Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Asgard |
Задача такая - есть референсное антитело с известной последовательностью. Нужно наработать это антитело, провести аланиновое сканирование его cdr областей и наиболее перспективные варианты клонировать в гибридомы для дальнейшей наработки и изучения. Может кто вкратце описать основные стадии и необходимое для этого оборудование. Или ткнуть меня туда, где об этом написано. Лаборатория планируется с нуля. Заранее спасибо. |
MMM Постоянный участник |
А вообще вам понадобится генноинженерная лаборатория это: бактериальный бокс(ы) термостаты с качалкой и без для выращивания культур бактерий Цетрифуги настольные и нет с охлаждением и нет до 15000g Твердотельные термостаты(лучше с охлаждением) под микропробирки. Термоциклер для ПЦР(ПЦР бокс) комплект оборудования для горизонтального электрофореза в агарозе вместе с системой визуализации Спектрофотометр в том числе и микрообъемный. Так же вам понадобится культурально клеточное оборудование. Клеточный бокс СО2-инкубатор цитоцентрифуга Инвертированный микроскоп Дьюар с жидким азотом и широким горлом(по другому называется криохранилище) Так же вам понадобится холодильное оборудование от +4 до - 80оС весовое оборудование, рН-метры, магнитные мешалки, качалки и тп Наборы автоматических микропипеток(дозаторов) лаб. столы и шкафы, вытяжные шкафы складские помещения в том числе и с холодильниками. А выглядит это примерно так с помощью предзаказанных олигонуклеотидов с соответствующими заменами на аланин делается библитека векторов(например фаговая) или экспрессирующая с соответствующими мутантами. Потом идет получение продуцетов или фагов с соответствующих пептидами. А вот потом идет скрининг и от того на ЧТО скрининг и какие методы будут использованный для скрининга зависит дополнительное оборудование, которое может включать. Белково-химическое оборудования начиная от хроматографии и электрофореза/иммуноблота в том числе и двумерного до ИФА(Который все равно понадобится для отбора целевых клонов) и заканчивая всяким другим оборудованием флуориметрами, проточными цитометрами, поверхностным плазмонным резонансом и масспектрометрами тд и тп |
Asgard |
А бюджет примерный сможете озвучить? хотя бы порядок цифр. P.S. Референсное антитело на бумаге. |
Tom1 Постоянный участник |
Круть крутая.... приблизительная цена оборудования ( без учета расходников которые тоже не дешевы... - инкубатор от от 2,5-10К $ ламинар примерно в ту же цену, центрифуги от 1К до 4К каждая. Микроскоп самый простенький 1,5К Дюар -350 Термостат с качалкой для бактером от 3.5К. цыклер от 1К ридер для ИФА от 5К мелкое оборудование: Пипетки автоматы сет 1.5-2К для електрофореза ДНК и белков от 4.5К Холодильники ну тут можно обойтись и бытовыми , но нужны на +4, -20 и -40. pH-метр, мешалки, качалки все оптом где-то 5-8К страшное оборудование типа масспека и еспиар котоое МММ в конце написал совершенно не обязательно есгть сервисные компании которые за денежку сделают вам сие анализы. Итого по минимуму 30.5К бакинских рублей. как говорил выше без расходников на них если с нуля примерно такая же сумма, может чуть меньше. Едем дальше какие антитела собираитесь получать очеловеченные или мышиные ???? в основе планируите полноразмерное антитело или только фрагмент??? остальное после ответов.... |
MMM Постоянный участник |
|
Tom1 Постоянный участник |
|
Tom1 Постоянный участник |
тогда даже больше ляма получится.... по минимуму можно обойтись 70-100К.... |
MMM Постоянный участник |
Сообщение было отредактировано MMM - 30.05.2018 18:59 |
vb Постоянный участник |
|
vb Постоянный участник |
|
Tom1 Постоянный участник |
(vb @ 30.05.2018 10:09) А то у нас как всегда зафигачат культуральное оборудование с массспеками в затхлую конуру, а потом удивляются, почему вместо биотехнолорических прорывов на радость владимиру владимировиыу мы получили мандавошек размером с таракана. Желчь унд зависть детектед.... )))) |
vb Постоянный участник |
(Tom1 @ 30.05.2018 20:59) Я тебя умоляю. Я так долго все это наблюдаю, что почти смирился и постиг дзен. Но иногда рецидивы надежды на логику и здравый смысл бывают. |
NMR-guy Постоянный участник временной жизни |
