Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* ПЦР диагностика лимфомы Беркитта
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! V.A.




 прочитанное сообщение 05.05.2011 15:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Здравствуйте! Собираемся наладить в лаборатории диагностику МРД при лимфоме Беркитта методом ПЦР. Может кто-то уже разработал методику и немного в этом разбирается. Прошу откликнуться.
Пока мучаюсь с ПЦР длинных фрагментов, транслокация c-myc/Ig H. реакция вроде проходит, четко видны бенды контрольного гена (c-myc), а вот с транслокацией ничего не выходит: много неспецифических бендов, так что не понять где нужный. Подскажите что делать. (Праймеры брали из статьи)
Участник оффлайн! Noom
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.05.2011 13:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Праймеры проверьте бластом чему они еще кроме вашей мишени комплиментарны. Это обязательный пункт при работе с праймерами 'из статьи'.
Участник оффлайн! genseq
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.05.2011 16:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Можно посмотреть праймеры?
Дайте ссылку или последовательности.
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 09.05.2011 18:54     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

(V.A. @ 05.05.2011 15:30)
Ссылка на исходное сообщение  Здравствуйте! Собираемся наладить в лаборатории диагностику МРД при лимфоме Беркитта методом ПЦР. Может кто-то уже разработал методику и немного в этом разбирается. Прошу откликнуться.
Пока мучаюсь с ПЦР длинных фрагментов, транслокация ц-мыц/Иг Х. реакция вроде проходит, четко видны бенды контрольного гена (ц-мыц), а вот с транслокацией ничего не выходит: много неспецифических бендов, так что не понять где нужный. Подскажите что делать. (Праймеры брали из статьи)


замучутесь все "транслокации беркутов мерють" frown.gif эта транслокация не единственная у беркутов и урядли поможет при диагностике frown.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  09.05.2011 19:03     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/P...one.0007089.pdf
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 09.05.2011 22:32     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

(V.A. @ 05.05.2011 16:30)
Ссылка на исходное сообщение  Здравствуйте! Собираемся наладить в лаборатории диагностику МРД при лимфоме Беркитта методом ПЦР. Может кто-то уже разработал методику и немного в этом разбирается. Прошу откликнуться.
Пока мучаюсь с ПЦР длинных фрагментов, транслокация c-myc/Ig H. реакция вроде проходит, четко видны бенды контрольного гена (c-myc), а вот с транслокацией ничего не выходит: много неспецифических бендов, так что не понять где нужный. Подскажите что делать. (Праймеры брали из статьи)

Не очень понятно в чем будет заключаться "диагностика МРД при лимфоме Беркитта методом ПЦР"? confused.gif Поясните про "Методику". плз.
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 10.05.2011 08:40     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(-Ъ- @ 09.05.2011 22:32)
Ссылка на исходное сообщение  Не очень понятно в чем будет заключаться "диагностика МРД при лимфоме Беркитта методом ПЦР"? confused.gif Поясните про "Методику". плз.

http://bloodjournal.hematologylibrary.org/.../90/6/2456.long
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  11.05.2011 10:30     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Nature. 2011 Apr 21;472(7343):375-8. Epub 2011 Apr 3.
Genome-wide analysis reveals novel molecular features of mouse recombination hotspots.
Smagulova F, Gregoretti IV, Brick K, Khil P, Camerini-Otero RD, Petukhova GV.
Source

1] Uniformed Services University of the Health Sciences, Bethesda, Maryland 20814, USA [2].
Abstract

Meiotic recombination predominantly occurs at discrete genomic loci called recombination hotspots, but the features defining these areas are still largely unknown (reviewed in refs 1-5). To allow a comprehensive analysis of hotspot-associated DNA and chromatin characteristics, we developed a direct molecular approach for mapping meiotic DNA double-strand breaks that initiate recombination. Here we present the genome-wide distribution of recombination initiation sites in the mouse genome. Hotspot centres are mapped with approximately 200-nucleotide precision, which allows analysis of the fine structural details of the preferred recombination sites. We determine that hotspots share a centrally distributed consensus motif, possess a nucleotide skew that changes polarity at the centres of hotspots and have an intrinsic preference to be occupied by a nucleosome. Furthermore, we find that the vast majority of recombination initiation sites in mouse males are associated with testis-specific trimethylation of lysine 4 on histone H3 that is distinct from histone H3 lysine 4 trimethylation marks associated with transcription. The recombination map presented here has been derived from a homogeneous mouse population with a defined genetic background and therefore lends itself to extensive future experimental exploration. We note that the mapping technique developed here does not depend on the availability of genetic markers and hence can be easily adapted to other species with complex genomes. Our findings uncover several fundamental features of mammalian recombination hotspots and underline the power of the new recombination map for future studies of genetic recombination, genome stability and evolution.
Участник оффлайн! V.A.




 прочитанное сообщение 11.05.2011 11:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Ссылка на статью
http://www.haematologica.org/cgi/reprint/89/7/818

Разрабатываем дианостику МРД у больных ЛБ пока с t(8;14).
В статье у них все хорошо получается, пыталась делать все по статье, но ПЦР вообще не идет. Пытаюсь подобрать другие условия. Увеличила температуру отжига до 75 С и время элонгации до 10 мин, вроде неспецифика ушла, но исчез и один из контрольных генов. confused.gif
Участник оффлайн! genseq
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.05.2011 16:02     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

Спасибо за статью. Задачка оказалась высшего уровня сложности. Похоже, пока от первоисточников отступать не стоит. Можно, конечно, попытаться сделать праймеры получше (повысить специфичность 3'-концов, разобраться с возможными шпильками, увеличить Tm), но разбираться придётся долго, а жизнь коротка.
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.05.2011 17:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

это как- повысить специфичность концов? В чем она измеряется и каковы критерии? Совет из серии бессмысленных. Надо просто перебором нескольких пар подобрать лучшую комбинацию- никто мудрее эмпирики ничего не придумал. Так и разрабатывают все диагностики- перелопачивают кучу дерьма и получают работающую систему. Конечно, не только в самих праймерах дело, много параметров, которые стоит оптимизировать. И наивно думать, что поболтав денек-другой в форуме, можно что-то получить
Кстати, отжиг на 75гр- нонсенс, если сама полимераза работает на 72! Выше 68 вообще нет смысла задирать, а формула стандартная перестает работать. Пробуйте иные структуры олигов

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): ship
Участник оффлайн! genseq
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.05.2011 18:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

(V.A. @ 11.05.2011 09:48)
Ссылка на исходное сообщение  Ссылка на статью
  http://www.haematologica.org/cgi/reprint/89/7/818

Разрабатываем дианостику МРД у больных ЛБ пока с t(8;14).
В статье у них все хорошо получается, пыталась делать все по статье, но ПЦР вообще не идет. Пытаюсь подобрать другие условия. Увеличила температуру отжига до 75 С и время элонгации до 10 мин, вроде неспецифика ушла, но исчез и один из контрольных генов.  confused.gif


Вот ещё пара ссылок. Правда, не на праймеры:

Сообщение было отредактировано genseq - 11.05.2011 18:52

Файл/ы:

скачать файл Review_Article.pdf
размер: 649.31к
кол-во скачиваний: 577



скачать файл Detection_of_minimal_residual_disease.pdf
размер: 571.76к
кол-во скачиваний: 2054


Участник оффлайн! genseq
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.05.2011 21:01     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

Люблю сложные задачки.

Обнаружил статью с анализом распределения точек разрыва в гене myc:
картинка: Myc.JPG
Судя по картинке, большинство используемых Вами праймеров захватывают много лишнего (829; 1611; 2410; 3250; 4458; 4885; 8151). Для большинства транслокаций можно подобрать 2...3 праймера, которые при любом раскладе будут давать ампликоны длиной меньше 1...2 т.п.о..

P.S.: спасибо Tom1 за оперативность. Он прислал статью почти сразу после моего запроса на Full text.

Сообщение было отредактировано genseq - 11.05.2011 21:04

Файл/ы:

скачать файл kulibin.pdf
размер: 287.64к
кол-во скачиваний: 860


Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.05.2011 10:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

да уж, праймеры дизайнить- не форезницы лепить! Все могем, едренть, как Леонардо наш, не побоюсь этого слова, Да Винчи- и велосипед с вертолетом изобретать. и картины писать, и наукой заниматься и еще бездну всего-всего. И секвенить, и диагностикумы делать, и задачки сложные тонким перышком в тетрадь. Это ведь наверняка далеко не все- и грибочки мариновать, и рыбку поудить, и в форуме помодерировать. А стихи, во- стихи не пишите? Помогу с изданием нетленки
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.05.2011 10:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

а то потомки проклянут- гения пробакланили, не признали современники. Так ведь признали!
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 12.05.2011 15:04     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

Что-то не очень смешно... Раньше был другой юмор у диджея... frown.gif
Участник оффлайн! genseq
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 13.05.2011 08:38     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

Вернёмся к теме.

Информация к размышлению:

При лимфомах рецидивы болезни после химиотерапии необходимо отслеживать на самых ранних стадиях, т.е. обнаруживать одиночные мутантные клетки на фоне большого количества нормальных. Это и есть MRD (minimal residual disease).
Онкогенные мутации чрезвычайно разнообразны и за всеми не уследить, но при особо злобной лимфоме Беркитта довольно часто их маркёрами могут служить транслокации, повреждающие ген myc в результате обмена плечей 8 и 14 хромосом - t(8;14).
Основной причиной транслокаций являются ошибки системы рекомбинации, обеспечивающей многообразие вариабельных участков тяжёлых цепей иммуноглобулиной. Чаще всего такая рекомбинация происходит в четырёх компактных локуса (условно - 01, 02, 03 и JH), но при незаконной рекомбинации "половинки" эти локусов могут стыковаться с другими хромосомами довольно произвольно. Если стыковка повреждает myc или какой-либо другой важный ген, и если одна из аллелей уже повреждена (имеется генетическая предрасположенность к онкологическим заболеваниям), то это может привести к развитию лимфомы.

Наиболее прогрессивный подход - секвенирование участка стыковки хромосом и подбор для каждого пациента индивидуальной пары праймеров. Менее прогрессивный, но более дешёвый - использование набора стандартных праймеров, у которых есть шанс захватить участок стыковки хромосом. Чем длиннее ампликоны, тем выше шансы, поэтому желательно использовать Long Distance PCR. Но добиться высокой специфичности LD PCR при высокой концентрации геномной ДНК очень сложно.

Возможное решение - уменьшить длину ампликонов и повысить специфичность праймеров. Это немного уменьшит шансы захвата точки рекомбинации хромосом, но лучше так, чем никак. Но можно и без жертв, если проверять больше ампликонов, но меньшей длины.

Если есть желание поиграться с не литературными праймерами, то могу подобрать.
Участник оффлайн! RJ Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 13.05.2011 21:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

много буков. И что? Без пол-литра...
Участник оффлайн! genseq
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  14.05.2011 07:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

1003 11 May 2011

DNA file: MYC.SEQ [10996]
>gi|11493193|emb|X00364.2| Homo sapiens MYC gene for c-myc proto-oncogene and

OPTIMAL ANNEALING TEMP.: 61.9°
Product length: 1003 bp; 59.0% GC
Tm(prod.-less stable primer): 21.0°
Primers Tm difference: 0.5°
Upper:1983 (26) ->-------
Lower:2962 (24) -------<-
3'-ends dG: U=-6.7 L=-6.4

╔═══════╤════════╤════════╤════════╤══════╗
║ Oligo │ Tm [°C]│ nmol/OD│ µg/OD'│ Mr ║
╠═══════╪════════╪════════╪════════╪══════╣
║ Upper │ 62.4│ 4.13│ 32.9│ 7961║
║ Lower │ 61.9│ 3.85│ 29.2│ 7598║
╚═════════════════════════════════════════╝





OPTIMAL ANNEALING TEMP.: 61.5°
Product length: 1557 bp; 57.0% GC
Tm(prod.-less stable primer): 20.0°
Primers Tm difference: 0.5°
Upper:1983 (26) ->-------
Lower:3515 (25) -------<-
3'-ends dG: U=-6.7 L=-6.1


╔═══════╤════════╤════════╤════════╤══════╗
║ Oligo │ Tm [°C]│ nmol/OD│ µg/OD'│ Mr ║
╠═══════╪════════╪════════╪════════╪══════╣
║ Upper │ 62.4│ 4.13│ 32.9│ 7961║
║ Lower │ 61.9│ 4.30│ 32.5│ 7565║
╚═════════════════════════════════════════╝




> UPPER PRIMER: Positive strand of MYC.SEQ, pos. 1983:
TCCGCCTGCGATGATTTATACTCACA

> LOWER PRIMER: Negative strand of MYC.SEQ, pos. 2962:
AGCGCAGGAATGGGAGAAAAGACA

> LOWER PRIMER: Negative strand of MYC.SEQ, pos. 3515:
GCCTACCCAACACCACGTCCTAACA

Сообщение было отредактировано genseq - 14.05.2011 07:50
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 14.05.2011 15:48     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

(RJ Dio @ 12.05.2011 11:05)
Ссылка на исходное сообщение  да уж, праймеры дизайнить- не форезницы лепить! Все могем, едренть, как Леонардо наш, не побоюсь этого слова, Да Винчи- и велосипед с вертолетом изобретать. и картины писать, и наукой заниматься и еще бездну всего-всего. И секвенить, и диагностикумы делать, и задачки сложные тонким перышком в тетрадь. Это ведь наверняка далеко не все- и грибочки мариновать, и рыбку поудить, и в форуме помодерировать. А стихи, во- стихи не пишите? Помогу с изданием нетленки

Ты скоро автограф у Генсека будешь просить, так чта... tongue.gif
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  13.12.2021 10:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

https://archives.profsurv.com/forum/Profess...ert/-67881.aspx
https://atlanta.bubblelife.com/community/an...ex_Watch_Online
https://gumroad.com/rolexrelicawatches/p/di...replica-watches
https://onmogul.com/stories/guide-on-how-to...ex-watch-online
https://list.ly/i/5704105
https://www.behance.net/gallery/114237003/Replica-Rolex
https://www.mlbdailydish.com/users/Replicarolexwatches
http://replicawatches24.simplesite.com/
https://watcheshutuk.cabanova.com/
https://www.pinterest.com/watcheshutuk/_saved/
https://www.linkedin.com/pulse/guide-how-pu...online-hei-bai/
https://justpaste.it/8t11q
https://padlet.com/watcheshutuk/in2opwnfmnmclce8
https://www.allforxi.com/users/Replicarolexwatches
https://profile.hatena.ne.jp/Rolexrelicawatches/profile
nigoal123
IP-штамп: frY/5Vmfd77P.
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  02.02.2022 11:31     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

List your name in the article 123สล็อต to define who is writing it if คาสิโนออนไลน์ your project requires this step. dreamgaming Some companies may require แทงบอล you to keep your name and include เซ็กซี่บาคาร่า Your enthusiasm will show in your writing

your social media channels SA Gaming of and will be much more หวย and contact information to engage with their readers QR Code engaging for your readers. สล็อตออนไลน์ You may need to speak with nigoal123 the writer makes an argument.
Участник оффлайн! thomaslist
Участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  04.04.2022 12:11     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

Nike Soccer Outlet
polo ralph lauren outlet online
Adidas Products In White Black
Fitflop Clearance
Pandora Earrings Sale
Wholesale ED Hardy T-Shirts
Puma Running
Mulberry Satchel Bag
Cheap Oakley Wholesaleus
Nike Air Max Plus USA Fashion
Soccer Shoes Outlet
Ecco Kids
China Nike Air Max 90 Cheap
Nike Blazer Buy White
Fjallraven Backpacks
Nike Mercurial Vapor
Womens Ed Hardy Hoodies Sale
Balenciaga Triple S
49ers NFL Jerseys
Jordan Shoes Online
Asics Onitsuka Tiger
Low Price Pandora Jewelry
Buy Online Nike AJ Shoes
Love Kills Slowly T Shirts
Adidas Basketball Shoes
Ed Hardy Love Kill Slowly
Air Jordan High Red Bule
Oakley Sunglasses Outlet
Pandora Official Site
Swarovski Rings
Nike Air Jordan
Adidas Boost For Sale
Wholesale online Salomon Running Shoes
Fitflop Shoes
ED Hardy Shopping
MontBlanc Starwalker
Nike Air Max 97 Online Shopping
Replica NFL Jerseys
Golden Goose Hi Star
Denmark Adidas NMD Boost
Polo Outlet USA
Snapback Caps
New York Nike Air Jordan
Polo Ralph Laurens for women
Longchamp Le Pliage
Skechers Shoes
salomon xa pro 3d
Nike Air Force 1 Gift
adidas outlet
Sale Adidas Soccer Jerseys Online
Nike Air Jordan EU
Ralph Lauren Shirts
Toms Boots
Adidas Soccer Jerseys US New York
Ralph Lauren Polos
Buy Snapbacks Caps
where can i buy Ed Hardy
Christian Louboutin Red Soles
Christian Louboutin Mary Jane Pumps
Ferragamo Shoes
Ed Hardy Beach Pants Discount
Authentic Adidas Discount Outlet
Golden Goose Sale
Nike Air Max White Black
Fila Sneakers
Air Jordan Mid Online
Home Nike Air Jordan Low UK
Tory Burch Flip Flops
Polo Ralph Lauren Official Website Discount
Nike Kyrie Shoes US Save Off
Montblanc Pen
Salomon Boots
Jimmy Choo Slingbacks
True Religion Jeans Sale
Nike Shoes Just For You
Best Adidas NMD Boost Online
Adidas Yeezy Boost Sale
US Outlet Golden Goose Superstar
Mulberry Backpack
Discount Sale Salomon
Juicy Couture Tracksuits
Cheap NFL Jerseys From China
Tods Driving Shoes
Pink Adidas Superstar
Soccer Jersey Outlet
ECCO Collection
Jimmy Choo Shoes
Juicy Couture Handbags
Adidas Football Jerseys Wholesale
Birkenstock Pisa
polo ralph lauren outlet
Salomon GTX
True Religion Outlet
Longchamp Canada
Largest Adidas Yeezy Boost Collection
Large Discount Polo Ralph Lauren
Nike Air Jordan Black
Polo Ralph Lauren Plus Size
Soccer Jerseys Online Shop
Genuine Ed Hardy T Shirts
NFL Jerseys Players Number
Pandora Charms 14K
Nike Air Jordan High For Sale
Buy High Quality Nike Air Max
Converse All Star
Fitflop Summer
Adidas X 18 Soccer
Adidas Yeezy Boost For Men
Longchamp Le Pliage
Longchamp Outlet
Men's Ralph Lauren Hoodies New Arrival
Ralph Lauren Polos black
Bape T Shirt
Longchamp Bags
adidas nmd boost
How Much Is Worth Nike Air Force
polo ralph lauren
Oakley Glasses Outlet
UK Online Ralph Lauren
Low Price Ralph Lauren Hoodies
Pandora Necklaces
Bape T Shirt
Tory Burch Outlet
Womens Adidas Shoes
Birkenstock Discount
Worldwide shipping Ed Hardy
Outlet Nike Air Jordan 1 USA
Asics Gel Nimbus
Balenciaga Shoes
Polo Ralph Lauren Shop Free
Discount Fitflops
Adidas UAS Sale
ralph lauren polo shirts
Balenciaga Sneakers
Fjallraven Kanken Backpacks
Jimmy Choo Shoes
Fitflop Slippers
Christian Louboutin Heels
Puma Ferrari
Fjallraven Backpacks
adidas neo
Pandora Gift Official Site
Golden Goose Sale
Pandora Charms Superior Quality
Discount Oakley Sunglasses
Birkenstock Arizona
Spain Football Jerseys Low Price
Ecco Fitness Collection
Cheap Snapbacks
Ferragamo Shoes
Balenciaga Sneakers
Salomon Speedcross Fashion Designs
Converse All Star
Asics Outlet
Snapback Hats Wholesale
Pandora Charms Quality And Quantity
Longchamp Tote
Birkenstock Bali
Big Pony Ralph Lauren
Skechers Running Shoes
Salomon Shoes
Toms Classic Shoes
Bape T Shirt
Bape Jackets
Asics Running Shoes
Pandora Jewelry Official Site
Golden Goose Size
Jimmy Choo Slingbacks
Salvatore Ferragamo
Swarovski Crystal
Adidas Nemeziz Store Online
Pandora Necklaces
Ralph Lauren USA UK
Salvatore Ferragamo
US Mens Nike Kobe Shoes
Fjallraven Festival Season
Oakley Eyewear
Pandora Charms
Tods Moccasins
Nike Air Max Wholesale Online USA
Участник оффлайн! Mala636
Постоянный участник
Lahore, Punjab, Pakistan



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  01.10.2022 15:10     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

F1 Removal is a well known movers and packers company all over the UK. We have been working since 1980 providing professional moving services according to the need of the customers. We have highly trained staff for all sort of moving services during relocation.

Removals Company | Removals Company in London | Office Removal in London | Office Removals London | Relocation Companies London | Removals Company in London | Moving Company in London | Moving Company | Movers in London | Man and Van in London | House Removals in London | House Removals | Packers and movers in London | Packers and movers London | Movers and Packers in London | Relocation Company in London | Commercial Removals | Local Movers | Long Distance Mover | Long Distance Movers | Long Distance Moving Company | renovations | london renovations | renovation companies in london | renovations company london | house renovation in london | Kitchen renovation london | Kitchen fitting london | Kitchen fitters in London | bathroom renovations london | painters and decorators in london | painting and decorating in london | painters in london | london decorators | vinyl tile flooring | vinyl flooring | laminate flooring | parquet flooring | wood flooring | parquet flooring london | luxury vinyl flooring | lvt flooring | wood flooring london | karndean flooring | herringbone flooring | laminate flooring london | amtico flooring | bathroom floor tiling | bathroom tiling | kitchen tiling | floor tiling | porcelain tiling | terrazzo tiling | painting and decorating leicester | painter and decorator ealing | painting and decorating brighton | local decorators
Участник оффлайн! Ufa1688
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  07.10.2022 20:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

In that case the ufabet เข้า สู่ระบบ shooter was said ทางเข้าufa1688 to have erupted after an argument aff 1688 with another soldier over ufa1688 a land-selling commission UFA1688 fee. In this case, the motive ราคาบอล is unclear but after terrorizing สล็อตออนไลน์ the childcare center, Panya Kamrab ลิงค์รับทรัพย์ a 34-year-old former policeman drove แฮนดิแคป home and shot his wife and child บอลสเต็บ before taking his own life.
guest: 123vega
IP-штамп: frXqkB4MpP2jQ
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  12.11.2022 12:38     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

A long, beautiful stretch SUPERSLOT เครดิตฟรี of sand in Australia's สล็อต โร มา เว็บตรง tropical far north, Wangetti Beach, was Toyah ทดลองเล่นสล็อตโรม่า Cordingley's favourite beach. It is also where she died, in what ROMA SLOT has been called a "frenzied and brutal and sadistic" attack. SLOT JOKER The 24-year-old had gone to the SLOTXO beach to walk her dog on 21 October 2018, as she เครดิต ฟรี กด รับ เอง 50 บาท had done countless times before, but never came home. The PG SLOT ซื้อฟรีสปิน next morning her father found her "messed up" body half buried in sand dunes. Her JOKER ROMA เว็บตรง beloved dog was tied up nearby, unharmed. Four PG SLOT ทางเข้า years on, Australian authorities are appealing for the public's help in an international hunt to find the man they believe killed Toyah - Rajwinder Singh.
Участник оффлайн! Ufa1688
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  14.03.2023 08:07     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

David Carrick ทาง เข้า ufabet a serial sex offender ufabet vip served in one of Britain’s ทาง เข้า ufabet มือ ถือ most elite armed police units แฮนดิแคป คือ for years. He is now behind bars 123goal but his ability to evade justice nigoal123 has only fueled a growing distrust app aff1688 and anger toward police ปั่นสล็อต in the United Kingdom. CNN has เกมสล็อต investigated how failures may have prevented สูตรสล็อต Carrick from being stopped sooner.
Участник оффлайн! Ufa1688
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  07.06.2023 21:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

Chair umpire ปั่นสล็อต Alexandre Juge issued เกมสล็อต a code violation before grand สูตรสล็อต slam supervisor Wayne ทาง เข้า ufabet McKewen and tournament referee Remy ufabet vip Azemar appeared on Court 14. After ทาง เข้า ufabet มือ ถือ discussions between แฮนดิแคป คือ the officials and the 123goal players, it was announced nigoal123 Kato and Sutjiadi had been app aff1688 defaulted.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 29.03.24 14:21
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft