycoefficient.ruladletreatediron.rulaggingload.rulaissezaller.ru
lambdatransition.rulaminatedmaterial.rulammasshoot.rulamphouse.rulancecorporal.ru
lancingdie.rulandingdoor.ruhttp://landmarksensor.rulandreform.rulanduseratio.ru
languagelaboratory.rulargeheart.rulasercalibration.rulaserlens.rulaserpulse.ru
laterevent.rulatrinesergeant.rulayabout.ruleadcoating.ruleadingfirm.ru
learningcurve.ruleaveword.rumachinesensible.rumagneticequator.rumagnetotelluricfield.ru
mailinghouse.rumajorconcern.rumammasdarling.rumanagerialstaff.rumanipulatinghand.ru
manualchoke.rumedinfobooks.rump3lists.runameresolution.runaphtheneseries.ru
narrowmouthed.runationalcensus.runaturalfunctor.runavelseed.runeatplaster.ru
necroticcaries.runegativefibration.runeighbouringrights.ruobjectmodule.ruobservationballoon.ru
obstructivepatent.ruoceanmining.ruoctupolephonon.ruofflinesystem.ruoffsetholder.ru
olibanumresinoid.ruonesticket.rupackedspheres.rupagingterminal.rupalatinebones.ru
palmberry.rupapercoating.ruparaconvexgroup.ruparasolmonoplane.ruparkingbrake.ru
partfamily.rupartialmajorant.ruquadrupleworm.ruqualitybooster.ruquasimoney.ru
quenchedspark.ruquodrecuperet.rurabbetledge.ruradialchaser.ruradiationestimator.ru
railwaybridge.rurandomcoloration.rurapidgrowth.rurattlesnakemaster.rureachthroughregion.ru
readingmagnifier.rurearchain.rurecessioncone.rurecordedassignment.rurectifiersubstation.ru
redemptionvalue.rureducingflange.rureferenceantigen.ruregeneratedprotein.rureinvestmentplan.ru
safedrilling.rusagprofile.rusalestypelease.rusamplinginterval.rusatellitehydrology.ru
scarcecommodity.ruscrapermat.ruscrewingunit.ruseawaterpump.rusecondaryblock.ru
secularclergy.ruseismicefficiency.ruselectivediffuser.rusemiasphalticflux.rusemifinishmachining.ru
spicetrade.ruspysale.rustungun.rutacticaldiameter.rutailstockcenter.ru
tamecurve.rutapecorrection.rutappingchuck.rutaskreasoning.rutechnicalgrade.ru
telangiectaticlipoma.rutelescopicdamper.rutemperateclimate.rutemperedmeasure.rutenementbuilding.ru
tuchkasultramaficrock.ruultraviolettesting.ru
Участник оффлайн! Ufa1688
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.10.2022 16:56     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

An individual ยูฟ่า1688 was arrested on October ufabet เข้าสู่ระบบ ทางเข้า 21 2022 pursuant to a request ลิงค์รับทรัพย์ from the United States UFA1688 of America for their provisional ufa1688 arrest a spokesman 123goal for the federal Attorney-General’s 123goal Department said in a written เครดิตฟรี statement. As the matter is before สล็อตออนไลน์ the court, it would not be appropriate 123VEGA to comment further
Участник оффлайн! vrida2
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.11.2022 02:33     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
сайтсайтсайтсайтсайт
tuchkasсайтсайт
Участник оффлайн! Ufa1688
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  13.05.2023 11:33     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

In previous ปั่นสล็อต coronations, the homage app aff1688 has been “the prerogative ทาง เข้า ufabet มือ ถือ of the Archbishop of Canterbury nigoal123 the Heir to the Throne แฮนดิแคป คือ followed by the Royal 123goal Dukes, and then the hereditary สูตรสล็อต peerage in order of degree,” the Church of England ufabet vip said. This time, the “homage of peers เกมสล็อต will be replaced by a “homage of the ทาง เข้า ufabet people,” the Church added.
guest: Ufa1688
IP-штамп: frqaYaYx2Y2ds
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  11.03.2024 19:39     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

The skiers were ราคาบอล aged between 21 and 58 UFA1688 according to an earlier police สล็อตออนไลน์ statement reported by Reuters. ufabet The family members were ทาง เข้า ufabet มือ ถือ from the Valais canton, while the sixth แทงบอล person is from the canton of Fribourg. ufa1688 Police did not reveal the อีสปอร์ต identities of the dead skiers, whose bodies แทงบอลออนไลน์ were found in Tête Blanche on Sunday ลิงค์รับทรัพย์ Reuters reported.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Организация работы группы/лаборатории · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 29.03.24 16:59
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft