Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Удаление пероксидазной метки с антител -- кто знает быстрый способ? --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Gilgamew




 прочитанное сообщение 25.05.2017 12:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Не вдаваясь в подробности - есть пара антител для ИФА, из которых "верхние" - конъюгат с пероксидазной меткой, "нижние" - свободные. Но в таком формате анализ не получается, хочется поменять местами (чтобы "верхние" были в подложке, а "нижние" - сверху, и дальше детекция с помощью антивидовых). Но проблема в пероксидазной метке, которая будет в таком случае из подложки "светить". Есть ли легко доступный и быстрый способ удалить или намертво заингибировать пероксидазу на конъюгате, чтобы она не мешала? Может быть, кто-то делал так? Проблема в том, что времени мало - надо быстро попробовать, а не ждать, когда придут аналогичные антитела без метки (такие есть...).
Заранее благодарен!
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 25.05.2017 15:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Господя! Пути студенческого изврата неисповедимы.

1) Вряд ли вам такая рокировка поможет.
2) Никому подобный маразм и в голову не приходил, и соответственно никто такими извращениями не занимался.
3) заингибировать нафиг пероксидазу и сохранить при этом антитела - нетривиальная задача.

Вы конечно можете попробовать например обработать ее минут 15-20 10% перекисью, а потом на G25 колонку для избавления от перекиси, но что при этом случится с антителами, выживут не выживут сказать трудно.

Другой вариант берем и выдерживаем в 1% азиде с 0,1М ЭДТА и потом отмываем опять же гель-фильтрацией или диализом с целью отодрать железо из гема. Но не факт что железо из второго коньюгата(или из дистиллята не активирует этот. Надо проверять все.

Так что пока проверять будете новые антитела как раз придут, а защиту на осень перенесете.
Участник оффлайн! Gilgamew




 прочитанное сообщение 25.05.2017 20:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Да не защита и не студент я...

Подобную рокировку уже неоднократно использовали и иногда это даёт эффект. Извините, не могу вдаваться в подробности, так как коммерческий проект. Понимаю, что "убивать" HRP - смешная идея, параллельно пробуем другие варианты.

Спасибо за предложенные схемы - если что, попробуем.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 25.05.2017 20:36     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

--Подобную рокировку уже неоднократно использовали и иногда это даёт эффект.

Это может давать эффект только в одном случае антитела, которые плохо работают на субстрате - гавеные их лучше вообще не использовать ни на субстрате, ни сверху - просто выкинуть их в педальное ведро и перейти к следующим.

Ну, как бы если проект коммерческий, то неча недонабор выпускать на рынок, пусть R&D выйдет дороже зато продукт будет достойный. А поспешишь людёв насмешишь.
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.11.2021 15:22     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

https://replicawatches24.tumblr.com/post/64...lica-watches-uk
https://ello.co/replicawatchesuk/post/ubut9ig9g4glx-q6nyphka
https://www.evernote.com/shard/s451/client/...%2BWatches%2BUK
https://www.bloglovin.com/@rolexrelicawatch...replica-watches
https://www.designspiration.com/watcheshutuk/saves/
https://write.as/fakerolexwatches/hints-to-...lica-watches-uk
https://www.dailystrength.org/journals/hint...lica-watches-uk
https://issuu.com/replicawatchesuk/docs/dif...he_replica_watc
https://www.keepandshare.com/discuss2/5601/...lica-watches-uk
https://penzu.com/public/9e250377
https://bestreplicawatc.livejournal.com/336.html
https://www.pearltrees.com/replicawatchesuk/item349627941
https://www.intensedebate.com/people/watches24
https://anonfiles.com/N039Qf66q9/Guide_On_H...atch_Online_pdf

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 28.03.24 16:35
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft