 * |   |
|
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда |  Zbio-wikiNG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: |
|
Правила
* Проблемы с форезом
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.
   |
 Fedor K.Москва  |
 10.02.2002 21:08
Наконец оптимизировав ПЦР (RAPD), наткнулся на проблему: слишком большая толщина полос при разгоне в агарозном геле. Процентность 1,8%; пр-во Хеликон; длины видимых фрагментов 200-2500 п.о. Мало того, что у полосы по бокам образуются "уши", так если сбоку на гель посмотреть, "уши" есть также сверху и снизу! Особенно касается фрагментов >600-800 п.о. Не в вольтаже дело: 2 В/см - это немного. Буфер боратный. Гель большой, заливаю не в крышки от плашек, а в нормальную форму. Мне из-за такой фигни уже противно делать курсач... <img src="graemlins/weep.gif" border="0" alt="[рев в 3 ручья]" /> |
|
artemboudilov Постоянный участник |
10.02.2002 23:16
1. взять более тонкую гребенку. 2. слой буфера над гелем сделать минимальным. 3. "уши", если я правильно понял о чем речь, могут быть вызваны перегрузом. В качестве комментария... А зачем такие мощные гели гонять? Если препаратив - несколько лунок загрузить можно. И чем принципиально может мешать толстая полоса? А уши? Или нужна фота в Nature? :-)) Best regards, непонимающий ARTEMBoudilov |
|
Fedor K. Москва |
10.02.2002 23:31
ОК, попробую. А толстые полосы могут мешать, и еще как, т.к. при RAPD-е на горохе (геном не так уж мал, это не A. thaliana) кол-во полос составляет 15-25, а их распределение на геле случайно. По закону подлости полиморфные полосы располагаются часто очень близко к жирным неполиморфным. Для препараривного фореза можно просто разогнать их подольше, и все тут, но для аналитики нужна просто _полная_ картинка, где одновременно виден весь полиморфизм на данном праймере. |
|
baymak |
11.02.2002 08:47
2. повысила концентрацию геля например до 2.5%, это повысит четкость полос, (для фото можно вообще попробовать акриламид) 3. гнала бы форез очень медленно, качество картинки при близком расположении полос будет выше. |
|
|
11.02.2002 09:45
A RAPD, esli ya pravil'no pomnyu - eto kogda PCR po 45 cyklov gonyayut s 10b primerami? Togda "ushi" - ne samaya bol'shaya problema... |
|
FlyinGonzalez Участник San Diego, CA |
11.02.2002 15:06
|
|
Fedor K. Москва |
11.02.2002 21:30
|
|
IAM1688 IP-штамп: fr4iy3.kHUw02 гость |
 24.10.2021 12:40
into its component parts and present a formulaic approach that will provide a basic structure for our students to follow.Once this structure is mastered, students can of course begin to play with things.But, until then, there is plenty of room within the discipline of the basic structure for students to express themselves in the article form. |
|
watchesonline89 Постоянный участник |
25.12.2022 09:14
|
|
watchesonline89 Постоянный участник |
25.12.2022 09:14
|
| « Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |
 |
· Викимарт - все интернет-магазины в одном месте · Доска объявлений Board.com.ua ·
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Powered by Invision Power Board(Trial) v2.0.0 © 2024 IPS, Inc.