Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Serebroza |
У меня проблемы с агарозой. Она неудерживается на предметном стекле(легкоплавкая)После застывания,нанесении на поверхность агарозы клеток и лизиса в течении двух часов(методика) часть ее "убегает"с предметного стекла.Может кто знает почему она смыватся или млжно как то увеличить поверхность стекла. ? |
MMM Постоянный участник |
|
Serebroza |
(MMM @ 23.12.2017 16:14) Так мыли, она все равно убегает. Спиртом обрабатывали еще. |
MMM Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
(Serebroza @ 23.12.2017 17:23) Это вы зря нонче спирт в научные организации поставляется такой, что им только пол мыть и в спиртовках жечь. |
Serebroza |
(MMM @ 23.12.2017 23:53) Это вы зря нонче спирт в научные организации поставляется такой, что им только пол мыть и в спиртовках жечь. Сначала мыльным раствором, подсохли немного и спиртом протерли. Перед нанесением агарозы,промывали водой от пыли,которая появилась. Может спиртом не надо? Может плавиково1 кислотой обрабатывать?? |
metrim Постоянный участник Москва |
(Serebroza @ 24.12.2017 16:43) Сначала мыльным раствором, подсохли немного и спиртом протерли. Перед нанесением агарозы,промывали водой от пыли,которая появилась. Может спиртом не надо? Может плавиково1 кислотой обрабатывать?? Нехрена себе у вас спирт, что из него "пальный осадок" выпадает ! Вы часом не настойкой ли боярышника пользуетсь? А "мыльный раствор", это часом не "сейфгард" ли какой? Зачем вам "плавиковая кислота" ? что бы стекло растворить что ли? Если уж охота по жести - серной кислотой или хромпиком стекла прожгите, затем - водой ополосните тщательно. Ну или пользуйтесь нормальными современными стеклами, а не тратьтте время а регенерацию советских запасов. |
Serebroza |
(metrim @ 24.12.2017 16:57) Нехрена себе у вас спирт, что из него "пальный осадок" выпадает ! Вы часом не настойкой ли боярышника пользуетсь? А "мыльный раствор", это часом не "сейфгард" ли какой? Зачем вам "плавиковая кислота" ? что бы стекло растворить что ли? Если уж охота по жести - серной кислотой или хромпиком стекла прожгите, затем - водой ополосните тщательно. Ну или пользуйтесь нормальными современными стеклами, а не тратьтте время а регенерацию советских запасов. Да что есть тем и пользуемся. Мы вообще студенты...это наше задание над которым мы работаем. Что конкретно нужо сделать чтобы агароза не 'убегала'. Что вы имеете в виду пож современными стеклами? Обыкновенные предметные стекла у нас. |
metrim Постоянный участник Москва |
Тогда нужно гидрофилизировать поверхность стекла или покупать фабричные нормальные уже гидрофилизированные стекла. Если у вас "убегает в процессе фореза", то помните , что агароза то у вас ЛЕГКОПЛАВКАЯ, а ток разогревает электролит. Охлаждать значит надо систему. |
ksm Постоянный участник |
|
Serebroza |
(ksm @ 24.12.2017 19:47) Спасибо большое!!! |
Serebroza |
(metrim @ 24.12.2017 18:26) А что значит "кбегает" ? Отрывается от стекла после нанесения и застывания? Тогда нужно гидрофилизировать поверхность стекла или покупать фабричные нормальные уже гидрофилизированные стекла. Если у вас "убегает в процессе фореза", то помните , что агароза то у вас ЛЕГКОПЛАВКАЯ, а ток разогревает электролит. Охлаждать значит надо систему. Спасибо большое! |
Pharmaсol Постоянный участник |
Не надо мыть стекла ничем, за все время у нас лишь однажды попалась партия стекол, с которых слетала агароза, причем то, что "не такие" было заметно, когда наносилась подложка - агарозный гель с трудом удавалось растянуть по стеклу. |
Serebroza |
(Pharmaсol @ 24.12.2017 23:00) Слой легкоплавкой с клетками к подложке из тугоплавкой прилипает намертво. У вас слезает нижний слой. Надеюсь подложку заранее делаете и не из легкоплавкой агарозы? Не надо мыть стекла ничем, за все время у нас лишь однажды попалась партия стекол, с которых слетала агароза, причем то, что "не такие" было заметно, когда наносилась подложка - агарозный гель с трудом удавалось растянуть по стеклу. Подложка из легкоплавкой. Потом наносим смесь клеток тоже с лекгоплавкой. Лучше из тугоплавкой делать?? |
Pharmaсol Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
|
semi Постоянный участник Москва |
(Pharmaсol @ 24.12.2017 23:00) Слой легкоплавкой с клетками к подложке из тугоплавкой прилипает намертво. У вас слезает нижний слой. Надеюсь подложку заранее делаете и не из легкоплавкой агарозы? Не надо мыть стекла ничем, за все время у нас лишь однажды попалась партия стекол, с которых слетала агароза, причем то, что "не такие" было заметно, когда наносилась подложка - агарозный гель с трудом удавалось растянуть по стеклу. Точно, гель никогда не уплывал. Брала предметные стёкла Menzel из коробочки,окунала в горячий водный раствор 0,1% обычной агарозы, сушила в вертикальном положении на салфетке. Раствор при вынимании стекла из стакана был равномерно распределён по поверхности, в капли и дорожки не собирался. Дело двух минут. И 10-15 минут ожидания того, что стекла высохнут. |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |