Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* GFP зараза токсичен.
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Sergeant
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 13:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

На моих первичных VSMC клетках EGFP (Clontech version) явно токсичен.
Чем лучше клетки инфицируем (трансфецируем) , тем меньше их выживает.
поставлено масса контролей и эффект отлично воспоизводится.
Помню вроде Stratagene сляпали менее токсичную версию GFP.
Кто нибудь с этим работал?

PS Даже разные методы делали:
1.Amaxa
2. Ретровирусы
Участник оффлайн! guest123
Участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 14:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

U menya pohozhe analogichnaya problema s Clontech EGFP, tol'ko dlya Drosophili. Hotya, ya ne mogu skazat', chto delal absolyutno vse neobhodimie controli
Участник оффлайн! yack
moderator
Москва, Россия



 прочитанное сообщение 26.03.2003 15:35     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Чаще всего токсичен не сам GFP (я по крайней мере такого не видел) а его fusion с тем или иным белком в силу стерических причин. Мне обычно помогала перестановка GFP с C на N.
Участник оффлайн! guest123
Участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 16:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

To yack:

Mozhet bit', tol'ko v moem sluchae rech' idet imenno ob EGFP, a ne fusion s nim.
Участник оффлайн! kglebov
Постоянный участник
Германия Гёттинген



 прочитанное сообщение 26.03.2003 17:01     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Да, у меня тоже была такая же проблема, с Клонтехом pd EGFP-N1. Но мы посчитали, что это от CMV промотера, он нам всю клетки до верху забил этим EGFP. Но мы на это сильного много внимания не обращали. Для нашей цели и так было хорошо... Неужели так сильно мрут?
Участник оффлайн! Sergeant
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 17:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

to kglebov
Мрут, еще как мрут. У меня в ретровирус загнан EGFP из pEGFP-C3.
Там где доза гена не высока клетки выжывают. Где доза гена побольше дохнут и перед смертью светят как фонари. В общем для меня EGFP не критичен. Он у меня сам как один из контролей. Но как в известном анекдоте " Вилки то нашлись, но осадок остался"
Были у меня задумки позднее использовать его для фьюжена с другими белочками, но сейчас я в этом шибко сомневаюсь.
Участник оффлайн! legion
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 17:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

Информация к размышлению- чистый в концентрации 10мкг/мл очень хорошо лицирует еритроциты и клетки мембраны которых богаты холестерином. при этом он однозначно встраивается в мемрану. Механизм лизиса судя по всему схож с лизисом клеток дигитонином, мелитино и стрптолизином
Ето личные данные феномен был нами обнаружен лет 5 назад.
Участник оффлайн! guest123
Участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 17:58     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

To legion:

Est' li kakie-nibud' opublikovannie dannie?
Участник оффлайн! legion
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 18:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Нет к сожалению это была даже не работа а так независемое удовлетворемие любопытства однаружен был случано когда решили использовать в качестве отризательного контроля на белок гемолизина бактериально синтезированного в безклетке т.к. там же получали вот и решили.
Ну а когда получилось что т.н отризател;ный контроль сам лизирует уже проверили на чистом и на разных клетках.
Единстенное косвенное подтревждение этого факта стаtья каких-то японцев помню что в Febs. Они получали траnсгенных мышей и смотрели распределение GFP по тканям так вот и получалось что в клетках крови (еритроциты), мозга, и серца ) не было свечения а на вестерне GFP детектировался . Мы получили тоже самое еритроциты не светятся а в мемранной фракции GFP.
Pочему холестерин т.к. если если еритроциты предварительно обработать выше перечисленными агентами (получить тени еритроцитов т.е. фактически одну мембрану)
еффекта не наблюдается а если получать тени д.водой то все на месте. У мелитина дигитонима и стрептолизина мишень в мембране холестерин он им необходим для формирования пору.
Во блин расписался


[Текст переведён с транслита]

[Текст переведён с транслита]
Участник оффлайн! Olegovitch
Постоянный участник
Cantabrigia, Anglia Oriens



 прочитанное сообщение 26.03.2003 18:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

to legion: что же это получается - GFP per se взаимодействует с холестерином в мембране ? Тогда почему он не в рафтах сидит, а по всему цитозолю раскидан? Я почему спрашиваю - у меня GPI-GFPs хорошо кластеризуются, предположительно в рафтах, холестерин-зависимым образом. А артефактов публиковать как-то не хочется...
Участник оффлайн! legion
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 20:20     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

Олегович а только сказал что сказал сам понимаешь детально мы это не копали. я думаю что этот процесс сильно зависим от количества и возмогно качста(легкий тяжелый) холестерина в мембранах. В еритроцитарной мембране а также в клетках мозга ( не восвех ) и сергечных клетках его содержание высоко.
В гругих типа меньше .
косвенно подтверждается и таким фактом как лизиц различных типов клеток дигитонином и в сравнении со стрептолизином принцип лициса один и тот же взаимодействие с островками холестерина в мембране и образование "дырок" однако если оба агента очень хорошо лизируют еритроциты а дигитонин ( все лизирует) то стрептолизин на различных типах клеток показывает различную степень лизиса и даже используется как перентрирующий агетн для трансфекции ДНК в клетки млеков.Я постораюсь отыскать работу японцев и пошлю тебе.
Участник оффлайн! Vadim Sharov
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 26.03.2003 21:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

Kto skazal, chto GFP po citisolyu ravnomerno raskidan?
Dannye korfokora govoryat, chto dve treti v membrane tret' v vodnoj faze. Sam po sebe.
No skol'ko v kletke membran?
Участник оффлайн! Olegovitch
Постоянный участник
Cantabrigia, Anglia Oriens



 прочитанное сообщение 26.03.2003 22:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

Автор - Vadim Sharov:
Kto skazal, chto GFP po citisolyu ravnomerno raskidan?
Rizzuto R, Brini M, Pizzo P, Murgia M, Pozzan T. в статье "Chimeric green fluorescent protein as a tool for visualizing subcellular organelles in living cells".


[Текст переведён с транслита]
Участник оффлайн! legion
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.03.2003 22:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

откопал я эту японскую статейку был немного не прав не зеленые были еритроциты волосы и что-то еще -мозги светились
Если есть желающе могу пульнуть данную статью

[Текст переведён с транслита]

[Текст переведён с транслита]
Участник оффлайн! Seva
Участник



 прочитанное сообщение 27.03.2003 01:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

Интересно, что структура гфп (не хромофор, конечно, а бочка) очень сходна с таковой порина внешней митохондриальной мембраны. Последнему для встраивания необходим холестерин. Что касается токсичности гфп-подобных белков, то раз на раз не приходится. То, что эти белки настолько широко используются, говорит о том, что чаще они все-же безвредны. Трансгенные мыши, опять же, не дохли от лизиса мозог или там эритроцитов. Хотя вполне возможно, что некоторые нежные культуры будут дохнуть от чужеродного белка, особенно при высокой эффективности трансфекции.
Участник оффлайн! Olegovitch
Постоянный участник
Cantabrigia, Anglia Oriens



 прочитанное сообщение 27.03.2003 02:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

Seva, "лизис мозог" не столь уж и смертелен - вспомните дипломную страдную пору... legion, я (вкупе с мировой наукой) буду очень признателен, если Вы-таки пульнете статью или ея PMID на og216@cam.ac.uk.

Не знаю, насколько нежными можно считать отцов русской демократии COS и HeLa, но до пятого дня с xFP под кондовым CMVшным промотором опосля душевной Fugenной трансфекции доживают немногие.
Участник оффлайн! Vadim Sharov
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 27.03.2003 13:10     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

Kondovyj CMV ochen' klasnyj promotor. U Vas ne menee 0,2 % novogo belka, a to i bol'she. Pri takoj ekspressii i actin toksichen budet smile.gif

