Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
guest: Василий IP-штамп: frxGOYQklo76Y гость |
Есть препарат суммарных нуклеиновых кислот, есть ли способы существенно обогатить его по содержанию РНК для проведения обратной транскрипции? Обогатить ДНК проще, насколько я понимаю. |
AlexRez Постоянный участник Екатеринбург |
|
Агроном Постоянный участник |
|
genseq Постоянный участник |
Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction / Anal. Biochem. - 1987. – Vol.162. – P.156-159. Пока ничего лучше не придумали. |
ship Постоянный участник Moscow |
|
abdula Постоянный участник |
(guest: Василий @ 26.02.2013 12:05) Здравствуйте все! Есть препарат суммарных нуклеиновых кислот, есть ли способы существенно обогатить его по содержанию РНК для проведения обратной транскрипции? Обогатить ДНК проще, насколько я понимаю. рибо-зеро |
abdula Постоянный участник |
|
Guest IP-штамп: frQCpGSFifrEU гость |
|
abdula Постоянный участник |
(guest: Василий @ 26.02.2013 12:05) Здравствуйте все! Есть препарат суммарных нуклеиновых кислот, есть ли способы существенно обогатить его по содержанию РНК для проведения обратной транскрипции? Обогатить ДНК проще, насколько я понимаю. ну днказой , а потом рибозеро - если рнк-сек |
Ash Участник |
Спасибо за советы. Ситуация такая - нуклеиновые кислоты уже выделены, поэтому вопрос - если эту смесь еще раз выделять приняться по тому же Хочинскому - РНК не поплохеет от кучи дополнительных манипуляций? Да и получится ли освободиться от уже выделенной ранее ДНК? ДНКазой был бы идеальный вариант. но где ее взять РНКаза-фри? ...Поиграться можно, конечно, объем позволяет, но вопрос именно про возможность достаточно простыми манипуляциями снизить концентрацию ДНК, и увеличить - РНК. Сообщение было отредактировано Ash - 27.02.2013 07:32 |
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
В магазине. |
Агроном Постоянный участник |
РНК для проведения обратной транскрипции а ОТ чего собираетесь делать, если не секрет? |
vtosha Постоянный участник |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
А протоколов (и китов) на эту тему - тьма! Как правило, с использованием ДНК-азы РНКаз-фри... Но классика рулит, ессно, в очумелых ручках. |
Guest IP-штамп: frxGOYQklo76Y гость |
(Агроном @ 27.02.2013 08:34) Фрагменты геномов РНК-содержащих вирусов растений. |
Guest IP-штамп: frxGOYQklo76Y гость |
(-Ъ- @ 27.02.2013 10:01) Васе надо всего лишь научиться выделять РНК, свободную от ДНК. А протоколов (и китов) на эту тему - тьма! Как правило, с использованием ДНК-азы РНКаз-фри... Но классика рулит, ессно, в очумелых ручках. Ну, собственно, что касается моего опыта, по Хомчинскому выделение получается прекрасно. РНК потом хранилась натурально годами. Но здесь обратились с советом коллеги, их аспиранту Василию перепала коллекция уже выделенных препаратов ДНК/РНК, и, собственно. вопрос в том, можно ли что-то сделать уже с имеющимся? А так, да, для выделения РНК китов и методов полно, на любой вкус... |
Ash Участник |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Guest @ 27.02.2013 11:07) Ну, собственно, что касается моего опыта, по Хомчинскому выделение получается прекрасно. РНК потом хранилась натурально годами. Но здесь обратились с советом коллеги, их аспиранту Василию перепала коллекция уже выделенных препаратов ДНК/РНК, и, собственно. вопрос в том, можно ли что-то сделать уже с имеющимся? А так, да, для выделения РНК китов и методов полно, на любой вкус... vtosha предлагает самый оптимальный вариант. Там используется обработка ДНК-азой прямо на мембране. Так кажется, сам никогда этими китами не пользовался. |
abdula Постоянный участник |
(Ash @ 27.02.2013 08:29) Добрый день! Спасибо за советы. Ситуация такая - нуклеиновые кислоты уже выделены, поэтому вопрос - если эту смесь еще раз выделять приняться по тому же Хочинскому - РНК не поплохеет от кучи дополнительных манипуляций? Да и получится ли освободиться от уже выделенной ранее ДНК? ДНКазой был бы идеальный вариант. но где ее взять РНКаза-фри? ...Поиграться можно, конечно, объем позволяет, но вопрос именно про возможность достаточно простыми манипуляциями снизить концентрацию ДНК, и увеличить - РНК. а агилентовском биоаналайзере гоните свою рнка и смотрите рин - ну и увидете поплохело рнка или непоплохело |
abdula Постоянный участник |
|
abdula Постоянный участник |
(guest: Василий @ 26.02.2013 12:05) Здравствуйте все! Есть препарат суммарных нуклеиновых кислот, есть ли способы существенно обогатить его по содержанию РНК для проведения обратной транскрипции? Обогатить ДНК проще, насколько я понимаю. |
nigoal123 IP-штамп: fr/1ZkUsuBQOE гость |
it sets the tone for |
guest: 123 IP-штамп: frJhOCvSv9ICE гость |
|
123goal 123goal Постоянный участник |
|
123goal 123goal Постоянный участник |
|
Ufa1688 Постоянный участник |
|
Ufa1688 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |