Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Veshka Постоянный участник Москва |
Есть свежий позитивный опыт? |
Nik-AD Постоянный участник |
|
Veshka Постоянный участник Москва |
(Nik-AD @ 15.02.2017 14:58) Так мне на вопрос об олигах дали...мэйл Кузубова и сказали "а спросите у него, БУДУТ делать или нет" Это пипец, извините.... |
Guest IP-штамп: fryeFLOjWSNnc гость |
Пока нам такое сделали только в Lumiprobe. К сожалению, пока не могу точно сказать насколько адекватно они нам сделали зонды - до сих пор разбираемся с результатами. |
austinov Москва |
(Guest @ 16.02.2017 18:35) Мы тоже очень ищем такое место. Причем нам обязательно нужно чтобы было несколько (4-5) флуоресцентных меток на один олиг. Пока нам такое сделали только в Lumiprobe. К сожалению, пока не могу точно сказать насколько адекватно они нам сделали зонды - до сих пор разбираемся с результатами. Спасибо, обращайтесь к нам, считайте онлайн Если что-то не работает, пишите - мы отвечаем за качество и будем разбираться, в чем проблема. Несколько флуоресцентных красителей это не всегда более высокий уровень сигнала, часто возможны разные неожиданности. С уважением, Алексей Устинов Lumiprobe / ООО "Биотех-Индустрия" |
Guest IP-штамп: frJnUpZA9X..w гость |
(LMP @ 16.02.2017 18:20) Нет, у нас в Синтоле standing order. Написал Кузубову, кто-то из сотрудников ответил, попросил прислать последовательности, дальше опять лаг. Посмотрим, но в принципе такой подход вызывает, по меньшей мере, вопросы. При том, что раньше они вс делали, и делали хорошо. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Guest @ 16.02.2017 18:35) На фига зонду такое ожерелье, пардон за офтоп. А в ДНК синтез обращались? |
genseq Постоянный участник |
(Veshka @ 15.02.2017 11:42) Коллеги, кто где заказывает? Синтол в глухой несознанке по этому поводу, попробовал в одном месте (пока не буду называть, может случайность) - сделали абсолютное УГ и в низкой концентрации... Есть свежий позитивный опыт? Есть старый опыт. При попытке включить в один олиг пару флуорофоров получилось абсолютное УГ и в низкой концентрации. Это если концентрацию оценивать "строго на глаз", по окраске. Похоже, идёт не только тушение флуоресценции, но и снижение поглощения света. Причём последние явно противоречит общепринятым теоретическим представлениям. Так что если засунуть в один олиг пять флуорофоров, то кроме УГ низкой концентрации ничего получить не удастся. P.S.: кстати. А что такое "УГ"? |
NMR-guy Постоянный участник временной жизни |
Товарищи хотят приблизиться по чуйствительности к радиометкамЪ. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(NMR-guy @ 20.02.2017 19:46) Включается взвешенный биновый спектральный фильтр на ожерелье и фон уходит на 4-5 измерительных декад сигнала в ноль... Переведи. |
NMR-guy Постоянный участник временной жизни |
|
ship Постоянный участник Moscow |
Общение с Синтолом - это чтото с чем-то, начиная от хамоватой тетки отвечающей на звонки, и кучи другх ньансов. Иногда чуть ли не 2 недели ждади заказ, иногда курьеры теряли олиги в других институтах, мрак вообщем. Они обыкновенные олиги то с ошибками варят, и у меня у коллег были случаи. Предолату выбрали у них - и досвиданья. У Карпова за 10 лет ни одной ошибки не было. |
Sky7walker Участник |
(NMR-guy @ 20.02.2017 22:52) Это действительно так. Хотим сделать очень чувствительный РНК-фиш. По протоколу полагается около 10 зондов - каждый из которых с 4-5 флуорофорами. Пока мы не преуспели. Будем рады советам (извините за оффтоп в этой теме). |
MMM Постоянный участник |
Насколько мне известно вся флуоресцентная метка в олигах это пост продакшн. А единственный способ это сделать с множественным введением флуоресцентной метки-это введение мелкой устойчивой модификации в синтетический олиг, которую потом пост продакшн можно пометить флуоресцентным красителем. |
Nik-AD Постоянный участник |
В апреле (когда деньги появятся) будем пробовать заказывать. Нам нужно пару хороших RNA beacon сотворить. |
sceptique Постоянный участник временной жизни |
(ship @ 22.02.2017 13:05) Это очень для них немного. За последний год они сильно сдали... Вероятно, синтез олигов на заказ перестал приносить прибыль и они им грузят только то время на синтезаторе, которое остаётся свободным от более дорогих заказов "под ключ" внутри своей фирмы. В последнее время все предпочитают продавать не олиги, а наборы с ними, или готовые смеси. Поскольку имеющемуся безрукому контингенту потребителей с деньгами они удобнее, чтобы продавать свои "услуги" и "разработки". |
semi Постоянный участник Москва |
(Sky7walker @ 22.02.2017 15:17) Это действительно так. Хотим сделать очень чувствительный РНК-фиш. По протоколу полагается около 10 зондов - каждый из которых с 4-5 флуорофорами. Пока мы не преуспели. Будем рады советам (извините за оффтоп в этой теме). Возможно, уже поздно, но всё же.. Делали РНК-FISH с пробами Stellaris (48 олигов, помеченных одной молекулой флуорохрома каждый). Пробы, которые были фирменного дизайна, работали очень хорошо и стабильно. Пробы на наши мишени, сдизайненные при помощи их онлайн-программы, не сработали. Однако на сайте было предупреждение, что обычно нужно несколько подходов прежде, чем найдёшь рабочий вариант. У нас, к сожалению, денег на дополнительные попытки не было. Думаю, если везти в кармане из-за бугра готовые пробы, будет намного дешевле, чем заказывать что-либо подобное здесь. Сообщение было отредактировано semi - 28.06.2017 16:49 |
merry89 |
|
Ufa1688 Постоянный участник |
|
guest: 123vega IP-штамп: frXqkB4MpP2jQ гость |
|
« Предыдущая тема · Организация работы группы/лаборатории · Следующая тема » |