Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Gilgamew |
Заранее благодарен! |
MMM Постоянный участник |
1) Вряд ли вам такая рокировка поможет. 2) Никому подобный маразм и в голову не приходил, и соответственно никто такими извращениями не занимался. 3) заингибировать нафиг пероксидазу и сохранить при этом антитела - нетривиальная задача. Вы конечно можете попробовать например обработать ее минут 15-20 10% перекисью, а потом на G25 колонку для избавления от перекиси, но что при этом случится с антителами, выживут не выживут сказать трудно. Другой вариант берем и выдерживаем в 1% азиде с 0,1М ЭДТА и потом отмываем опять же гель-фильтрацией или диализом с целью отодрать железо из гема. Но не факт что железо из второго коньюгата(или из дистиллята не активирует этот. Надо проверять все. Так что пока проверять будете новые антитела как раз придут, а защиту на осень перенесете. |
Gilgamew |
Подобную рокировку уже неоднократно использовали и иногда это даёт эффект. Извините, не могу вдаваться в подробности, так как коммерческий проект. Понимаю, что "убивать" HRP - смешная идея, параллельно пробуем другие варианты. Спасибо за предложенные схемы - если что, попробуем. |
MMM Постоянный участник |
Это может давать эффект только в одном случае антитела, которые плохо работают на субстрате - гавеные их лучше вообще не использовать ни на субстрате, ни сверху - просто выкинуть их в педальное ведро и перейти к следующим. Ну, как бы если проект коммерческий, то неча недонабор выпускать на рынок, пусть R&D выйдет дороже зато продукт будет достойный. А поспешишь людёв насмешишь. |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |