мда, как все запущено...такая наука, Россия  21 век

  
В какой концентрации делать каждый белок?

 
Какую концентрацию белков выдерживать в общем миксе"?

 
Как быть с белками, которые плохо или вообще не растворимы в Sample Buffer и/или 2х Treatment buffer? И можно ли так вообще сделать маркер?

  
2700 р - дешевле чем 2-е-3 бутылки вина например, прямо за наличные продают в офисе чем париться со старьем

  Можете закидывать и меня тухлыми яйцами, но мне было просто интересно сделать престейнд маркер самому. Было много сухих реаналовских и сервавских белков - фосфорилаза b, трансферрин, БСА, овальбумин, трипсиноген, рибонуклеаза, апротинин. Хранились черти как то в холодной комнате, то в ней же, но без холода. Купил реактивные ремазоловые красители (синий и красный, стоят копейки), в щелочной среде в SDS смешал через один белок то в синим, то с красным по уменьшению молекулярного веса, потом добавил лизина для блокировки и смесь белков почистил гель-фильтрацией на тойопеарле в денатурирующем элюенте, потом смешал только фракции максимумов пиков. Получился приличный самодельный маркер. Для статейных картинок пользуюсь ферментасовским маркером, а для рядовых переносов - самодельным. Оригинальную статью про изготовление маркеров можно достать здесь -
Electrophoresis. 2002 Sep;23(19):3262-5.
Generation of multicolored, prestained molecular weight markers for gel electrophoresis.
Compton MM, Lapp SA, Pedemonte R.
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002...46F70F56.d04t04