Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
jelenarus |
Зачем добавляют x gal и iptg? В каких случаях их нужно добавлять? Вместе или по отдельности? |
MMM Постоянный участник |
IPTG индуцирует экспрессию с промотора лак-оперона X-GAL- субстрат бета-галактозидазы |
guest: Jelenarus IP-штамп: frs39hbIEnofo гость |
(MMM @ 15.03.2018 11:58) Маниатиса почитайте: IPTG индуцирует экспрессию с промотора лак-оперона X-GAL- субстрат бета-галактозидазы В том то и дело, что википедию я почитала, не совсем поняла, я совсем-совсем новичок)) Я просила, чтобы имннно описали для чего и где используются. В каких случаях добавляем их и в каких нет |
MMM Постоянный участник |
|
Tom1 Постоянный участник |
буть добрее и люди к тебе потянутся.... ))))) |
genseq Постоянный участник |
В общем, лучше руководствоваться Маниатисом. И не мудрить. |
ksm Постоянный участник |
(genseq @ 16.03.2018 20:13) В молодости хотел использовать вместо IPTG обычную лактозу. Естественно, на штаммах, синтезирующих пермеазу лактозы. Но даже поверхностное изучение литературы показало, что лактоза не является индуктором. С репрессором связывается не сама лактоза, а её изомер (аллолактоза), являющийся побочным (промежуточным) продуктом расщепления лактозы бета-галактозидазой. Т.е. без бета-галактозидазы индукция лактозой невозможна. В общем, лучше руководствоваться Маниатисом. И не мудрить. Генсек, клянусь, если добавить в среду лактозы, то гены под лак-промотором усиливают экспрессию! |
genseq Постоянный участник |
(ksm @ 17.03.2018 00:34) На практике могут и усиливать. Но нет уверенности, что всегда. А если уверенности нет, то лучше с этим вариантом не связываться. А если и связываться, то всерьёз. Т.е. нужно, как минимум, иметь дипломника. Или магистранта. И делать колийную систему экспрессии с коммерческой перспективой. Но в России такой перспективы нет, поэтому лучше не связываться. |
ksm Постоянный участник |
|
dk Постоянный участник Россия |
|
Horse-radish Участник |
(genseq @ 16.03.2018 17:13) В молодости хотел использовать вместо IPTG обычную лактозу. Естественно, на штаммах, синтезирующих пермеазу лактозы. Но даже поверхностное изучение литературы показало, что лактоза не является индуктором. С репрессором связывается не сама лактоза, а её изомер (аллолактоза), являющийся побочным (промежуточным) продуктом расщепления лактозы бета-галактозидазой. Т.е. без бета-галактозидазы индукция лактозой невозможна. В общем, лучше руководствоваться Маниатисом. И не мудрить. С(Ш)тудиеровская среда с автоиндукцией на лактозе вполне отлично работает. Очень удобный вариант при препаративном выделении.
|
R-J-Dio Постоянный участник |
(genseq @ 16.03.2018 20:13) В молодости хотел использовать вместо IPTG обычную лактозу. Естественно, на штаммах, синтезирующих пермеазу лактозы. Но даже поверхностное изучение литературы показало, что лактоза не является индуктором. С репрессором связывается не сама лактоза, а её изомер (аллолактоза), являющийся побочным (промежуточным) продуктом расщепления лактозы бета-галактозидазой. Т.е. без бета-галактозидазы индукция лактозой невозможна. В общем, лучше руководствоваться Маниатисом. И не мудрить. вона как, молодость... давно беда началась, еще до историческага материализма. ну, а щас.. щас все плохо совсем, да... Сообщение было отредактировано R-J-Dio - 23.03.2018 04:44 |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |