Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Сложные буфера -- comments to a permanent page of the site --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Тема связана с: Многокомпонентные растворы
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
ИФНС
IP-штамп: frlnAsDr.5x7A
гость



 прочитанное сообщение 10.10.2008 14:27     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #51 множественное цитирование

Ребята, откликнитесь! Подскажите хороший лизирующий буфер БЕЗ сохранения целостности клеток! RIPA не тянет!!!!!! Если есть что-то скиньте на FIS82@rambler.ru Заранее благодарна
Ольга_i-v-a
IP-штамп: frRAbmeRhS4Qw
гость



 прочитанное сообщение 08.04.2009 20:09     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #52 множественное цитирование

Помогите пож-та... нужен фосфатный буфер с pH 7,5 и ионной силой 0,05!!! как его получить?? Заранее спасибо!
Yuri K
IP-штамп: frbSxBL61s/9I
гость



 прочитанное сообщение 08.04.2009 23:24     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #53 множественное цитирование

(Ольга_i-v-a @ 08.04.2009 21:09)
Ссылка на исходное сообщение  Помогите пож-та...  нужен фосфатный буфер с pH 7,5 и ионной силой 0,05!!! как его получить?? Заранее спасибо!

Tough call ;-)

pH 7.5 roughly equals the 2nd pKa of the phosphoric acid (7.2). So at pH 7.5 you will have approx. equal concentrations of HPO4(2-) and H2PO4(-). Let us call this concentration X. You will also have potassium concentration that equals 2X+X=3X total. Thus, your ionic strenght equals 3X+X+X^2. Solving the equation

X^2+4X=0.05

we find that X=~0.125. So to make 1 L of buffer you have to take 0.125 mole of KH2PO4 and 0.125 mole of of K2HPO4 and adjust the pH to 7.5 with acid or alkali.
Guest
IP-штамп: frKEKi7a2OV4A
гость



 прочитанное сообщение 07.10.2010 10:06     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #54 множественное цитирование

Скажите пожалуйста, а при приготовлении ТАЕ 50х можно и спользовать ЭДТА 0,5 М рН 8.0 вместо ЭДТА в виде соли? Спасибо заранее!
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 07.10.2010 10:37     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #55 множественное цитирование

В ЭФ буферах ЭДТА только в виде свободной кислоты.

Сообщение было отредактировано -Ъ- - 07.10.2010 10:40
Guest
IP-штамп: frKEKi7a2OV4A
гость



 прочитанное сообщение 07.10.2010 16:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #56 множественное цитирование

Спасибо за ответ. Можно ещё вопросик?
То есть присутствие ионов натрия категорически запрещается? Это каким-то негативным образом сказывается на форезе?
Просто я буфер готовила с добавлением двунатриевой соли ЭДТА и ничего вроде, а тут на форуме в прописях увидела, что ЭДТА надо добавлять не из стока и задумалась правильно ли я его готовлю... confused.gif
Yuri K
IP-штамп: frLI8F3pAObfM
гость



 прочитанное сообщение 07.10.2010 17:08     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #57 множественное цитирование

(-Ъ- @ 07.10.2010 10:37)
Ссылка на исходное сообщение  В ЭФ буферах ЭДТА только в виде свободной кислоты.

Впервые слышу, коллега. Там натрия настолько мало, что едва ли он на чем-то скажется. Народ обычно берет готовый ЭДТА раствор из сигмовской банки 0.5 М динатриевая соль, и не берет в голову.
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 07.10.2010 18:37     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #58 множественное цитирование

Такой общий ответ. smile.gif
Криминала, конечно, никакого если используется р-р ЭДТА 0,5 М с рН 8.0.,, но лучше исключить (минимизировать) ионы сильных кислот и оснований из ЭФ буфера.
К тому же оказалось очень удобно смешивать сухие компоненты буферов (особенно в случае ТБЕ) и при этом я заменил динатриевую соль на свободную кислоту и тем самым снизил рН и ионную силу (проводимость) буфера.
Guest
IP-штамп: frKEKi7a2OV4A
гость



 прочитанное сообщение 08.10.2010 09:44     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #59 множественное цитирование

Спасибо за ответ! smile.gif
Участник оффлайн! Solar7




 прочитанное сообщение 27.10.2010 16:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #60 множественное цитирование

Доброго дня участникам и корифеям! У меня вопрос как раз в тему - нужен органический буфер с низкой проводимостью. Сейчас проверяю натрия салицитат, но хотелось бы избавиться от ионов натрия... чем бы Вы предложили "запаровать" салициловую кислоту, чтобы сделать буфер рН 8.5-9.0, не слишком дорогое и дефицитное? Как вариант, трис? Спасибо!
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 27.10.2010 17:20     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #61 множественное цитирование

(Solar7 @ 27.10.2010 17:51)
Ссылка на исходное сообщение  Доброго дня участникам и корифеям! У меня вопрос как раз в тему - нужен органический буфер с низкой проводимостью. Сейчас проверяю натрия салицитат, но хотелось бы избавиться от ионов натрия... чем бы Вы предложили "запаровать" салициловую кислоту, чтобы сделать буфер рН 8.5-9.0, не слишком дорогое и дефицитное? Как вариант, трис? Спасибо!

Если Трис не противопоказан, готовите Трис ОН 2М (!!!), это близкий к насыщенному раствор, также готовите максимально концентрированный раствор салициловой кислоты (для удобства тоже 2 М). Смешивая разные объемы эквимолярных растворов готовите 1М раствор Трис-салициловой кислоты нужного рН.
Я так готовлю 1М Трис-глициновый, то бишь Трицин, буфер с рН 8,5.
Участник оффлайн! Daemonarchestratygos
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 27.10.2010 21:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #62 множественное цитирование

Ах, буфера... rolleyes.gif
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 27.10.2010 23:28     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #63 множественное цитирование

(Daemonarchestratygos @ 27.10.2010 22:49)
Ссылка на исходное сообщение  Ах, буфера...  rolleyes.gif

Манияк... smile.gif wink.gif
Участник оффлайн! k204781




 прочитанное сообщение 19.11.2010 00:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #64 множественное цитирование

Подскажите, пожалуйста, как правильно приготовить 0,1 М натрий-фосфатный буфер (рН=8,0, V=500 мл). Столько прописей нашлось, что в голове полная каша! Буфер необходим для биотинилирования белка. И еще вопрос, натрий-фосфатный буфер и PBS одно и тоже?
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 19.11.2010 10:54     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #65 множественное цитирование

(k204781 @ 19.11.2010 01:08)
Ссылка на исходное сообщение  Подскажите, пожалуйста, как правильно приготовить 0,1 М натрий-фосфатный буфер (рН=8,0, V=500 мл). Столько прописей нашлось, что в голове полная каша! Буфер необходим для биотинилирования белка. И еще вопрос, натрий-фосфатный буфер и PBS одно и тоже?

1. А давайте ваши прописи, лучше одну, обсудим...
2. PBS - это физраствор в фосфатном буфере.
Протокол приготовления:
Р-рить 8 г NaCI, 0,2 г КС1, 1,44 г Na2PO4 и
0,24 г KH2PO4 в 800-900 мл воды, довести
рН до 7,4 НС1. Довести до 1л водой.
Надо ли пересчитывать для 0,5 л? wink.gif
Участник оффлайн! aszx1237




 прочитанное сообщение 28.11.2010 14:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #66 множественное цитирование

Подскажите, пожалуйста, где можно найти в интернете методики по приготовлению буферов, в частности уксусно-аланинового, глицин-NaOH, фосфат-фосфатного.

Заранее благодарен.
Участник оффлайн! aszx1237




 прочитанное сообщение 28.11.2010 14:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #67 множественное цитирование

Или может есть пособие какое-нибудь по буферам
guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость



 прочитанное сообщение 28.11.2010 21:46     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #68 множественное цитирование

--Или может есть пособие какое-нибудь по буферам
Справочник биохимика доусона почитайте главу про буферные растворы там вначале теория дается, а потом практика. Для начала вам хватит. А так возьмите хороший учебник по аналитической химии там много про буферные системы написано.
Участник оффлайн! mora733




 прочитанное сообщение 05.04.2012 01:35     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #69 множественное цитирование

Извините за такой дилетантский вопрос:

Можно ли заменить фосфатный буфер Соренсена(0,1 М) с рН 7,2 обычным PBS c таким же рН.Нужен для С-бэндинга хромосом.
guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость



 прочитанное сообщение 05.04.2012 07:13     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #70 множественное цитирование

Если вы напишите состав обоих буферов рядом в столбик, то сами получите ответ.

По идее можно

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): mora733
Участник оффлайн! Вячеслав Б




 прочитанное сообщение 23.05.2013 14:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #71 множественное цитирование

Коллеги, ЕЩЕ раз подниму вопрос!
В прописи ТБЕ буфера действительно ошибка, не может там быть 43,84 г!

И, написано, ЭДТА рН 8, а коллега-Ъ- говорит, что натрий ни к чему.

Кто прав? А то я как идиот делал из ЭДТА фри асид соль, добавляя NaOH.
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 23.05.2013 16:29     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #72 множественное цитирование

1) Вероятно авторы имели ввиду вес не сухого Трилона Б, а необходимый вес 0.5М раствора ЭДТА рН-8.0.

2)можете делать из кислоты, но тогда триса больше сыпать придется или боркиса меньше. Но на самом деле 2-5мМ натрия это такие малозначительные крохи, что можно и не забивать себе голову. А 0.5М ЭДТА рН-8 вещь вообще полезная в хозяйстве.
Участник оффлайн! inessaviv




 прочитанное сообщение 25.06.2013 19:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #73 множественное цитирование

Люди,подскажите пожалуйста,где купить трис!В инете не нашла мелкие фасовки,только по 500гр и цена в евро.
Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать?Благодарю заранее.Биохимик начинающий,поэтому туговато jump.gif
inessaviv@gmail.com
Участник оффлайн! R.J. Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 25.06.2013 21:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #74 множественное цитирование

1) Хеликон
2) молярность по Трису, в чем проблема? Биохимик -то начинающий, а студент-то конченый? Вас не учили? Аналитики не было? Тогда зачем Вам трис, разводите марганцовку в воде, красиво и познавательно

Сообщение было отредактировано R.J. Dio - 25.06.2013 21:28
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 26.06.2013 15:57     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #75 множественное цитирование

--Люди,подскажите пожалуйста,где купить трис!
http://www.vekton.ru/e_sale/?gd=685
Только ч. покупать не рекомендую(хотя для экстрагирующих буферов и он подойдет)
Покупайте осч или имп. последний уточните откуда и какой марки.

--Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать?
Пересчитывать надо на молярность триса-основания(мол вес 121)
Участник оффлайн! ASabina




 прочитанное сообщение 17.09.2013 09:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #76 множественное цитирование

подскажите пожалуйста! надо приготовиться ПБС рН=7,2, но при этом к нему необходимо добавить 2,25% глицина. возможно ли это сделать и как (на каком этапе). при добавлении глицина рН очень резко падает до 5,9 и повысить ее никак не почается (5Н НаОХ)
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 17.09.2013 10:15     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #77 множественное цитирование

(ASabina @ 17.09.2013 10:39)
Ссылка на исходное сообщение  подскажите пожалуйста! надо приготовиться ПБС рН=7,2, но при этом к нему необходимо добавить 2,25% глицина. возможно ли это сделать и как (на каком этапе). при добавлении глицина рН очень резко падает до 5,9 и повысить ее никак не почается (5Н НаОХ)

НСI исключите из протокола.
А что за ругательская абр-тура, (5Н НаОХ)? confused.gif

Сообщение было отредактировано -Ъ- - 17.09.2013 10:27
Участник оффлайн! R.J. Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.09.2013 10:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #78 множественное цитирование

а какой финальный рН должен быть. может, 5.2 как раз что надо?
Участник оффлайн! LMP
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 18.09.2013 11:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #79 множественное цитирование

(-Ъ- @ 17.09.2013 08:15)
Ссылка на исходное сообщение  НСI исключите из протокола.
А что за ругательская абр-тура, (5Н НаОХ)? confused.gif


подозреваю, что это пяти- нормальная щелочь))
Участник оффлайн! kirush




 прочитанное сообщение 01.10.2013 06:10     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #80 множественное цитирование

Нужно приготовить боратный раствор 200мМ борат натрия, 60мМ НаЦл, 1 мМ ЭДТА
как для этого растворить буру?
guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость



 прочитанное сообщение 01.10.2013 09:15     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #81 множественное цитирование

Так 200мм борат или тетра борат. В оде растворять, в воде
Участник оффлайн! kirush




 прочитанное сообщение 01.10.2013 11:17     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #82 множественное цитирование

Тетраборат (бура) в воде плавает в виде взвеси и не растворяется. Попробывал в кипятке растворить при охлаждении выпали кристаллы
Участник оффлайн! R.J.Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 01.10.2013 12:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #83 множественное цитирование

это не страшно, дайте отстояться и пользуйтесь. Все равно потом все на стенках выпадет, на скорость не влияет

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 20.02.19 13:34
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft