Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Леонид В Постоянный участник Квебек |
Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) |
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
|
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
|
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Дядя ФАКСер @ 24.10.2018 05:02) Вручную, точность "посадки" будет +/-6 клеток (в самом идеальном случае, без учета ошибки пипеточной и прочего). Так что "положить именно 300 клеток" не получится да кабы +/-6 я б от радости плясал. У меня, если в разные дни посмотреть, +/- 60 и больше. Вот и думаю, может какие тайные приёмы есть, а я только в камеру дышать перед притиранием умею. Например, что лучше: два раза забрать по 10 ul и в трипанку, и считать или один раз 20, в трипанку и две камеры заправить. По науке вроде второе? А сортером и прочее — никак. Только старым казачьим. |
dan14444 Участник |
На крайний случай - берём совсем разбавленную суспенизю, фигачим со скорстью одна клетка в пару секунд, смотрим на счётчик и вручную останавливаем?... |
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
(Леонид В @ 25.10.2018 03:34) Ну дык, ручками же. Чего мучаться,коли сортер в фасилити есть с опцией разброса в планшеты. Хотя,конечно,в режиме single cell sorting примерно 70-80% клеток (в мусор,при отсеве по маске),но зато в каждой лунке будет именно столько,сколько требуется. |
dan14444 Участник |
Ну или глазками, под микроскопом плывущие по капиллярчику отсчитать, если надо всего несколько раз. |
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
|
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
(Леонид В @ 25.10.2018 03:34) Почему? |
dan14444 Участник |
Дык,дело то не посчитать,а раскидать smile.gif Ну дык я и описал "раскидывалку", а не "считалку" ). Если из лунки в лунку ручками конец капилляра и электрод переносить лень - добавляем любой автосэмплер...Ну и если глазками смотреть - как 300 насчитал, так капилляр перенёс или поток остановил Сообщение было отредактировано dan14444 - 25.10.2018 22:11 |
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Дядя ФАКСер @ 25.10.2018 15:01) по причинам не имеющим ничего общего с наукой (бывает и так) Но надо! Бывает что с 11 до полудня раскапаю клеточки в луночки сортером по 423, например, на лунку, помою его родимого, зачехлю . А с 17 до 18 распихиваю по 300 в лунку ручками вспомнил еще что надо обязательно потрясти камеру кверху тормашками перед заправлением в нея суспензии. Стекло не должно падать. А еще не дай Бог задеть стекло наконечником когда заправляешь клетки. Но больше пока ничего не вспоминается. Ладно, раз никто не помнит, пойду гуглить GMP при работе с гемоцитометром. |
Guest IP-штамп: frO0h4bZNqbVc гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) леня если в камере гаряева зыркаеш 10 000 клетков усе ОК |
Guest IP-штамп: frO0h4bZNqbVc гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно если ручонки из жопы растут то да |
Guest IP-штамп: frO0h4bZNqbVc гость |
Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) [/quote] Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) [/quote] придурок дыхни паром на стекло прикрасно притрется |
Guest IP-штамп: frO0h4bZNqbVc гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) леня вам похоже на Тихорецкий 4 в Питере в Институт Цитологии или в кащенку в Москве |
Guest IP-штамп: frO0h4bZNqbVc гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) |
Guest IP-штамп: frGhpw4XOJRLU гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) у биорада есть куевина считает с трипановым синим под стиклом живых и дохлых |
Guest IP-штамп: frGhpw4XOJRLU гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) TC20™ Automated Cell Counter #1450102 | Научные... bio-rad.com›ru-ru/sku/1450102-tc20…cell-counter… Copyright © 2019 Bio-Rad Laboratories, Inc. Все права защищены. Научные исследования. ... TC20™ Automated Cell Counter. 120–240 V, includes instrument, power supply, USB flash drive, 30 dual-chamber counting slides (60 counts), 1.5 ml trypan blue. 1450102 [x-forwarded-proto] = [https] [x-forwarded-port] = [443]... Читать ещё |
Guest IP-штамп: frGhpw4XOJRLU гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) ну не знаю биорадовский ТЦ20 нормально куячит без притирки Фукса Розенталя |
Guest IP-штамп: frGhpw4XOJRLU гость |
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10) Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность) Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ? Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо. Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое) |
CowDoc Постоянный участник Middle East |
|
CowDoc Постоянный участник Middle East |
Картинки: __.JPG — (30.31к)
|
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
(CowDoc @ 04.12.2019 08:43) Сейчас рутину боксовую на вот эти изделия пытаюсь перевести Scepter™ 2.0 Cell Counter, с взаимозаменяемыми ячейками. Посмотрю как приживутся. Разница в цене в РФ, и у нас в Африке различается в два раза. Любят себя торгаши нашенские очень. А со следующего года, еще и софт бярястовый заставят ставить Cкптр- неточные, к сожалению. ViCell лучше
|
CowDoc Постоянный участник Middle East |
(Дядя ФАКСер @ 10.12.2019 19:02) Я понимаю, но с моими "специалистами" % ошибки аппарата, всяко меньше, чем они в камере считают. Для рутины подойдет. У меня нет такой строгой задачи как для клонирования. Пролиферация клеток и расчет MOI - заражающей дозы. Производство (((
|
Guest IP-штамп: frmFdWRV.LvPs гость |
(CowDoc @ 11.12.2019 09:41) Я понимаю, но с моими "специалистами" % ошибки аппарата, всяко меньше, чем они в камере считают. Для рутины подойдет. У меня нет такой строгой задачи как для клонирования. Пролиферация клеток и расчет MOI - заражающей дозы. Производство ((( "чем они в камере считают" © опечатка по Фрейду
|
Guest IP-штамп: frmFdWRV.LvPs гость |
(CowDoc @ 11.12.2019 09:41) Я понимаю, но с моими "специалистами" % ошибки аппарата, всяко меньше, чем они в камере считают. Для рутины подойдет. У меня нет такой строгой задачи как для клонирования. Пролиферация клеток и расчет MOI - заражающей дозы. Производство ((( |
CowDoc Постоянный участник Middle East |
(Guest @ 11.12.2019 14:16) Этой статье, 100 лет в обед! И поверьте, биолог 100% может, и даже телевизор ))) В свое время были ФОПЭ при ВУЗах, даже биологических. Как альтернативная профессия, и обучались, совершенно for free |
CowDoc Постоянный участник Middle East |
(Дядя ФАКСер @ 10.12.2019 19:02) Да, согласен, очень не точный. И откалибровать пока не могу. Полное разочарование Надеюсь Гамильтоновский будет лучше работать. И буду заказывать ViCell
|
Guest IP-штамп: frQcRsdSDEgyM гость |
(CowDoc @ 26.01.2020 13:16) Да, согласен, очень не точный. И откалибровать пока не могу. Полное разочарование Надеюсь Гамильтоновский будет лучше работать. И буду заказывать ViCell "И буду заказывать ViCell" © докыч счастливого полета |
Guest IP-штамп: frQcRsdSDEgyM гость |
(CowDoc @ 12.12.2019 09:27) Этой статье, 100 лет в обед! И поверьте, биолог 100% может, и даже телевизор ))) В свое время были ФОПЭ при ВУЗах, даже биологических. Как альтернативная профессия, и обучались, совершенно for free докыч скока телевизорофф пачинил в ебипте |
Guest IP-штамп: frQcRsdSDEgyM гость |
(CowDoc @ 12.12.2019 09:27) Этой статье, 100 лет в обед! И поверьте, биолог 100% может, и даже телевизор ))) В свое время были ФОПЭ при ВУЗах, даже биологических. Как альтернативная профессия, и обучались, совершенно for free Ю. Лазебник МОЖЕТ ЛИ БИОЛОГ ПОЧИНИТЬ РАДИОПРИЁМНИК, ИЛИ ЧТО Я ПОНЯЛ ИЗУЧАЯ АПОПТОЗ* Колд Спринг Харбор Лаборатори, Колд Спринг Харбор, Нью Йорк 11724, США (Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY 11724). E-maill: lazebnik@cshl.org докыч ваамщето Юра Лазебник професор в колд спринг харборе а ты ремонтер телевизоров |
Guest IP-штамп: frj6C.yQKBCxg гость |
(Дядя ФАКСер @ 10.12.2019 19:02) дядя висел для психов которые мерют ДОЗОВЫЕ КРИВЫЕ в 96 луночных плашках трипановым выживаемоисть клетков от передозировки аспирина |
Guest IP-штамп: froIhZTvg5WUw гость |
|
CowDoc Постоянный участник Middle East |
|
« Предыдущая тема · Клеточные технологии · Следующая тема » |