Kstati pochemu takoj vybor COS i HeLa? Mozhet luchshe COS i CV1 (ili drugie martysh'i kletki). CV1 udobnee, oni, kazhis', imenno te kletki iz kotoryh COSy polucheny T bol'shim antigenom.
Teper' o stat'e. K sozhaleniyu u nas tol'ko s 1999 Curr. biol. Ne pul'nyote? No dazhe v abstracte ukazano lish' o localisacii v cytozole. No o ravmomernosti raspredeleniya nichego ne skazano. Drugoj vopros, a kak posmotret'? Chto ne metod, to artefaktov polno.
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 27.03.2003 18:20     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

Stratagene вовсю хвалится Renilla reniformis GFP (Vitality humanized Renilla GFP (hrGFP) и поливает грязьи Clontech-овские GFPs. Хотя не могу понять с чего бы это такой эффект.... - реклама:
"High-level green fluorescence is easy to detect
Low-toxic reporter does not interfere with expression of your gene
Stable expression allows hrGFP for use in generating stable cell lines"
.http://www.stratagene.com/displayProduct.asp?productId=239
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 27.03.2003 18:21     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

Stratagene вовсю хвалится Renilla reniformis GFP (Vitality humanized Renilla GFP (hrGFP) и поливает грязьи Clontech-овские GFPs. Хотя не могу понять с чего бы это такой эффект.... - реклама:
"High-level green fluorescence is easy to detect
Low-toxic reporter does not interfere with expression of your gene
Stable expression allows hrGFP for use in generating stable cell lines"
.http://www.stratagene.com/displayProduct.asp?productId=239
Участник оффлайн! guest123
Участник



 прочитанное сообщение 28.03.2003 15:21     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

Mozhet budet polezno?

Is Green Fluorescent Protein Toxic to the Living Cells?

Hsiao-Sheng Liu,1 Ming-Shiou Jan, Chao-Kai Chou, Ping-Hong Chen, and Nir-Jihn Ke

Biochemical and Biophysical Research Communications 260, 712–717 (1999)
Участник оффлайн! gonzic
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 28.03.2003 15:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

Уважаемые товарищи так глубоко копающиеся в токсичности этого белка, не могли бы Вы стать столь любезны и выслать мне на всякий случай,дабы пригодится эти статейки,пожалуйста.
gonzic4hotbox.ru
Участник оффлайн! Olegovitch
Постоянный участник
Cantabrigia, Anglia Oriens



 прочитанное сообщение 28.03.2003 18:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

2 legion по поводу мышей - картинки выглядят импозантно, а вот текст, sorry, не читается... Не вышлете ли PMID или название, plz?
Участник оффлайн! legion
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 28.03.2003 18:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

`Green mice' as a source of ubiquitous green cells
Masaru Okabe*, Masahito Ikawa, Katsuya Kominami, Tomoko Nakanishi,
Yoshitake Nishimune
FEBS 18458 FEBS Letters 407 (1997) 313-319
Участник оффлайн! Olegovitch
Постоянный участник
Cantabrigia, Anglia Oriens



 прочитанное сообщение 29.03.2003 06:31     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

Ok, thanxalot.
Участник оффлайн! galina
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 04.04.2003 01:10     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

to legion
Не могли бы Вы мне тоже прислать вышеназванную японскую статью (galinapo@vfil.ru). Я тоже сталкивалась с феноменом токсичности GFP, но подробно копать и разбираться как всегда не было времени да и особой необходимости. Но свербит.
Участник оффлайн! legion
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 04.04.2003 01:38     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

Статью то я отправил ноь мом не знаем такого адреса.Отправил вторично жемс...

[Текст переведён с транслита]
Участник оффлайн! legion
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 04.04.2003 01:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

еще раз вернулся маил......

[Текст переведён с транслита]
Участник оффлайн!




 прочитанное сообщение 04.04.2003 20:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

Я конечно очень извиняюсь: но либо я что-то не понял, либо одно из двух smile.gif .
Сама процедура транс-(цис smile.gif ), ин-(аут smile.gif )фекции есть повреждающее воздействие и потому изначально число трансфецированных и выжывших обратно пропорциональны.
А ГФП у меня экспресировались ну в очень больших количествах- клетки зеленели на глазах- и ничего.
Участник оффлайн! Olegovitch
Постоянный участник
Cantabrigia, Anglia Oriens



 прочитанное сообщение 05.04.2003 18:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

Милостивый государь,
все предельно просто - продолжительная экспрессия EGFP под сильным конститутивным промотором губит клетки. "Зеленеть на глазах" можно и при подтекании слабого индуцибельного промотора, и ничего.
Участник оффлайн! Sergeant
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 05.04.2003 19:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

Всем привет
Я открывал этот топик то был в состоянии небольшого аффекта и абстрактного недовольства. За это время ситуация немного изменилась и я успокоился. Я уже писал, что в общем то мне GFP пофигу. Удобный контроль и более ничего. За две недели те клетки, кто сильно эксрессировал GFP счастливо передохли. остальные выжили и средненько или слабенько светятся. Но светится 100% клеток. Стабильная экпрессия. Я их пересеял. И после этого они нормально светят. вообще то я уже давно разочаровался во всяких трансфекционных реагентах и транзиентной трансфекции. Зря только теряю время и деньги. Вирусы намного удобней. последнюю партию ретровирусов получил- пальчики оближешь. Аденовирусы тоже работали не плохо. сейчас нет времени, но к концу года хочу еще попробовать AAV (helper free) и лентивирусы.
И будет полный (относительно) боевой комплект.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  11.11.2022 12:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

Your credit can determine whether 123 gold you’re able to get loans and the rates you pay on them, as well as many other aspects of your financial life. A credit nigoal ฝาก 50 รับ 100 check may be part of getting a cell phone plan, apartment ทดลองเล่นสล๊อต or car insurance. To stay on top of your score, focus on the two biggest factors that influence it: payment history and credit utilization. Aim slotxo ฝาก 10 รับ 100 ทำยอด 200 ถอนได้เลย to pay everything on time, because just ทางเข้าเล่นpg wallet one missed payment can hurt your score, and use less than 30% of your joker888 เครดิต ฟรี ไม่ ต้อง ฝาก credit limits on each card and overall.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  12.11.2022 11:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

Have you ever wanted to go to sleep 123 gold early, only to find it impossible? Maybe you have to wake up a few hours earlier than usual on a particular nigoal ฝาก 50 รับ 100 day for an early conference call or perhaps you need to prepare for travel across time zones to limit jet lag. So you ทดลองเล่นสล๊อต want to compensate by going to bed a few hours slotxo ฝาก 10 รับ 100 ทำยอด 200 ถอนได้เลย earlier the night before in order to keep your total sleep time the same. If only it ทางเข้าเล่นpg wallet were this simple. It might be tempting to stock up on sleep medicines and joker888 เครดิต ฟรี ไม่ ต้อง ฝาก other sleep aids for a quick fix.
guest: 123vega
IP-штамп: frXqkB4MpP2jQ
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  12.11.2022 11:52     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

A long, beautiful stretch SUPERSLOT เครดิตฟรี of sand in Australia's สล็อต โร มา เว็บตรง tropical far north, Wangetti Beach, was Toyah ทดลองเล่นสล็อตโรม่า Cordingley's favourite beach. It is also where she died, in what ROMA SLOT has been called a "frenzied and brutal and sadistic" attack. SLOT JOKER The 24-year-old had gone to the SLOTXO beach to walk her dog on 21 October 2018, as she เครดิต ฟรี กด รับ เอง 50 บาท had done countless times before, but never came home. The PG SLOT ซื้อฟรีสปิน next morning her father found her "messed up" body half buried in sand dunes. Her JOKER ROMA เว็บตรง beloved dog was tied up nearby, unharmed. Four PG SLOT ทางเข้า years on, Australian authorities are appealing for the public's help in an international hunt to find the man they believe killed Toyah - Rajwinder Singh.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  14.11.2022 11:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

It is important to consume adequate Nigoal calories and protein to help maintain energy and muscle mass. The right amount of สล็อต calories and protein help your body 123GOAL fight infection, maintain muscle mass, and บาคาร่าคืออะไร help prevent skin breakdown. If you are underweight, the สูตรบาคาร่า goal for healthy weight gain is a slotxo gain of ½ to 2 pounds per week. This can usually be ทดลองเล่นสล๊อต accomplished by eating at nigoal least 250-500 more calories per แทงบอล day than you normally do. If your doctor or ลิงค์รับทรัพย์คืออะไร dietitian has told you that weight gain is appropriate for you.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  15.11.2022 12:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

Daily exercise helps you maintain a healthy Nigoal sleep schedule, but experts Trusted Source recommend สล็อต avoiding exercise late at 123GOAL night, if you want to sleep บาคาร่าคืออะไร well at night. That’s because your สูตรบาคาร่า body produces a lot of energy when slotxo you exercise, which can keep you ทดลองเล่นสล๊อต awake. If you’re trying to stay up all night, try 30 to 40 minutes nigoal of aerobic exercise. If you don’t want to exercise, try แทงบอล getting up and moving around. Pace back and forth ลิงค์รับทรัพย์คืออะไร for 10 minutes, take a walk outside, or do a few jumping jacks.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  16.11.2022 11:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

Getting a good night’s sleep may seem like an Nigoal impossible goal when you’re wide awake at 3 a.m., but you have สล็อต much more control over the 123GOAL quality of your sleep than you probably บาคาร่าคืออะไร realize. Unhealthy daytime habits and สูตรบาคาร่า lifestyle choices can leave you tossing and turning slotxo at night and adversely affect your mood, ทดลองเล่นสล๊อต brain and heart health, immune system, creativity, vitality, and nigoal weight. But by experimenting with the แทงบอล following tips, you can enjoy better sleep at night, boost ลิงค์รับทรัพย์คืออะไร your health, and improve how you think and feel during the day.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  17.11.2022 11:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #37 множественное цитирование

Eating spicy foods can Nigoal cause heartburn, which can impact สล็อต your sleep, And when you lie down, 123GOAL acid reflux often worsens. If you have sleep บาคาร่าคืออะไร apnea, your symptoms may worsen, too, if the สูตรบาคาร่า backed-up acid irritates slotxo your airway. What’s more, research ทดลองเล่นสล๊อต shows that consuming red pepper nigoal can increase your core body temperature, which is แทงบอล disruptive since core body ลิงค์รับทรัพย์คืออะไร temperature naturally drops during sleep.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  18.11.2022 11:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #38 множественное цитирование

Each dietary pattern impacts Nigoal different predictors of health. What was สล็อต notable about this study is it 123GOAL investigated a spectrum of plant-based บาคาร่าคืออะไร eating styles. It turns out, a strict vegan diet สูตรบาคาร่า produced the highest levels of healthy slotxo biomarkers and the lowest levels of ทดลองเล่นสล๊อต unhealthy markers. Vegetarians who nigoal include eggs, dairy and/or fish scored next best. The non-vegetarian แทงบอล group had the least favorable health ลิงค์รับทรัพย์คืออะไร markers in their blood, urine and tissue samples.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  19.11.2022 09:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #39 множественное цитирование

Big dinners make you temporarily Nigoal drowsy but prolong digestion, which สล็อต interferes with a good night's 123GOAL sleep. It's best to eat your biggest meal บาคาร่าคืออะไร before midafternoon and have a light สูตรบาคาร่า evening meal of 500 calories or less. Include slotxo some chicken, extra-lean meat ทดลองเล่นสล๊อต or fish at dinner to help curb middle-of-the-night nigoal snack attacks. Spicy foods can contribute to แทงบอล sleep problems: Dishes seasoned with garlic, chilies, cayenne, or other ลิงค์รับทรัพย์คืออะไร hot spices can cause nagging heartburn or indigestion. Avoid spicy foods at dinner.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  21.11.2022 06:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #40 множественное цитирование

If sunlight hurts your eyes and results in nigoal ฝาก 50 รับ 100 significant or frequent pain, you may have สล็อต เว็บตรงไม่ผ่านเอเย่นต์ไม่มีขั้นต่ำ photosensitivity or photophobia - extreme 123 sensitivity to light. This could be due to a medical บาคาร่า123 condition, dry eye or damage to your eyes, so you should สูตรบาคาร่าฟรี check with your eye doctor if you เว็บสล็อต pg เว็บตรง 123 feel pain in your eyes due to sunlight or bright light. People with jokerslot sensitive eyes, in general, can wear nigoal123 sunglasses to help lessen their ราคาบอล sensitivity when outdoors. Wind and sun can make eyes ลิงค์รับทรัพย์ feel more irritated and sensitive, but sunglasses can help in both cases.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  22.11.2022 11:21     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #41 множественное цитирование

Bloggers and writers will spend a nigoal ฝาก 50 รับ 100 large part of their day researching สล็อต เว็บตรงไม่ผ่านเอเย่นต์ไม่มีขั้นต่ำ before writing their content. This 123 could include looking at similar บาคาร่า123 content online, gathering statistics สูตรบาคาร่าฟรี or products to reference within เว็บสล็อต pg เว็บตรง 123 the post, or interviewing experts jokerslot for quotes. Depending on how nigoal123 involved the brand wants a creator ราคาบอล to be, the work may only involve writing the initial piece; for others, editing and ลิงค์รับทรัพย์ posting on the company’s blog or Medium account may also be part of the contract.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.11.2022 09:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #42 множественное цитирование

Once you have set goals for nigoal ฝาก 50 รับ 100 yourself, you need to figure out what things are สล็อต เว็บตรงไม่ผ่านเอเย่นต์ไม่มีขั้นต่ำ necessary to accomplish those goals. Be clear 123 about why you set this goal and how your life บาคาร่า123 will be different once this goal is achieved. You should สูตรบาคาร่าฟรี also consider the strengths and skills เว็บสล็อต pg เว็บตรง 123 that you possess that will jokerslot help you achieve your goal. Remember nigoal123 to stay focused on the goal and not on the ราคาบอล difficulties you might be having. Keep an open mind, and ลิงค์รับทรัพย์ know that you may hit barriers along the way.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  24.11.2022 09:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #43 множественное цитирование

The primary symptom of a weakened immune nigoal ฝาก 50 รับ 100 system is susceptibility to infection. A person with a weakened สล็อต เว็บตรงไม่ผ่านเอเย่นต์ไม่มีขั้นต่ำ immune system is likely to 123 get infections more frequently than most บาคาร่า123 other people, and these illnesses might be สูตรบาคาร่าฟรี more severe or harder to treat. These เว็บสล็อต pg เว็บตรง 123 individuals may also find themselves jokerslot dealing with an infection that a person nigoal123 with a stronger immune system would not get. People who ราคาบอล have a weak immune system can take several ลิงค์รับทรัพย์ steps to maximize their chances of staying healthy and avoiding infections.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.11.2022 06:04     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #44 множественное цитирование

Fat (including saturated and healthy fats) is needed nigoal ฝาก 50 รับ 100 for proper cell function, hormone สล็อต เว็บตรงไม่ผ่านเอเย่นต์ไม่มีขั้นต่ำ regulation, energy balance and the 123 transportation of certain vitamins. Fats บาคาร่า123 are the most energy dense food available. Different สูตรบาคาร่าฟรี types of fat saturated and unsaturated are processed เว็บสล็อต pg เว็บตรง 123 differently by your body. While both types of fat are part of a healthy diet, too jokerslot much saturated fat over a long period nigoal123 of time can negatively impact your heart health. Fed aims ราคาบอล to keep saturated fats ลิงค์รับทรัพย์ under 22g per day, which is around 10% of your total caloric intake.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.11.2022 10:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #45 множественное цитирование

Both diet and sleep are complex, which nigoal ฝาก 50 รับ 100 means there’s no silver bullet or single food สล็อต เว็บตรงไม่ผ่านเอเย่นต์ไม่มีขั้นต่ำ that is guaranteed to help with sleep. However, there are 123 some foods and drinks that may บาคาร่า123 make it easier to get a great night’s sleep. Dietary สูตรบาคาร่าฟรี choices affect more than just energy and เว็บสล็อต pg เว็บตรง 123 sleepiness; they can play a major role in things. For that jokerslot reason, it’s best to consult with a doctor or nigoal123 dietician before making significant changes to ราคาบอล your daily diet. Doing so helps ensure that your food choices support not just your ลิงค์รับทรัพย์ sleep but all of your other health priorities as well.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  28.11.2022 11:19     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #46 множественное цитирование

People often cut back on their sleep สล็อตเว็บตรงแตกง่ายไม่ล็อคยูส for work, for family demands, or even to ทางเข้าnigoal watch a good show on television. But if not getting 123 enough sleep is a regular part of your routine, you baccarat may be at an increased risk for สูตรบาคาร่า obesity, high blood pressure, เว็บตรงไม่ ล็อค ยู ส ไม่มี ขั้นต่ำ heart disease and stroke, poor mental health, and even PG early death. Even one night of short sleep QR Code can affect you the next day. Not หวย only are you more likely to feel sleepy, you’re more likely to be in a bad ลิงค์รับทรัพย์ mood, and be less productive at work.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  29.11.2022 12:24     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #47 множественное цитирование

The only way to prevent an allergic สล็อตเว็บตรงแตกง่ายไม่ล็อคยูส reaction is to avoid milk and milk proteins. This can be ทางเข้าnigoal difficult because milk is a common 123 ingredient in many foods. Also, some baccarat people with milk allergy can tolerate สูตรบาคาร่า milk in some forms, such as milk that's เว็บตรงไม่ ล็อค ยู ส ไม่มี ขั้นต่ำ heated in baked goods, or in some PG processed foods, such as yogurt. Talk to your health QR Code care provider about what to avoid. If you're having mild allergy หวย symptoms from eating something that ลิงค์รับทรัพย์ contains milk, taking an antihistamine medication may lessen your discomfort.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  30.11.2022 11:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #48 множественное цитирование

Attempting to boost the cells of your สล็อตเว็บตรงแตกง่ายไม่ล็อคยูส immune system is especially complicated ทางเข้าnigoal difficult because milk is a common 123 because there are so many baccarat different kinds of cells in the immune system that สูตรบาคาร่า respond to so many different microbes in so many ways. Which เว็บตรงไม่ ล็อค ยู ส ไม่มี ขั้นต่ำ cells should you boost, and to what number? So far, PG scientists do not know the answer. What is known is that the body is continually generating immune cells. Certainly, it produces QR Code many more lymphocytes than it can หวย possibly use. The extra cells remove ลิงค์รับทรัพย์ themselves through a natural process of cell death called apoptosis.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  01.12.2022 11:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #49 множественное цитирование

If your constant use of the snooze สล็อตเว็บตรงแตกง่ายไม่ล็อคยูส button and your morning zombie routine is getting old, there’s help. It begins ทางเข้าnigoal with figuring out the different reasons 123 why you can’t wake up in the morning and what to do baccarat about them. Chances are you’re not getting สูตรบาคาร่า enough sleep and need to tweak your เว็บตรงไม่ ล็อค ยู ส ไม่มี ขั้นต่ำ bedtime routine. If a sleep disorder or other PG underlying condition is to blame for your morning QR Code sleepiness, there are treatments หวย available. Going to bed and waking up at the same time every day is a must if you ลิงค์รับทรัพย์ want to get on a good sleep schedule and train yourself to wake up early.
Участник оффлайн! 123goal 123goal
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  02.12.2022 07:28     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #50 множественное цитирование

Caffeine is a stimulant - after all, that’s สล็อตเว็บตรงแตกง่ายไม่ล็อคยูส exactly why we drink it! But drinking coffee and other ทางเข้าnigoal caffeinated drinks later in the day could be 123 causing you to take longer to fall baccarat asleep on an evening. Where possible, try to สูตรบาคาร่า avoid caffeine in the afternoon, and เว็บตรงไม่ ล็อค ยู ส ไม่มี ขั้นต่ำ especially in the evening; use it as your wake PG up aid in the morning. If you’re stuck in the QR Code habit of having a hot drink in the หวย afternoon. If you are reliant on coffee to keep you going through the day then it’s probably a good idea to cut down ลิงค์รับทรัพย์ your intake so that you’re not relying on it to keep you awake.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 21:48
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft