Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
KiraKoroleva Санкт-Петербург |
Как еще можно эффективно лизировать клетки в отсутствии френч-пресса и соникатора? |
ksm Постоянный участник |
особенно лизоцим-продуцирующие |
Tom1 Постоянный участник |
Такie реагентy + лизоцим + бензонаса. и будет счастье... пользуем их для получения милиграммовых количеств белков из колей и дрожжей.
|
ksm Постоянный участник |
(Tom1 @ 31.05.2018 16:39) Такie реагентy + лизоцим + бензонаса. и будет счастье... пользуем их для получения милиграммовых количеств белков из колей и дрожжей. B-PER is basically two components: 1. ~0.5% octyl-beta-thioglucopyranoside 2. 25 mM TRIS pH 7.5 ... Сообщение было отредактировано ksm - 31.05.2018 15:48 |
Tom1 Постоянный участник |
(ksm @ 31.05.2018 05:48) B-PER is basically two components: 1. ~0.5% octyl-beta-thioglucopyranoside 2. 25 mM TRIS pH 7.5 ... Шустрый аки електровеник...))))) |
ksm Постоянный участник |
вы, часом, не проверяли, белки активность в нем сильно теряют? |
Tom1 Постоянный участник |
(ksm @ 31.05.2018 06:29) пока проблем не было.... белки были протеазы ТЕВ и ТВМВ, парочка нуклеаз, куча цитохромов, антитела и полноразмерные и фабы, несколько киназ, 3 фосфотазы и много какие исчо.... это из личного опыта.... рядом тоже много чего выделяли и проблем не было...
|
KiraKoroleva Санкт-Петербург |
(Tom1 @ 31.05.2018 16:39) Такie реагентy + лизоцим + бензонаса. и будет счастье... пользуем их для получения милиграммовых количеств белков из колей и дрожжей. Подскажите, пожалуйста, в каком количестве добавляете бензоназу? |
Tom1 Постоянный участник |
(KiraKoroleva @ 31.05.2018 06:50) я получал где-то 3мг/мл добавлял 20-30мкл на 100мл суспензии клеток т.е. где-то 18-20 грамм осадка замороженного. |
Tom1 Постоянный участник |
(KiraKoroleva @ 31.05.2018 06:50) Б-пер/Вай-пер 3/1. лизоцим 1 мг/мл соль по вкусу))) буфер тоже по " вкусу". осадок гомогенизировал на електрическом гомзике на льду 25-30 минут .... |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |