Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
watchesbiz | Отправлен 26.12.2021 18:36 |
guest: ммм | Отправлен 13.10.2009 14:45 |
--не осаждаются ли они Должны. --не изменяют ли своих свойств? Строго говоря они их изменяют уже тогда, когда вы извлекли их из кровотока. Но если подходить к этому вопросу грубо. Не должны! |
|
guest: Алиса | Отправлен 13.10.2009 12:05 |
Здравствуйте! У меня вопрос не профессионала, а человека всего лишь интересующегося. При высаливании сульфатом аммония различных фракций белков из плазмы крови что происходит с липопротеинами, не осаждаются ли они, не изменяют ли своих свойств?!! В справочниках по биохимии ничего по этому поводу не нашла! Заранее спасибо большое! |
|
Гость | Отправлен 26.03.2009 21:24 |
*поправочка: "то что не будет 100% очистки от них(НК) ПРИ ОСАЖДЕНИИ БЕЛКОВ КЛЕТОЧНОГО ЛИЗАТА - показано" *очевидный |
|
Гость | Отправлен 12.03.2009 21:19 |
=) Уважаемый критик, прочтите внимательно предпоследний пост:"в осадок попадает низкомолекулярные НК ...,Выпадают они сами по себе или по той причине что сами связыны с выпадающими белками-не проверялось". "В осадок"-имеется ввиду осадок, обазующийся в клеточном лизате при добавлении к нему сульфата аммония. Ясное дело что НК сульфатом из водного раствора не высадятся =), но вот то что не будет 100% очистки от них - показано. Рад что факт соосаждения для вас-очевидная и общеизвестный процесс. |
|
Guest | Отправлен 26.02.2009 09:24 |
Что-то вас занесло. Возьмите любую ДНК, которую вам не жалко и попытайтесь ее высолить любой концентрацией сульфата. Увы, осадок не образуется. Поэтому ваше "выяснилось" это просто некорректно поставленный эксперимент. Соосаждение нуклеиновых кислот с белками при сульфат-аммонийном фракционировании - это рядовое хорошо известное явление. Клеточный лизат или разрушеная ткань или еще какой-либо первичный биологический источник нужного вам белка (фермента) фракционируют сульфатом аммония, но при этом все понимают, что на начальном этапе ВСЕГДА происходит соосаждение НК, точнее соосаждаются фрагменты нуклеиновых кислот весьма гетерогенные по мольвесу и составу. При дальнейшей очистке от НК отделяются. Так что не путайте, пожалуйста, разные понятия. Высальвание белков сульфатом и соосаждение нуклеиновых кислот белковыми сульфат-аммонийными осадками - это разные процессы. |
|
Гость | Отправлен 25.02.2009 21:18 |
А вот как выяснилось да же без добавления спирта или участия сильноразвитой поверхности в осадок попадает низкомолекулярные НК уже при 70% от точки насыщения. Выпадают они сами по себе или по той причине что сами связыны с выпадающими белками-не проверялось, но теоритически в такой высокой ионной силе ионные взаимодействия неосуществимы, и если это действительно падение НК из-за связи с белком, то эти НК связаны с белками водородными связями. Короче так или иначе-падают НК при добавлении сульфата. | |
Ъ | Отправлен 29.10.2008 11:30 |
(guest: ммм @ 25.10.2008 23:20) Нуклеиновые кислоты сильно гидрофильнее белка. Чтобы они выпали сами собой нужно либо добавить спирт. ... либо цетавлон... |
|
Guest | Отправлен 29.10.2008 10:19 |
Высаливание биополимеров ингода преподносит удивительные сюрпризы. Лет 20 назад был опубликован и запатентован весьма оригинальный способ выделения ДНК из молок лососевых раб с помощью высаливания. Суть очень проста. Гомогенат молок обрабатывается сульфатом аммония до 0,9 насыщения по сульфату и полученный весьма мутный раствор разбавляется водой в 10 раз. Выпадает в осадок (точнее всплывает) ДНП - комплекс ДНК-протамин, который легко отделяется от всего остального фильтрованием или центрифугированием. Затем ДНП растворяют в 2 М NaCl и теперь уже чистую ДНК отфильтровывают от денатурированного белка и высаживают спиртом. Фактически идет "игра" на разной растворимости ДНК, белков и комплекса ДНК-протамин (ДНП) в растворах солей разной концентрации. На Хабаровском химфармзаводе даже было изготовлено несколько партий ДНК по этой технологии. | |
Яна | Отправлен 28.10.2008 22:44 |
(Ъ @ 19.08.2007 12:47) Я так понимаю, что уже поздно что либо писать, но я Яна и реально существую на сайте уже давно, поэтому папрашу осторожнее с никами только на сайт захожу очень редко поэтому только сейчас прочитала про "инсинуации" в мой адрес. А за тему спасибо, несколько полезных идей для себя подчерпнула. |
|
Посмотреть тему (откроется в новом окне) | |