Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
SkyGen Участник Москва |
Под доступностью мы понимаем цены близкие или равные европейским, собственный склад реактивов и оборудования, доставку за 1-3 дня в любой крупный город России. Иными словами, мы делаем все возможное, чтобы поставить Вам качественную продукцию, недорого и быстро. Мы начали с New England Biolabs и у нас получилось! Мы верим в то, что чтобы быть близким к Вам, недостаточно просто выставлять счета и осуществлять доставку. «Логистических» и «каталожных» компаний много и все они известны. Нам же важно глубоко разобраться в теме и быть поддержкой для Вас. Для этого мы публикуем новости, обзоры и высоко ценим любые замечания и критику. Каждый продукт мы «пропускаем» через себя. Анализируем плюсы и минусы, представляем, как и где он будет работать, консультируемся с Вами. И, как результат, создаем методички, семинары и презентации. Мы стараемся угнаться за Вами в научном познании мира, мы стараемся учиться и расти вместе с Вами. Даже уйдя из науки, мы все равно остались в душе искателями и открывателями. Пусть наша работа будет полезна Вам - и в этом мы видим свою реализацию. Мы являемся официальными дистрибьюторами New England Biolabs, QIAGEN, Agilent Technologies, Oxford Nanopore Technologies, 10x Genomics, Macherey-Nagel, NIMAGEN, IDT, Thermo Scientific, SIGMA-ALDRICH, ChemGenes, Bio Molecular Systems, Gilson. У нас есть сервисная служба. Мы осуществляем обслуживание, калибровку и поверку дозаторов, лабораторных весов и ПЦР-амплификаторов различных производителей, а также занимаемся организацией валидации оборудования IQ/OQ. Сообщение было отредактировано SkyGen - 12.02.2018 15:54 |
SkyGen Участник Москва |
Мы хотим еще раз обратить ваше внимание на аналоги реактивов для секвенирования на платформе ABI Genetic Analyzer, от компании Nimagen. Данные реактивы, которые позволят сэкономить значительные средства при проведении Ваших экспериментов. Теперь, при работе на платформах ABI Genetic Analyzers 3100, 3130, 3130XL, 3500, 3500XL, 3730 & 3730XL, воспользуйтесь Если вы планируете проведение экспериментов секвенирования по Сэнгеру, то ваша работа будет разделена не несколько этапов, на каждом из которых мы сейчас коротко остановимся, и расскажем, какие продукты потребуются для реализации каждого шага. Платформы, на которых работают сегодня большинство исследователей, для проведения секвенирования по Сэнгеру: ABI Genetic Analyzers 310, 3100, 3130, 3130XL, 3500, 3500XL, 3730 & 3730XL. Данные приборы отличаются друг от друга прежде всего количеством капилляров, и следовательно производительностью. Выделение исследуемого образца ДНК На первом этапе необходимо выделить образец ДНК из вашего образца и очистить его. На данном этапе мы рекомендуем воспользоваться Реакция терминируюшего секвенирования с использованием BrightDye После проверки качества очистки и оценки количества выделенной ДНК, можно приступить к реакции терминирующего секвенирования: введения флуоресцентной метки в фрагменты ДНК разной длины, которые будут далее анализироваться на одной из платформ. Фрагменты разной длины образуются благодаря обрыву цепи по время ПЦР, который происходит во время встраивания флуоресцентно меченых дидезоксинуклеотидов. Проведение данного этапа, для дальнейшего исследования на всех платформах (ABI 310, 31xx, 3500 и 3730 ) успешно обеспечивается В готовую смесь для проведения терминирующего секвенирования достаточно добавить образец ДНК для секвенирования и праймеры согласно протоколу (прикреплен к данному обзору). Набор реактивов полностью аналогичен реактивам Bigdye 3.1, и позволяет получить аналогичные результаты, что подтверждено ведущими лабораториями Москвы и Новосибирска. На рисунках 1 и 2 представлены результаты проведения секвенирования с использованием BrigthDye и Bigdye в сравнении. Результаты любезно предоставлены исследователями из Института цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск. Рис.1. Сравнение секвенирования с использованием BrightDye (A), Bigdye (Б), в 35 мкл реакционной смеси добавляли 4 мкл готовой смеси для секвенирования, количество образца ДНК (pGEM ) - 300 fmole, количество праймера - 8 pmole. Рис.2. Сравнение секвенирования с использованием BrightDye (A), Bigdye (Б), в 35 мкл реакционной смеси добавляли 2 мкл готовой смеси для секвенирования, количество образца ДНК (pGEM ) - 300 fmole, количество праймера - 8 pmole. Из рисунков видно, что реактивы дают аналогичные результаты, причем при разбавлении аликвоты готовой смеси для секвенирования в 2 раза, качество полученных результатов не страдает. Многократное разбавление готовых смесей для секвенирования Ни для кого из нас не секрет, что даже при разбавлении готовой смеси для секвенирования многократно по сравнению с рекомендуемым протоколом, возможно проведение удачной реакции секвенирования. Мы предлагаем дополнительно приобрести буфер для секвенирования, для этих целей: Специальные добавки для улучшения качества реакции секвенирования Специально для сложных образцов ДНК мы предлагаем воспользоваться нашей новинкой - Также, мы рекомендуем другую нашу новинку: Очистка реакционной смеси после реакции с терминирующими дидезоксинуклеотидами После проведения реакции с терминирующими дидезоксинуклеотидами, очень важно правильно провести очистку, перед проведением анализа образца на платформе ABI. Из нашего опыта общения с клиентами хочется акцентировать внимание на этом этапе - грамотная очистка образца поможет избежать многих проблем и обеспечит вас хорошими результатами. Мы предлагаем 2 варианта очистки, каждый из которых протестирован для очистки перед секвенированием по Сэнгеру. В качестве альтернативы мы хотим предложить набор для энзиматической очистки ПЦР-смеси, который также специально предназначен для очистки перед проведением секвенирования - это [url=] набор ферментов для быстрой очистки реакционной ПЦР реакции [/url=http://www.skygen.com/catalog/biohimicheskie_reaktivy/new_england_biolabs/reaktivy_dlya_modifikatsii_nk/nukleazy/fermenty_dlya_bystroy_ochistki_reaktsionnoy_ptsr_reaktsii/] от New England Biolabs. Входящие в состав смеси ферменты - экзонуклеаза I и щелочная фосфатаза обеспечивают недорогую очистку ПЦР-смеси за 15 минут. Набор специально предназначен для исследователей, которые хотят отойти от традиционной очистки при помощи колонок, экстракции и осаждения. Если вы привыкли использовать для очистки AMPure XP, Agencourt Beckman, и не хотите менять методику очистки - мы можем предложить уменьшить стоимость очистки, не меняя протокола при помощи Полимеры для секвенирования на различных платформах и буферные растворы для электрофореза Для проведения непосредственно капиллярного электрофореза вам потребуется заполнить капилляры вашего приборы полимером определенного типа. Между собой полимеры отличаются процентным содержанием диметилакриламида. Например, мы предлагаем Буферные растворы представлены буферами с ЭДТА CE10X, с ЭДТА NanoPOP 10X, NanoPOP 1X, ЭДТА CE10X для 3500. Все полимеры являются полными аналогами полимеров серии POP, и были протестированы ведущими научными центрами Москвы и Новосибирска (данные не представлены). Отдельно отмечалось, что полимеры серии NanoPOP позволяют разделять пики в составе гомополимеров после 900 п.о. Пользователи имеют возможность начать использовать новый полимер для своего анализатора, не меняя существующий рабочий модуль и с использованием стандартного протокола и методики. Нет необходимости в новой спектральной калибровке приборов. Вы можете использовать новую матрицу для улучшения пропускной способности и разрешения Вашего 3100 Genetic Analyzer, не затрачивая средств на изменение других параметров анализатора. Весь перечень доступных полимеров и буферных растворов для электрофореза с ценами можно посмотреть Очистка капилляров Мы рады также представить Кроме перечисленных выше реактивов, доступны также стандарты длин ДНК (красный, оранжевый, двойной) и раствор формамида (для 3730, 3130, 3100, 310). Мы искренне надеемся, что информация, которую мы сегодня представили вашему вниманию будет полезна и позволит удешевить, убыстрить и упростить проведение ежедневной работы в лаборатории. Сообщение было отредактировано SkyGen - 24.02.2015 12:51 |
страницы (9): 1 2 3 > » |