(Asgard @ 30.05.2018 14:36) MMM, спасибо за подробный ответ! А бюджет примерный сможете озвучить? хотя бы порядок цифр. P.S. Референсное антитело на бумаге. Сотни миллионов рублей и 5-7 лет времени, из которых первые 1-2 года вы будете все заниматься ТОЛЬКО пусконаладкой того, что нужно. Вам ещё предстоит построить настоящий стерильный и моющийся клеточный блок в здании обязательно с виварием, желательно - кроличьим, а не только крысо-мышиным. Если вивария нет - прибавьте еще 3-5 лет на его постройку, оборудование и сертификацию, бюджет 1,5-2 млрд рублей в зависимости от жадности подрядчиков. |
NMR-guy Постоянный участник временной жизни |
(vb @ 30.05.2018 20:09) А то у нас как всегда зафигачат культуральное оборудование с массспеками в затхлую конуру, а потом удивляются, почему вместо биотехнолорических прорывов на радость владимиру владимировиыу мы получили мандавошек размером с таракана. Да никто уже не удивляется, все привыкли. А некоторые посредники - так даже и рады. |
Tom1 Постоянный участник |
(NMR-guy @ 31.05.2018 04:40) Сотни миллионов рублей и 5-7 лет времени, из которых первые 1-2 года вы будете все заниматься ТОЛЬКО пусконаладкой того, что нужно. Вам ещё предстоит построить настоящий стерильный и моющийся клеточный блок в здании обязательно с виварием, желательно - кроличьим, а не только крысо-мышиным. Если вивария нет - прибавьте еще 3-5 лет на его постройку, оборудование и сертификацию, бюджет 1,5-2 млрд рублей в зависимости от жадности подрядчиков. А он исчо и ябеда... футакимбыть.... |
CowDoc Постоянный участник Middle East |
В РФ много контор, кто серьезно работает, по международным стандартам. Все они ВСЕ!!! охреневшие и жадные, желающие минимум 200% прибыли получить, но работать нужно с ними, давить их и за жабры подвешивать. Кто сможет пройти и предоставить полную бюрократию от/до по оборудованию/помещениям URS-FAT-SAT (URS-->FS-->DS-->IQ-->OQ-->PQ), с тем и работать. Из последних, с кем работал и остался доволен, наши+французы: Biotechno Group, 117587, Moscow, Dnepropetrovskaya, 2, +7 (495) 925-3453, +7 (495) 995-0565. Да, и не слушайте всех этих теоретиков, многое зависит от объема конечного выпуска, если есть деньги и площади, то полгода согласование Проекта (вы должны донести свои идеи инженерам), столько же строительство и упаковка/наладка оборудования, запуск/отработка идет паралельно в пилотной лаборатории. А то вам сейчас сказок по нарасказываю .... виварии для кроликов строить надо на первом этапе практически девелопмента ))) Сообщение было отредактировано CowDoc - 02.06.2018 10:23 |
MMM Постоянный участник |
|
CowDoc Постоянный участник Middle East |
А для этого и делается изначально URS+FS, и проектировщику будет понятно, очередной шизик, или серьезные намерения. Вы знаете, сколько встречается в последнее десятелетие:"Деньги есть, ты мне построй, а дальше уже само как-то!" |
Asgard |
Нужен реальный проект. Есть виварии для кроликов, в другом месте. Tom1 Ну почему же одного антитела. Начинать нужно с одного, а дальше будут другие. Главная задача - это проверить активность полученных вариантов антитела. И соответственно наладить все методики, чтобы можно было проверять другие антитела уже более потоково. |
Tom1 Постоянный участник |
(Asgard @ 05.06.2018 07:13) CowDoc Нужен реальный проект. Есть виварии для кроликов, в другом месте. Tom1 Ну почему же одного антитела. Начинать нужно с одного, а дальше будут другие. Главная задача - это проверить активность полученных вариантов антитела. И соответственно наладить все методики, чтобы можно было проверять другие антитела уже более потоково. определитесь нужны моноклоны или обойдетесь поликлонами????? |
Asgard |
|
trickortip |
|
watchesbiz Постоянный участник |
|
watchesbiz Постоянный участник |
|
watchesbiz Постоянный участник |
|
watchesbiz Постоянный участник |
|
watchesbiz Постоянный участник |
|
Jaipur Escort Постоянный участник Jaipur |
Today's time is going on in such a way that it can be told that nowadays men are not able to extinguish the fire of their bodies, so if you want to calm the fire of your body, then share your thoughts with Jaipur Escorts If you visit our site Jaipur Escort Jaipur Escort Service The aim of Locations For Escort Girls :- |
vrida2 Постоянный участник |
|
guest: 123 IP-штамп: frJhOCvSv9ICE гость |
|
vrida2 Постоянный участник |
|
Ufa1688 Постоянный участник |
|
vrida2 Постоянный участник |
|
Ufa1688 Постоянный участник |
|
guest: Ufa1688 IP-штамп: frqaYaYx2Y2ds гость |
|
« Предыдущая тема · Организация работы группы/лаборатории · Следующая тема » |